Механизмы гиполипидемического действия сесквитерпенового лактона леукомизина

• Автор: Роднова, Екатерина Александровна
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 98 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Общая характеристика работы

1 Обзор литературы: Современные подходы к лечению нарушений липидного обмена

1.1 Характеристика гиполипидемических средств

1.2 Перспективы использования терпеновых соединений в качестве

гиполипидемических средств

1.3 Характеристика терпеноидных соединений

2 Материалы и методы исследования

2.1 Характеристика объекта исследования

2.2 Экспериментальные животные, модели и методики исследования

2.3 Модель острой гиперлипидемии, индуцированной твин
2.4 Модель острой гиперлипидемии, индуцированной этанолом
2.5 Определение антиоксидантной и антирадикальной активности
леукомизина in vitro
2.6 Модель окислительного стресса в эксперименте in vivo
2.7 Оценка интенсивность липолиза in vivo и in vitro
2.8 Определение активности ГМГ-КоА редуктазы и экскреции
холестерола
2.9 Статистическая обработка данных
3 Результаты собственных исследований
3.1 Гиполипидемическое действие леукомизина на фоне острой
экспериментальной гиперлипидеми, индуцированной твин
3.2 Гиполипидемический эффект леукомизина при гиперлипидемии,
индуцированной этанолом
3.3 Антиоксидантное и антирадикальное действие леукомизина
3.3.1 Антирадикальная активность леукомизина в отношении
стабильного радикала 1,1-дифенил-2-пикрилгидразила (ДФПГ)„,
3.3.2 Антирадикальная активность леукомизина в отношении
супер оксидного анион-радикала
3.3.3 Антирадикальная активность леукомизина в отношении
гидроксильного радикала
3.4 Влияние леукомизина на перекисное окисление липидов и
глутатионзависимую систему антиперекисной защиты в печени при
индуцированном тетрахлорметаном окислительном стрессе
3.5 Влияние леукомизина на липолиз in vivo и in vitro

3.5.1 Влияние леукомизина на содержание СЖК в сыворотке крови

3.5.2 Влияние леукомизина на уровень СЖК в сыворотке крови при
стимуляции липолиза адреналином
3.5.3 Влияние леукомизина на липолиз в изолированных адипоцитах

3.6 Влияние леукомизина на активность ГМГ-КоА-редуктазы в печени

3.7 Влияние леукомизина на экскрецию холестерола через
желудочно-кишечный тракт
4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
5 ВЫВОДЫ
6 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СОКРАЩЕНИЯ, ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ В РАБОТЕ
GPx - глутатионпероксидаза
GR - глутатионредуктаза
GSH - восстановленныйглутатион
GSSG - окисленный глутатион
АЛТ - аланинаминотрансфераза
АПЗ - антиперекисная защита
ACT - аспартатаминотрансфераза
ГМГ-КоА - З-гидрокси-З-метилглутарил коэнзим А
ДМАПФ - диметилаллилпирофосфат
ДТНБ - 5,5-дитиобис-2-нитробензойная кислота
ДФПГ -1,1 -дифенил-2-пикрилгидразил
ИППФ — изопентенилпирофосфат
ЛПВП - липопротеины высокой плотности
ЛПНП - липопротеины низкой плотности
ЛПОНП — липопротеины очень низкой плотности
МДА - малоновый диальдегид
МНН - международное непатентованное наименование
НСТ — нитросиний тетразолий
ПОЛ - перекисное окисление липидов
СЖК — свободные жирные кислоты
СОД - супероксиддисмутаза
ТАГ - триацилглицерол
ТБК - тиобарбитуровая кислота
ТХМ - тетрахлорметан
ФЛ - фосфолипиды

2.4 Модель острой гиперлипидемии, индуцированной этанолом
Гиперлипидемию индуцировали однократным введением крысам этанола, который стимулирует выработку адреналина надпочечниками, что приводит к резкой активации липолиза, повышению уровня СЖК в крови, увеличению синтеза ТАГ в печени и увеличению секреции гепатоцитами ЛПОНП, что приводит к гиперлипидемии [24, 80].
Животные были разделены на четыре экспериментальные группы (табл. 2). В качестве препарата сравнения (положительного контроля) использовали никотиновую кислоту (ЛСР-000778/08, Sishuin Xeirkang Pharmaceutical Co.Ltd, КНР, серия 101201).
За 8 часов до введения этанола, животных лишали пищи при свободном доступе к воде. Через 10 часов после введения этилового спирта животных умерщвляли С02-асфиксией с использованием стандартной камеры.
В сыворотке крови крыс определяли содержание СЖК ферментативным методом с использованием наборов «NEFA» («Randox», Великобритания). Также определяли также содержание ТАГ и общего холестерола в сыворотке крови и печени экспериментальных животных.
Концентрацию ТАГ и холестерола в печени оценивали после экстракции липидной фракции смесью хлороформ-метанол по методу J. Folch (1957) (2:1) [69]. Определение липидных фракций в экстракте проводили ферментативными методами с помощью наборов фирмы «Chronolab» (Испания). Перед проведением анализа к хлороформной фазе добавляли 20 % раствор детергента Thesit® («Sigma Aldrich»). Хлороформ удаляли потоком азота и эмульгированные липиды растворяли в воде очищенной [133]. К полученной водной эмульсии добавляли рабочие реагенты соответствующих наборов. Содержание ТАГ и холестерола выражали в мг на г печени.
Известно, что в механизме токсического действие алкоголя важная роль принадлежит активации свободно-радикального окисления липидов