Оценка эффективности, безопасности и разработка параметров стандартизации нового лекарственного препарата на основе шалфея и эхинацеи

• Автор: Гусева, Светлана Игоревна
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 160 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
; Кол-во
: ВВЕДЕНИЕ

| ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика и применение сырья шалфея

лекарственного и эхинацеи узколистной

1.2. Химический состав шалфея лекарственного и эхинацеи узколистной

1.3. Экспериментальное и клиническое изучение шалфея

лекарственного и эхинацеи узколистной

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материал
2.2. Методы исследования
2.2.1. Методы химического анализа
2.2.2. Методы фармакологического анализа
2.2.2.1. Изучение токсичности
2.2.2.2. Исследование иммуномодулирующего действия препарата
2.2.2.3. Исследование противовоспалительной активности препарата на модели острого лимфаденита у крыс
2.2.2.4. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА ПАРАМЕТРОВ СТАНДАРТИЗАЦИИ ПРЕПАРАТА «ШАЛФЕЙ ИММУНАКТИВ»
3.1. Краткая фитохимическая характеристика растительных экстрактов, входящих в состав препарата
3.2. Разработка проекта НД на препарат «Шалфей Иммунактив».
3.3. Валидация методики определения содержания фенольных
соединений
ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА 68 «ШАЛФЕЙ ИММУНАКТИВ»
4.1.1. Исследование острой токсичности препарата «Шалфей

Иммунактив»
4.1.2. Исследование диапазона доз препарата «Шалфей Иммунактив», не оказывающих биологического влияния на организм
методом DRF (dose range finding)
ГЛАВА 5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА «ШАЛФЕЙ ИММУНАКТИВ»
5.1. Оценка иммуномодулирующего действия
5.1.1. Влияние препарата «Шалфей Иммунактив» на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов
5.1.2. Определение титра антител у мышей, иммунизированных эритроцитами барана
5.1.3. Реакция гиперчувствительности «замедленного» типа
5.1.4. Влияние препарата «Шалфей Иммунактив» на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов
5.1.5. Влияние препарата на функциональную активность Т-хелперов
5.1.6. Обобщение результатов исследования иммуномодулирующего действия препарата
5.2. Изучение противовоспалительной активности препарата «Шалфей Иммунактив» на модели острого лимфаденита у крыс
5.2.1. Влияние препаратов на содержание белков крови
5.2.2. Результаты оценки провоспалительных цитокинов
5.2.3. Влияние препаратов на уровень С-реактивного белка
5.2.4. Оценка противоотечного эффекта препаратов
5.2.5. Оценка динамики изменения лейкоцитов крови
5.2.6. Оценка выраженности антиоксидантного действия препаратов
5.2.7. Патоморфологическое исследование лимфатических узлов

5.2.7. Обобщение результатов исследования специфической
противовоспалительной активности препаратов
ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ 1 ПРИЛОЖЕНИЕ 2 ПРИЛОЖЕНИЕ

2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.2.1. Методы химического анализа
Влажность, золу общую и содержание дубильных веществ определяли в соответствии с требованиями ГФ XI (Государственная..., 1987).
Определение титруемой кислотности выполнено методом потенциометрического титрования по ГОСТ 25555.0-82 «Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения титруемой кислотности» (Сборник ..., 2002). Расчет выполнен по кофейной кислоте, как одной из основных кислот, входящих в состав экстрактов.
Содержание полифенольных соединений в пересчете на галловую кислоту определяли спектрофотометрическим методом по реакции с реактивом Фолина-Чокальтеу (Fluka, Germany) в соответствии с рекомендациями (Руководство ..., 2004).
Содержание углеводов (в пересчете на глюкозу) до и после гидролиза определяли спектрофотометрическим методом с о-толуидиновым реактивом (ОТР) (Оболенская и др., 1991). Для определения содержания моносахаридов до гидролиза использовали водные растворы экстрактов. Гидролиз проб проводили серной кислотой: к 20 мл испытуемого раствора с концентрацией около 2 мг/мл добавляли 1 мл концентрированной серной кислоты и кипятили смесь с обратным холодильником на электрической плитке в течение 2 часов. Выпавший осадок (фенольные соединения) отфильтровывали через бумажный фильтр (синяя лента). 1 мл фильтрата нейтрализовали 20% раствором Na2C03 до рН=7 (по универсальному индикатору).
В пробирку вместимостью 10 мл вносили 0,5 мл исследуемого раствора, добавляли пипеткой 4 мл ОТР и перемешивали содержимое. Параллельно в другой пробирке готовили раствор сравнения (0,5 мл дистиллированной воды и 4 мл ОТР). Пробирки нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 минут, затем раствор охлаждали до комнатной