Выявление антидиабетической активности вновь разработанных нейропротекторных препаратов

• Автор: Озерова, Ирина Витальевна
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 168 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Сахарный диабет

1.1.1. Распространенность сахарного диабета

1.1.2. Классификация сахарного диабета

1.1.3. Сахарный диабет 2 типа, характеристика, факторы развития

1.1.4. Осложнения сахарного диабета 2 типа

1.1.5. Лечение сахарного диабета

1.1.5.а. Основные группы антидиабетических препаратов

1.1.5. б. Новые направления антидиабетической терапии
1.2. Экспериментальные модели диабета
1.3. Вовлечённость некоторых общих механизмов в патогенез диабета и БА
1.4. Общность механизмов регуляции функций нейронов и
панкреатических ß-клеток
1.4.1. Инсулинорезистентность
1.4.2. Дефицит нейротрофических факторов (НГФ) при СД
1.4.3. Роль окислительного стресса в патогенезе СД
1.4.4. Роль провоспалительных цитокинов в патогенезе СД
1.5. Обоснование цели исследования
1.5.1. Дипептидные мнметики нейротрофинового фактора, ГК-2 и ГК-2 (Н)..
1.5.2. Афобазол и его метаболит М-
1.5.3. Ноопепт
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Препараты и вещества, используемые в экспериментах
2.2. Животные
2.3. Дизайн эксперимента
2.4. Определение фонового уровня глюкозы в крови и толерантности к глюкозной нагрузке
2.5. Взвешивание животных
2.6. Тест на болевую чувствительность tail-flick — метод «отдергивания хвоста»
2.7. Биохимические исследования (количественное определение HbAlc,
инсулина, ГПП-1, ДПП-4 и содержание МДА в плазме крови)
2.8. Морфометрическне исследования поджелудочной железы
2.9. Методы определения влияния ГК-2 на коагуляционные свойства крови
2.10. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ
3.1. Изучение отобранных нейроиротекторных веществ на модели
начальных фаз диабета
3.1.1. Оригинальный димерный дипептидный миметик ГК-
3.1.2. Афобазол и его метаболит М-
3.1.3. Ноопепт
3.2. Изучение отобранных нейропротекторных веществ на модели
развитого диабета
3.2.1. Оригинальные димерные дипептидные мимстики ГК-
3.2.1. а. Изучение антидиабетического эффекта
3.2.1.6. Влияние ГК-2 на динамику изменения показателей систем гемостаза и
фибринолиза у крыс
3.2.2. Ноопепт
3.3. Механизм действия Ноопепта
3.3.1. Влияние Ноопепта на содержание МДА в плазме крови крыс с СТЗ-диабетом.
3.3.2. Сравнение антигипергликемического эффекта Ноопепта в условиях перорального
и внутрибрюшинного введения
3.3.3. Сравнение антигипергликемических эффектов Ноопепта и Ситаглиптина
3.3.4. Биохимические и морфметрические исследования
3.3.4. а. Биохимические исследования
3.3.4.6. Морфометрические исследования
ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ИТОГИ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Сахарный диабет (СД) относится к числу основных причин смертности населения в большинстве стран мира, и каждые 10-15 лет количество больных диабетом удваивается (Дедов, И.И. Сахарный диабет: развитие технологий в диагностике, лечении и профилактике (пленарная лекция) // Сахарный диабет. 2010. № 3. С. 6-13). По данным Международной федерации диабета (IDF) в настоящее время более 382 миллионов человек в мире больны этим заболеванием, а к 2035 году их количество возрастёт до 592 млн. По числу больных диабетом Россия занимает 5-ое место в мире.
Самым распространенным видом СД (90-95% от общего числа случаев) является сахарный диабет второго типа (СД 2) — сложное гетерогенное расстройство,
характеризующееся сочетанием прогрессирующего снижения чувствительности к инсулину (инсулинорезистентность, ИР) и неадекватной компенсационной секреции инсулина (в начале болезни она не только не снижена, а часто и повышена), что является результатом дисфункции Р-клеток поджелудочной железы. СД прогрессирует, что способствует развитию осложнений, таких, как сердечно-сосудистые заболевания (Мкртумян, А.М. Уровень гликемии как фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний // Сахарный диабет. 2010. №3. С. 80-82; Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет и сердечно-сосудистые заболевания: состояние проблемы // Сахарный диабет. 2004. № 4. С. 2-6), нефропатия (Шестакова М.В., Шамхалова М.Ш. Диабетическая нефропатия: 'клиника, диагностика, лечение; Ред. академика И.И. Дедов. Москва, 2009. 28 с.), ретинопатия (Aiello, L.M. Perspectives on diabetic retinopathy // Am J Ophthalmol. 2003. V, 136, № 1. P. 122-135) и нейропатия (Мкртумян, А.Ф. Лечение сахарного диабета и его осложнений. РМЖ. 2002. Т. 10, №17. С. 773-7). Перечисленные осложнения регистрируются у 40—55% больных и являются причиной роста смертности от СД (Сунцов Ю.И., Болотская Л.Л., Маслова О.В., Казаков И.В. // Сахарный диабет. 2011. № 1. С. 15-18).
На сегодняшний день предупреждение и терапия СД 2 затруднено недостаточной эффективностью применяемых средств в отношении защиты секреторной функции р-клеток и наличием побочных эффектов: для производных сульфонилмочевины характерно развитие вторичной резистентности, для бигуанидов - гепатотоксичность и повышение риска развития кардиоваскулярной патологии. Применение ингибиторов дипептидил-пептидазы-IV (ДПП-4) повышает частоту развития панкреатита и рака поджелудочной железы (Шестакова Е.А., Галстян Г.Р. Ингибиторы ДПП-4: сравнительный анализ представителей группы // Проблемы

