Характеристика интерферон-альфа-индуцированных дендритных клеток и их терапевтический потенциал в лечении онкологических и инфекционных заболеваний.

• Автор: Леплина, Ольга Юрьевна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 242 с. : 8 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА ГИНТЕРФЕРОН-АЛЬФА-ИНДУЦИРОВАННЫЕ ДЕНДРИТНЫЕ КЛЕТКИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1Л .Сравнительная характеристика интерферон-а-индуцированных дендритных клеток (ИФН-ДК) и дендритных клеток, индуцированных в стандартном протоколе с использованием ИЛ-4 (ИЛ4-ДК)
1.1.1. Фенотипическая характеристика ИФН-ДК
1.1.2. Функциональные свойства ИФН-ДК
1.1.3. Цитотоксический потенциал ИФН-ДК
1.1.4. Супрессорный/толерогенный потенциал ДК
1.2. Особенности ИФН-ДК при иммунопатологических состояниях
1.2.1. Свойства ДК у больных злокачественными заболеваниями (опухоли головного мозга, злокачественная лимфома, множественная миелома)
1.2.2. Характеристика ДК у больных инфекционно-воспалительными заболеваниями (хронические вирусные гепатиты и гепатиты с исходом в цирроз, туберкулез легких)
1.3. Особенности ДК при физиологической и патологической беременности
1.3.1. Иммуномодулирующее влияние дегидроэпиандростерона
1.4. Возможности использования вакцин на основе ДК в экспериментальных моделях и в клинической практике у больных ЗОГМ
1.4.1. Перспективы применения ДК в лечении злокачественных опухолей головного мозга

1.5. Возможности использования вакцин на основе ДК у больных
хроническими вирусными инфекциями
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2Л. Характеристика больных, включенных в исследование
2.2. Культивирование лимфоцитов
2.2.1 Смешанная культура лимфоцитов
2.3. Генерация дендритных клеток и сбор СН цельных культур клеток
2.3.1. Г енерация ИФН-ДК
2.3.2. Генерация ИЛ4-ДК
2.4. Определение субпопуляций клеток методом проточной
цитофлуориметрии
2.4.1 Оценка способности ДК к эндоцитозу
2.5. Оценка продукции цитокинов
2.6. Определение внутриклеточной экспрессии цитокинов
2.7. Оценка клеточного цикла
2.8. Определение цитостатической/цитотоксической активности ДК
2. 9. Оценка толерогенной/супрессорной активности ДК
2.10. Апробация лечения злокачественных глиом головного мозга (ЗОГМ) с
использованием ИФН-ДК
2.10.1. Исследование общего состояния больных
2.10.2. Исследование качества жизни больных
2.10.3. Оценка реакции ГЗТ in vivo и in vitro
2.11. Клиническая апробации вакцин на основе ИФН-ДК у больных с
вирусными инфекциями
2.12. Статистическая обработка полученных результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИСЛЕДОВАНИИ
3.1. Сравнительная характеристика фенотипических особенностей ИФН-ДК и ИЛ4-ДК
3.2. Характеристика функциональных свойств ИФН-ДК и ИЛ4-ДК
3.2.1. Оценка фагоцитарной активности ИФН-ДК
3.2.2. Продукция цитокинов в культурах ДК
3.2.3. Аллостимуляторная активность ИФН-ДК и ИЛ4-ДК
3.2.4. Thl/Th2 стимуляторная активность ДК
3.2.5. Эффекторные функции ДК
3.2.6. Толерогенные/супрессорные свойства ДК
3.3. Фенотипические и функциональные свойства ИФН-ДК у больных с онкологическими заболеваниями
3.3.1. Характеристика ИФН-ДК у больных с первичными злокачественными опухолями головного мозга (ЗОГМ)
3.3.2. Характеристика ИФН-ДК у больных со злокачественной лимфомой и множественной миеломой
3.4. Фенотипические и функциональные свойства ИФН-ДК у больных с хроническими инфекционными заболеваниями (хроническими вирусными гепатитами В и С и туберкулезом легких)
3.4.1. Характеристика ИФН-ДК у больных хроническими вирусными гепатитами В и С
3.4.2. Характеристика ИФН-ДК у больных туберкулезом легких
3.5. Коррекция in vitro иммунных дисфункций ИФН-ДК у больных с иммунопатологическими состояниями
3.6. Фенотипические и функциональные свойства ИФН-ДК при физиологической и патологической беременности

мембране Т-лимфоцитов после их активации через Т-клеточный рецептор. Показано, что PD-1 экспрессируется на CD4+ и CD8+ Т-клетках, а также на натуральных киллерных клетках, В-лимфоцитах и активированных моноцитах. Идентифицированы два типа лигандов для PD-1, один из которых, обозначенный как PD-L2 (B7-DC или CD273), является индуцибельным и обнаруживается на дендритных клетках, макрофагах и культивированных тучных клетках костномозгового происхождения [243]. Другой лиганд - PD-L1 (В7-Н1 или CD274) конституитивно экспрессируется на Т- и В-клетках, ДК и макрофагах. Кроме того, уровень экспрессии В7-Н1 может повышаться на активированных клетках [74]. Установлено, что В7-Н1 участвует в регуляции апоптоза активированных Т-клеток и конституитивно экспрессируется на большинстве опухолевых клеток человека при опухолевой прогрессии [75].
В качестве потенциального индуктора апоптотической гибели опухолевых клеток (клеток-мишеней) согласно данным литературы может выступать молекула семейства фактора некроза опухоли-альфа TRAIL (TNF-related apoptosis inducing Ligand). Действительно, поверхностная экспрессия TRAIL регистрируется на CDllc+ ДК здоровых доноров в ответ на стимуляцию интерферонами I класса и IFN-y [84]. Кроме того, генерируемые из моноцитов ДК в стандартном протоколе (IL-4/GM-CSF) обладают киллерной активностью против TRAIL-чувствительных опухолевых линий за счет продукции мембранно-связанной формы TRAIL [51]. В то же время есть немногочисленные данные, свидетельствующие о том, что незрелые ИФН-ДК отличаются от ИЛ4-ДК более высоким уровнем внутриклеточной экспрессии TRAIL, что находит отражение в цитотоксической активности ДК против TRAIL-чувствительных опухолевых линий in vitro[139].
Таким образом, можно полагать, что более высокая экспрессия данных молекул на ДК детерминирует апоптоз-индуцирующую активность ДК при их взаимодействии с Т-лимфоцитами или опухолевыми клетками-мишенями и таким образом опосредует цитотоксическую/ингибирующую активность ДК.