Изучение роли серотонинергического компонента в механизме действия противопаркинсонического препарата гимантана

• Автор: Зимин, Иван Алексеевич
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 122 с. : 10 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список используемых сокращений

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. ОБЩИЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ПАРКИНСОНИЗМЕ

2.1.1 Двигательные нарушения

2.1.1.1 Вовлечённость серотонинергичсской системы в моторные симптомы и

дискинезию, ассоциированную с приёмом левадопа-содержащих препаратов

2Л.2. Психические нарушения

2.1.2.1. Вовлечённость серотонинергической системы в развитие депрессии

и тревожности

2.1.2.2. Вовлечённость серотонинергической системы в развитие психозов
2.1.3. Когнитивные расстройства
2.1.3.1. Вовлечённость серотонинергической системы в формирование когнитивных нарушений
2.1.3.2. Вовлечённость серотонинергической системы в гастроинтестинальную функцию организма
2.2. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ЭТИОЛОГИИ И ПАТОГЕНЕЗЕ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА
2.2.1. Этиологические факторы болезни Паркинсона
2.2.2. Основные патогенетические звенья болезни Паркинсона
2.2.2.1. Нарушение баланса «дофамин - серотонин» и патогенез паркинсонизма
2.2.3. Экспериментальные модели паркинсонического синдрома
2.3. СЕРОТОНИНЕРГИЧЕСКАЯ СИСТЕМА МОЗГА
2.4. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ НЕЙРОХИМИЯ СЕРОТОНИНЕРГИЧЕСКОГО СИНАПСА
2.4.1. Синтез серотонина и его регуляция
2.4.2. Высвобождение серотонина
2.4.3. Структурно-функциональная характеристика нейрональных серотониновых рецепторов (5-НТ-Р)
2.4.3.1. 5-НТ-Р 1-ого типа
2.4.3.2. 5-НТ-Р 2-ого типа
2.4.3.3. 5-НТ-Р 3-ого типа
2.4.3.4. 5-НТ-Р 4-ого типа
2.4.3.5. 5-НТ-Р 5-ого типа

2.4.3.6. 5-НТ-Р 6-ого типа
2.4.3.7. 5-НТ-Р 7-ого типа
2.4.3.8. 5-НТ-Р, регулирующие высвобождение других нейромедиаторов
2.4.4. Система обратного захвата серотонина и её роль в регуляции серотонинергической
трансмиссии. Серотониновый транспортёр (SERT)
2.4.4.1 Локализация и распределение SERT в центральной нервной системе
2.4.4.2. Молекулярная структура белка SERT
2.4.4.3. Регуляция SERT
2.4.4.4. Фармакология SERT
2.4.5. Катаболизм индоламинов
2.5. ФАРМАКОТЕРАПИЯ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА
2.5.1. Нейропротекция
2.5.2. Симптоматическая терапия
2.5.3. Производные адамантана
2.5.3.1. Фармакологические свойства нового противопаркинсонического препарата гимантан
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Материалы
3.1.1. Животные
3.1.2. Вещества
3.2. Методы
3.2.1. Радиолигандное связывание in vitro и ex vivo
3.2.2. Спналтосомальный захват [3Н]-ДА и [3Н]-СТ
3.2.3. Методика Вестерн-блота
3.2.4. Экспериментальные модели паркннсонического синдрома
3.2.4.1. МРТР модель паркннсонического синдрома
3.2.4.2. МРР+ модель паркннсонического синдрома
3.2.5. Статистическая обработка результатов
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Сравнительное изучение влияния адамантанов на основные группы рецепторов, вовлечённых в этиопатогенез болезни Паркинсона
4.1.1. Сравнительное изучение влияния гимантана и других производных адамантана на гиппокампальные глутаматные рецепторы NMDA-подтипа, Оз-подтип дофаминовых рецепторов в стриатуме, гиппокампальные 5-НТ. д-подтип серотониновых рецепторов
и 5-НТ2А-ПОДТИП серотониновых рецепторов фронтальной коры крыс in vitro
4.1.1.1. NMD A-подтип глутаматных рецепторов
4.1.1.2. Оз-подтип дофаминовых рецепторов
4.1.1.3. 5-НТід-подтип серотониновых рецепторов
4.1.1.4. 5-НТ2А-ПОДТИП серотониновых рецепторов
4.1.2. Изучение влияния субхронического введения гимантана на характеристики связывания селективных лигандов с рецепторами компетентных структур мозга крыс в норме и при МРР+-индуцированной патологии ex vivo
4.1.2.1. Di-подтип дофаминовых рецепторов
4.1.2.1. 5-HTia- h 5-НТгА-подтипы серотониновых рецепторов
4.2. Сравнительное изучение влияния адамантанов на обратный захват серотонина и дофамина
4.2.1. Сравнительное изучение влияния гимантана и других производных адамантана на синаптосомальный захват [3Н]-ДА в стриатуме и [3Н]-СТ фронтальной коры крыс
in vitro
4.2.2. Изучение влияния гимантана на синаптосомальный захват [3Н]-СТ фронтальной
коры крыс ex vivo
4.3. Изучение эффектов адамантанов на уровень белка серотонинового и дофаминового транспортёров, SERT и DAT, в компетентных структурах мозга мышей линии С57В1/6 и культуре клеток
4.3.1. Изучение эффектов гимантана и амантадина на уровень белка SERT в культуре клеток НТ-22 (in vitro)
4.3.2. Изучение влияние острого введения гимантана на содержание белка SERT в структурах мозга мышей линии С57В1/6 в норме и МРТР-индуцированной модели патологии (ex vivo)
4.3.3. Изучение эффектов острого и субхронического введения гимантана и амантадина на уровень белка DAT в гомогенатах стриатума и фронтальной коры мозга мышей линии С57В1/6 в норме и при МРТР-индуцированной модели патологии (ex vivo)
4.3.4. Изучение влияния острого и субхронического введения гимантана на синаптосомальный захват [3Н]-ДА в стриатуме мышей линии С57В1/6 ex vivo
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