Стрептозотоцнн (СТЗ, 2-дезокси-2-(3-(метил-3-нитрозоацетилмочевина)-0-глюкопнранозы) синтезируется Streptomycetes achromogenes и используется для моделирования сахарного диабета, как первого, так и второго типа (Szkudelski, Т. The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin Action in В Cells of the Rat Pancreas // Physiol. Res. 2001. V. 50, №6. P. 536-546).
На сегодняшний день различные группы исследователей моделируют СД 2 на животных, либо внутрибрюшинной (в/б), либо внутривенной (в/в) инъекцией СТЗ (в дозах 35-65 мг/кг различным видам крыс и 100-200 мг/кг различным видам мышей) в дозах, в результате которых происходит лишь частичное разрушение панкреатических Р-клеток, а, следовательно, развивается относительный дефицит инсулина, увеличивается уровень глюкозы в крови и наблюдаются условия СД 2 (Jafarnejad, A., Bathaie, S.Z., Nakhjavani, М., Hassan, M.Z. Effect of spermine on lipid profile and HDL functionality in the streptozotocin-induced diabetic rat model // Life Sci. 2007. V. 82, № 5-6. P. 301-307; Farombi, E.O., Ige O.O. Hypolipidemic and antioxidative effects of ethanolic extract from dried calyx of Hibiscus sabdariffa in alloxan-induced diabetic rats // Fundam Clin Pharmacol. 2007. V. 21, № 6. P. 601-609; Fernandes, N.P., Lagishetty C.V., Panda V.S., Naik S.R. An experimental evaluation of the antidiabetic and antilipidemic properties of a standardized Momordica charantia fruit extract // BMC Complement Altem Med. 2007. V. 7. P. 29-36).
Действие стрептозотоцина в р-клетках сопровождается характерными изменениями концентраций в крови инсулина и глюкозы. Через два часа после инъекции наблюдается гипергликемия при одновременном падении уровня инсулина в крови, спустя некоторое время (около шести часов) в крови возникает гипогликемия вместе с высоким уровнем инсулина. Наконец, развивается гипергликемия, и снижается уровень инсулина в крови (West et al., 1996). СТЗ поглощается Р-клетками поджелудочной железы с помощью транспортера глюкозы GLUT2 (Szkudelski, Т. The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin Action in В Cells of the Rat Pancreas // Physiol. Res. 2001. V. 50, № 6. P. 536-546), при снижении экспрессии которого предотвращается диабетогенное действие СТЗ (Thulesen, J., Orskov С., Holst J.J., Poulsen S.S. Short-term insulin treatment prevents the diabetogenic action of streptozotocin in rats. // Endocrinology. 1997. V. 138, №1. P. 62-68).
СТЗ повреждает поджелудочные р-клетки посредством нескольких механизмов:
1. СТЗ является сильным алкилирующим агентом: с помощью "СНЗ или СНЗ+, образующихся при метаболизме СТЗ, происходит прямое алкилирование ДНК (Рис.1 [I]).