Технология получения и контроль качества липосомальной лекарственной формы фотосенсибилизатора – фотодитазина для фотодинамической терапии

• Автор: Чан, Иен Тхи Хай
• Шифр специальности: 14.04.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 124 с. : 10 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Обзор литературы

1.1. Фотодинамическая терапия опухолей

1.2. Фотосенсибилизаторы

1.2.1 .Классификация фотосенсибилизаторов

1.2.2.Фотосенсибилизаторы хлоринового ряда

1.2.2.1. Фотодитазин

1.2.2.2.Радахлори н

1.2.2.4. Фотолон

1.2.2.5. Фоскан
1.3 Липосомы в фотодинамической терапии (ФДТ)
1.3.1 Липосомы триметилового эфира хлорина ев
1.3.2. Липосомальный препарат шТНРС
1.4. Технологические этапы получения липосомальных препаратов
1.4.1. Методы получения многослойных липосом
1.4.2. Метод получения больших однослойных липосом
1.4.2. Методы получения малых однослойных липосом
1.4.2.1. Детергентный диализ
1.4.2.2. Гомогенизация под давлением
1.4.2.3. Метод озвучивания липосом
1.4.2.4. Экструзионный метод
1.4.2.5. Метод инжекции
1.4.3. Сушка липосомальной дисперсии
1.4.3.1 Метод сублимационной сушки
1.4.3.2. Криопротекторы
1.5 Контроль качества липосомальных препаратов
1.5.1. Определение размеров липосом
1.5.2. Определение эффективности включения лекарственного вщества в липосомах
1.5.3. Определение степени окисления липидных компонентов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Материалы и реактивы
2.2. Оборудования
2.3. Метод получения больших многослойных липосом
2.4. Метод получения малых однослойных липосом
2.5. Методика измерения диаметра липосом
2.6. Определение эффективности включения фотодитазина в липосомы
2.7. Методика количественного определения фотодитазина в липосомальной лекарственной форме
2.8. Биологические методы изучения противоопухолевой активности липосомального фотодитазина
2.9. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. Разработка методик, используемых в получении и контроле качества
липосомальной лекарственной формы фотодитазина (ЛЛФФ)
3.1. Разработка оптимальной технологии получения ЛЛФФ
3.1.1 Выбор оптимального молярного соотношения суммы липидов и фотодитазина при разработке ЛЛФФ
3.1.2. Выбор оптимального молярного соотношения липидных компонентов при разработке ЛЛФФ
3.1.3 Разработка технологии повышения эффективности включения фотодитазина в липосомы при разработке ЛЛФФ
3.1.4 Разработанная методика получения ЛЛФФ
3.1.5 Методика получения пустых липосом
3.2. Разработка методики спектрофотометрии для качественного и количественного* анализа ЛЛФФ
3.2.1. Изучение характера поглощения электромагнитного излучения липосомальным фотодитазином в УФ- и видимой областях спектра для качественного определения фотодитазина
3.2.2. Разработка методики количественного определения фотодитазина в ЛЛФФ
3.3. Разработка методики определения эффективности включения фотодитазина в
липосомы
3. 4. Применение метода тонкослойной хроматографии для качественного анализа ЛЛФФ
3.4.1. Методика определения фотодитазина в ЛЛФФ методом ТСХ
3.4.2. Методика определения яичного фосфатидилхолина в ЛЛФФ
З.4.2.1. Система хлороформ : метанол : вода (65:25:4)
3.4.2.2. Система н-бутанол: ледяная кислота: вода (12:3:5)
3.4.2.3. Система хлороформ : метанол : ледяная уксусная кислота : вода (25:15:4:2) или (60:50:1:4)
3.5. Методика определения степени окисления липидов липосом с инкапсулированным фотодитазином
3.6. Химико-фармацевтический анализ ЛЛФФ
3.6.1. Определение размера липосом
3.6.2. Определение количественного содержания фотоднтазина в липосомальной дисперсии
3.6.3. Определение эффективности включения фотоднтазина в липосомьт
3.6.4. Определение степени окисления липидов липосом с фотодитазином
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ГЛАВА 4. Изучение липосомальной лекарственной формы фотоднтазина для применения в ФДТ
4.1. Изучение селективности накопления липосомального фотоднтазина в опухоли Эрлиха (Е1ЛЗ) мышей
4.2. Изучение эффективности ФДТ с липосомальным фотодитазином на опухоли Эрлиха
мышей
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ГЛАВА 5. Разработка технологии лиофилизации липосомальной дисперсии фотоднтазина
5.1. Выбор режима замораживания и процесса сушки
5.2. Выбор криопротектора
5.2.1. Изучение влияния криопротекторов на размер липосом в процессе лиофилизацииЮЗ
5.2.2. Изучение влияния криопротекторов на эффективность включения фотодитазина в
липосомы после лиофилизации
5.3. Разработка химико-фармацевтических методик для контроля качества лиофилизированной липосомальной лекарственной формы фотоднтазина (ЛЛФФ-лио)
5.3.1. Разработка спектрофотометрической методики для качественого и количественного определения фотодитазина в ЛЛФФ-лио
5.3.2. Методика определения эффективности включения фотодитазина в липосомы после лиофилизации
5.3.3. Применение метода ТСХ для качественного анализа ЛЛФФ-лио
5.4. Химико-фармацевтические исследования ЛЛФФ-лио
ЗАКЛЮЧЕНИЕ

удалении детергента из водной смеси детергента’и фосфолипидов. Диаметр полученных липосом в зависимости от природы детергента и используемых липидов колеблется от 15 до 300 нм. Разработанная' аппаратура позволяет получать от нескольких миллилитров до сотни литров липосомальной суспензии в день. Хотя для освобождения от детергента используется* диализ, в результате всегда остается часть детергента, поэтому в фармацевтических препаратах следует вводить специальный контрольный тест для характеристики этого нежелательного остатка [86].
1.4.2.2. Гомогенизациячіод давлением
Диспергируемые компоненты продавливаются через микрощель из области высокого в область нормального атмосферного давления. Процессы диспергирования, гомогенизации или дезинтеграции осуществляются за счет резкого падения давления и действия гидродинамических сил турбулентного потока, возникающих в области микрощели.
1.4.2.3. Метод озвучивания липосом
Для экспериментальных целей широко применяется метод получения МОЛ с помощью УЗ, погружая металлический наконечник источника УЗ непосредственно в суспензию МСЛ, хотя для фармацевтических технологий гораздо интереснее'метод "наружного" озвучивания с помощью соникатора "банного" типа. Последний- метод имеет ряд преимуществ, так как менее разрушает липиды, не приводит к образованию аэрозолей, загрязняющих атмосферу в рабочих помещениях, что особенно важно при работе с цитостатиками.
Однако оба метода требуют контроля температурного режима озвучивания, чтобы не инициировать разложение липидов и лекарственных препаратов. Диспергирование следует проводить при низкой температуре, которая в то же время должна превышать температуру наиболее высокоплавкого компонента смеси, чтобы не допустить структурной неоднородности мембраны МОЛ.