Характеристики Т-лимфоцитов ВИЧ-инфицированных пациентов с нарушением восстановления иммунитета при проведении антиретровирусной терапии

• Автор: Сайдакова, Евгения Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Екатеринбург
• Количество страниц: 195 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Классификация ВИЧ

1.2 Строение и репликация ВИЧ

1.2.1 Геном и структура вируса

1.2.2 Жизненный цикл ВИЧ

1.3 Кинетика развития ВИЧ-инфекции

1.3.1 Острая фаза ВИЧ-1-инфекции

1.3.2 Хроническая фаза ВИЧ-1-инфекции
1.3.3 Фаза СПИД
1.4 Принципы высокоактивной антиретровирусной терапии
1.5 Нарушение восстановления иммунитета при ВААРТ
1.5.1 Механизмы истощения иммунной системы при ВИЧ-инфекции
1.5.1.1 Хроническая иммунная активация
1.5.1.2 Транслокация бактериальных продуктов из желудочно-
кишечного тракта
1.5.1.3 Иммунная усталость
1.5.2 Факторы, способствующие истощению иммунной системы при
ВИЧ-инфекции
1.5.2.1 Низкий уровень СБ4+Т-клеток на момент начала лечения
1.5.2.2 Возраст
1.5.2.3 Коинфекции
1.5.2.4 Прочие факторы
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Общие подходы к исследованию
2.2 Клинические группы. Основные характеристики
2.3 Получение биологического материала
2.4 Определение апоптоза
2.5 Цитофлуориметрический анализ
2.6 Магнитная сепарация клеток
2.7 Получение клеточных лизатов для полимеразной цепной

реакции
2.8 Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени
2.9 Статистический анализ данных
ГЛАВА 3. НАРУШЕНИЕ СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА Т-ЛИМФОЦИТОВ У ПАЦИЕНТОВ СО СЛАБЫМ ВОССТАНОВЛЕНИЕМ ИММУНИТЕТА ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ВААРТ
3.1 Изменения лейкоцитарной формулы, содержания CD4f и CD8+
Т-клеток периферической крови у больных с нарушением восстановления иммунитета на фоне антиретровирусной терапии
3.2 Нарушение субпопуляционного состава CD4+ и CD8+ Т-клеток
у ВИЧ-инфицированных больных с неэффективным восстановлением иммунной системы на фоне ВААРТ.
3.3 Нарушение механизма пополнения пула наивных
Т-лимфоцитов
ГЛАВА 4. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ НАРУШЕНИЯ Т-КЛЕТОК У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ СО СЛАБЫМ ВОССТАНОВЛЕНИЕМ ИММУНИТЕТА НА ФОНЕ ВААРТ
4.1 Активация и апоптоз периферических Т-лимфоцитов у
пациентов с нарушением восстановления иммунитета на фоне антиретровирусной терапии
4.2 Нарушение механизма поддержания численности клеток в
субпопуляциях Т-лимфоцитов у пациентов группы ИН
4.3 Нарушение функциональной активности иммунокомпетентных
клеток у пациентов с неэффективным восстановлением CD4+ Т-лимфоцитов на фоне ВААРТ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АПК - Антигенпрезентирующие клетки
APT, ВААРТ - Высокоактивная антиретровирусная терапия
ВГС - Вирусный гепатит С
ВИЧ - Вирус иммунодефицита человека
ДНК - Дезоксирибонуклеиновая кислота
ЖКТ - Желудочно-кишечный тракт
ИН - Иммунологические неответчики
ИО - Иммунологические ответчики
ИП - Ингибиторы протеаз
К - Контрольная группа
кл - Клетки
к.р. - Квартальный размах
ЛПС - Липополисахариды
НИОТ - Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы
ННИОТ - Ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы
ПЦР-РВ - Полимеразная цепная реакция в реальном времени
РНК - Рибонуклеиновая кислота
СПИД - Синдром приобретенного иммунодефицита
ТкР - Т-клеточный рецептор
ТЭ - Терминальные эффекторы
ЦНС - Центральная нервная система
ЦП - Клетки центральной памяти
ЦТЛ - Цитотоксические Т-лимфоциты
ЭП - Клетки эффекторной памяти
TREC - Вырезанные кольца Т-клеточного рецептора (Т cell
receptor excision circles)
Treg - Регуляторная Т-клетка
AnV - Аннексии V (Annexin V)
GM-CSF - Гранул оцитарно-макрофагальный
колониестимулирующий фактор CI - Доверительная область (Confidence interval)
IFN - Интерфероны
IL - Интерлейкины
IgA, IgG, IgM - Иммуноглобулины классов A, G, M
kDa - Килодальтон
МНС - Главный комплекс гистосовместимости
TNF - Фактор некроза опухолей

из семейства АР-1 (Quigley et al., 2010). Показано, что гиперэкспрессия BATF в Т-лимфоцитах человека значительно снижает способность клеток к пролиферации и синтезу IL-2 в ответ на CD3/CD28 сигнализирование (Quigley et al., 2010).
При ВИЧ-инфекции также наблюдается усиленная экспрессия PD1 на моноцитах, которая регулируется микробными продуктами, поступающими из кишечника. Появление PD1 вызывает секрецию IL-10 - цитокина, способного ингибировать пролиферативный ответ антигенспецифичных CD4+ Т-клеток (Said et al, 2010). Следует отметить, что блокада сигнального пути PD1 усиливает пролиферацию CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов (Day et al., 2006; Petrovas et al., 2006), и секрецию разнообразных цитокинов вирус-специфичными CD4+ Т-клетками (Porichis et al., 2001).
Молекула PD1 ко-экспрессируется с другими маркерами иммунной усталости (Jones et al., 2008; Yamamoto et al., 2011; Porichis et al., 2011; Kaufmann et al., 2007; Kassu et al., 2010). Одним из них является белок Tim-3, который также известен своими ингибирующими функциями (Sabatos et al, 2003). Его взаимодействие с лигандом (лектин-9) подавляет активность Thl клеток (Zhu et al, 2005), что в норме индуцирует периферическую толерантность (Sänchez-Fueyo et al, 2003). У ВИЧ-инфицированных пациентов наблюдается повышенная экспрессия Tim-3 на CD4* и CD8+ Т-лимфоцитах (Jones et al., 2008). Количество данных молекул имеет положительную корреляцию с вирусной нагрузкой и отрицательную с содержанием CD4+ Т-клеток в крови. Оно также может служить маркером функционального состояния клеток иммунной системы.
Другим примером молекулы, характеризующей иммунную усталость, может служить CTLA-4 (CD 152). Ее функции, модулирующие Т-клеточный иммунитет, отмечаются при инфекционных и опухолевых заболеваниях (Anderson et al, 2006; Zubairi et al, 2004; Graefe et al, 2004; Leach et al, 1996; Hodi et al, 2003; Phan et al, 2003; Egen et al, 2002). Экспрессия этого маркера увеличивается на активированных Т-лимфоцитах. Связываясь с теми же