5-HTiE-Р и 5-HTif-P
5-НТш-Р являются ауторецепторами и обнаружены в различных отделах мозга (коре переднего мозга, хвостатом ядре и скорлупе стриатума, миндалевидном ядре), 5-HTif-P выявлены как в ЦНС, так и в периферических тканях (Bouchelet, 1996). Предполагается, что через эти рецепторы реализуются терапевтические эффекты триптофанов, высоко эффективных препаратов для лечения мигрени. Это может указывать на участие 5-HTie/if-Р в патогенетических механизмах развития мигрени, а также на то, что их функциональное состояние напрямую связано с возникновением приступов головной боли, являющихся следствием спазма сосудов с последующим их расширением и резкой пульсацией (Lanfumey, 2004). 5-HTie/if-P сопряжены с Gj/o-белками и, следовательно, могут регулировать те же сигнальные каскады, что и другие 5-НТ-Р 1-ого типа, но молекулярные механизмы функционирования 5-HTie/if-P остаются не изученными.
5-НТ-Рецепторы 2-ого т ипа
5-НТ2Л-Р
6-НТгл-Р располагаются, в основном, в коре переднего мозга, стриатуме и гиппокампе головного мозга на теле дендритах пирамидальных клетках и на теле ГАМК-ергических нейронов, а также локализуются на окончаниях глутамат- и аминергических нейронов (Miner, 2003, Leysen, 2004). Данный тип рецепторов вовлечён в процессы обучения, а также в лечение шизофрении с атипичными антипсихотическими состояниями (Шпаков, 2009). 5-НТгл-Р, как и другие 5-НТ-Р 2-ого типа, сопряжен с Gq/ц-белками, через посредство которых в нервных клетках активированный лигандом рецептор стимулирует фосфолипазы С и А2 и каскад МАГ1К (Raymond, 2001). В скелетных и гладких мышцах связывание агонистов с б-НТгд-Р вызывает активацию и других эффекторных белков -фосфолипазы D и компонентов JAK/STAT-сигнального каскада (Guillet-Deniau, 1997, Banes, 2005).
5-НТ2в-Р
Функции 5-НТ2В-Р в нервной системе изучены недостаточно, а сами рецепторы лишь в незначительных количествах выявлены в мозжечке, дорсальном гипоталамусе и миндалевидном ядре. В отличие от нервной ткани, в сердце и лёгких содержание 5-НТгв-Р намного выше, что указывает на важную роль 5-НТгв-Р в регуляции клеточных процессов в периферических тканях. б-НТов-Р через посредство сопряжённых с ним Gq/ц-белков стимулирует накопление Cazt в астроцитах (Sanden, 2000) и, как полагают, активирует фосфолипазу С, хотя для нервной ткани это не доказано. В периферических тканях 5-НТгв-Р активирует фосфатидилинозитол-3-киназу, ERKl/2-сигнальные каскады, а также