Интерлейкин-18: биологические эффекты и перспективы клинического применения.

• Автор: Якушенко, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 208 с. : 2 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Молекулярная структура интерлейкина-18, рецептора ИЛ-18 и интерлейкин-18 связывающего белка

1.1.1 Структура гена ИЛ-

1.1.2 Молекулярная характеристика белка ИЛ-

1.1.3 Молекулярная характеристика рецептора ИЛ-

1.1.4 Молекулярная характеристика ИЛ-18 связывающего белка

1.2 Биологические эффекты интерлейкина-

1.2.1 Биологические эффекты ИЛ-18 in vitro

1.2.2 Биологические эффекты ИЛ-18 in vivo
1.2.3 Биологические свойства ИЛ-18 связывающего белка
1.2.4 Противоопухолевая активность ИЛ-
1.2.5 Антибактериальная активность ИЛ-
1.2.6 Противовирусное действие ИЛ-
1.2.7 Роль ИЛ-18 в патогенезе иммуноопосредованных заболеваний
1.3 Использование ИЛ-18 для лечения онкозаболеваний
Глава 2. Материалы и методы
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1 Получение и характеристика рчИЛ-
3.1.1 Иммунохимическая характеристика рчИЛ-18, полученного из продуцента E.coli
3.1.2 Биологические свойства рчИЛ-18 in vitro
3.1.3 Влияние рчИЛ-18 на формирование иммунного ответа в экспериментальных моделях in vivo
3.2 Получение и характеристика ИЛ-18 связывающего белка
3.2.1 Иммунохимическая характеристика ИЛ-18СБ
3.2.2 Изучение биологической активности рчИЛ-18СБ in vitro
3.2.3 Исследование биологической активности рчИЛ-18СБ in vivo
3.3 Противоопухолевая активность рчИЛ-18 и рчИЛ18СБ
3.3.1 Противоопухолевая активность рчИЛ-18 в модели солидной меланомы В
3.3.2 Противоопухолевая активность рчИЛ-18СБ
3.4 Изучение полиморфизма промоторного региона гена ИЛ-
3.4.1 Изучение ассоциированности продукции ИЛ-18 в культуре МНК
ПК с генотипом ИЛ-
3.4.1.1 Изучение ассоциированности продукции ИЛ-18 в культуре МНК ПК здоровых доноров с генотипом - 607 С—>А ИЛ-
3.4.1.2 Изучение ассоциированности продукции ИЛ-18 МНК здоровых доноров с генотипом -137G->C ИЛ-
3.4.1.3 Изучение влияния генотипа промотора гена ИЛ-18 на уровень продукции ИЛ-18 в культуре МНК ПК
3.4.2 Анализ распределения полиморфных вариантов гена ИЛ-
среди здоровых доноров и больных ВГВ
3.5 Использование рИЛ-18 для индукции специфического иммунного ответа in vitro
3.5.1 Разработка протоколов получения дендритных клеток, презентирующих специфические антигены
3.5.2 Влияние рИЛ-18 на функциональную активность МНК больных гепатитом В, культивированных с ДК
3.5.3 Влияние рИЛ-18 на эффекторные функции МНК,
сокультивированных с ДК больных туберкулезом легких
3.6 Генетически модифицированные растения - новый источник получения рекомбинантных белков
3.6.1 Получение трансгенной моркови, экспрессируующей ген ИЛ-18 человека
3.6.2 Биологическая характеристика трансгенного растения Daucus carota L., несущего ген ИЛ-18 человека
3.6.2.1 Влияние трансгенной моркови, несущей ген чИЛ-18, на спленоциты мышей
3.6.2.2 Влияние трансгенной моркови, экспрессирующей ген ИЛ-18 человека, на иммунный ответ in vivo у мышей
3.6.2.3 Противоопухолевая активность трансгенного растения моркови, несущего ген ИЛ-
Глава 4. Обсуждение полученных результатов
Заключение
Выводы
Список литературы

является растворимым рецептором для ИЛ-18, но не имеющим трансмембранного домена.
Для подробного изучения ИЛ-18СБ в воспалительном ответе in vivo, были выведены мыши, несущие ген ИЛ-18СБ изоформы а, которые были жизнеспособны, фертильны и не имели врожденных аномалий. Высокий уровень биоактивного ИЛ-18СБа, определяемый в плазме трансгенных мышей, был способен нейтрализовать ИФНу -индуцирующую активность экзогенного ИЛ-18. При последующем введении КонА трансгенные мыши продуцировали значительно меньшие количества ИФНу и MIP-1 по сравнению с контролем. Снижение продукции ИФНу в ответ на КонА наблюдалось также и в культуре спленоцитов. В итоге, мыши несущие ген ИЛ-18СБа были полностью защищены от повреждающего действия каскада воспалительных факторов и поражения печени при введении КонА [66].
Так как регуляция активности ИЛ-18 связана с патогенезом некоторых воспалительных заболеваний, была исследована экспрессия гена ИЛ-18СБ в различных человеческих линиях клеток, таких как клеточная линия кератиноцитов НаСаТ, клеточная линии карциномы толстой кишки DLD-1 и первичная почечная мезангиальная клеточная линия. В нестимулированных клетках обнаружены минорные количества мРНК, кодирующей ИЛ-18СБ. Однако, во всех трех типах клеток экспрессия гена значительно увеличивается при стимуляции ИФНу. ИЛ-18 известен как один из центральных медиаторов продукции ИФНу. Представленные данные показывают, что активность ИЛ-18 регулируется петлей негативной обратной связи, опосредованной ИФНу-индуцированной продукцией ИЛ-18СБ [160]. Изучение иммуномодулирующей активности ИЛ-18СБа в культуре человеческой цельной крови показало, что ИЛ-18СБ (200нг/мл) значительно ингибирует ЛПС( 1 Онг/мл)/ИЛ-12(5нг/мл)-индуцированное
высвобождение ИФНу и матричной металлопротеиназы-9 [169].