Влияние мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, выделенных из плаценты, на регенерацию быстрообновяющихся тканей зрелых и старых лабораторных животных при воздействии экстремальных факторов

• Автор: Маклакова, Ирина Юрьевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Екатеринбург
• Количество страниц: 155 с. : 28 ил.

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ
АИ - апоптотический индекс
БТШ - белки теплового шока
Гр.д.- гранулоцитарный дифферон
ГЭС - гранулоцитарно-эритроидное соотношение
ИИ - ионизирующее излучение
КМ - костный мозг
МИ - митотический индекс
ММСК — мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки
МЯТ - микроядерный тест
СКК - средняя клеточность крипты
СУМ - спонтанный уровень клеток с микроядрами
Эр.д. - эритроидный дифферон

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Современные представления о механизмах регенерации тканей
1.1.1. Основные теории старения
1.2. Экстремальные состояния и проблема регенерации тканей
1.3. Использование стволовых клеток для оптимизации процессов регенерации в условиях старения и воздействия экстремального повреждения
1.3.1. Проблема использования стволовых клеток в эксперименте и клинике
1.3.2. Использование стволовых клеток в условиях старения и воздействия экстремальных факторов
Заключение
ГЛАВА 2. МЕТОДИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Общая характеристика лабораторных животных, использованных в исследованиях
2.2. Получение культуры мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток
2.2.1. Планирование экспериментальной беременности лабораторных животных
2.2.2. Выделение культуры ММСК
2.2.3. Условия культивирования ММСК
2.2.4. Подсчет клеток
2.2.5. Определение жизнеспособности клеток
2.2.6. Субкультивирование ММСК
2.2.7. Направленные дифференцировки ММСК

2.2.8. Окраска культуры ММСК с помощью набора первичных и вторичных
антител Mesenchymal Stem Cell Characterization Kit (Rat)
2.3. Дозы и способы введения
2.4. Облучение лабораторных животных на гамма-терапевтической установке
2.5. Методы исследования кроветворной ткани
2.6. Методы оценки регенераторных процессов в слизистой оболочке тощей кишки
2.7. Методы статистической обработки полученных результатов
ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ПЛАЦЕНТЫ, НА СОСТОЯНИЕ МИЕЛОИДНОЙ ТКАНИ И ЭПИТЕЛИЯ ТОЩЕЙ КИШКИ ЗРЕЛЫХ И СТАРЫХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ В ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ
3.1. Состояние миелоидной ткани и периферической крови зрелых и старых лабораторных животных на 1 сутки после введения ММСК в физиологических
условиях
3.2. Состояние слизистой оболочки тощей кишки зрелых и старых лабораторных животных на 1 сутки после введения ММСК в физиологических условиях
3.3. Состояние миелоидной ткани и периферической крови зрелых и старых лабораторных животных на 7 сутки после введения ММСК в физиологических условиях
3.4. Состояние слизистой оболочки тощей кишки зрелых и старых лабораторных животных на 7 сутки после введения ММСК в
физиологических условиях
Заключение

Россия; Институт биологии гена РАН, Москва, 2007)). При этом клетки переживают в мозге реципиентов в течение всего срока наблюдения.
Стволовые клетки используются в лечении энцефалопатии. При этом введенные внутривенно стволовые клетки, синтезируют вещества, активирующие процессы регенерации, в результате чего прорастают новые кровеносные сосуды и восстанавливаются нервные клетки, что влечет за собой восстановление функций головного мозга, а это, в свою очередь, устраняет неврологические симптомы болезни [157, 192].
Трансплантации стволовых клеток использованы для лечения патологии центральной нервной системы, обусловленной гипоксией (Александрова М.А., Ревищин A.B., Подгорный О.В. и др. 2003 г.). Стволовые клетки из головного мозга 9,5-недельного плода человека до пересадки длительно культивировали в среде со специальным набором факторов роста. Изучали мозг крыс-реципиентов через 27 сут после трансплантации. В этих исследованиях впервые удалось показать успешное приживление культивированных нейральных стволовых клеток мозга человека в мозге крыс. Пересаженные клетки не вызывали иммунного ответа в течение 27 дней, сохраняли многофункциональность. Клетки трансплантата проявили способность к миграции в области дегенерации нейронов мозга крыс-реципиентов. Результаты этой работы свидетельствуют о возможности использования трансплантации стволовых клеток при заболеваниях мозга человека, вызванных гипоксией-ишемией. Лечение стволовыми клетками позволяет достигнуть значительного продления и повышения качества жизни пациентов после химио- и лучевой терапии с заболеваниями злокачественного характера и тяжелыми аутоиммунными поражениями. Еще за 30 лет до того как началось применение стволовых клеток проводили трансплантацию костного мозга после облучения и высоких доз химиотерапии. Реабилитация после химио- и лучевой терапии стволовыми клетками направлена на стимуляцию роста и дифференцировку кроветворных клеток-предшественников по пути нормализации функций