Влияние низкоинтенсивного лазерного излуения на структурообразовательные свойства и биологические эффекты бактериального липополисахарида

• Автор: Агаджанова, Каринэ Вячеславовна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 180 с. : 30 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Введение
Глава 1. Современные представления о структуре бактериальных липополисахаридов и особенностях их взаимодействия с чувствительными клетками (Обзор литературы)
1.1. Современные представления о химической структуре и молекулярной организации бактериальных липополисахаридов
1.2. Молекулярно-клеточные механизмы реализации биологических эффектов бактериальных липополисахаридов
Глава 2. Материал и методы исследования
2.1. Общая характеристика использованного биоматериала
2.2. Способы лазерного облучения бактериального липополисахарида
2.3. Изучение спонтанного структурообразования бактериального липополисахарида в модельных системах
2.4. Качественное описание и количественная обработка картин фаций, получаемых при клиновидной дегидратации суспензии бактериального липополисахарида в различных средах
2.5. Изучение адгезивно-агрегационных свойств тромбоцитов (СРА-анализ)
2.6. Исследование влияния бактериального липополисахарида
на микроциркуляцию
2.7. Методы статистической обработки результатов
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Влияние лазерного излучения красной области спехстра с различным типом поляризации на структурообразование бактериального липополисахарида в водной суспензии

3.2. Влияние лазерного излучения фиолетовой области спектра с различным типом поляризации на структурообразование бактериального липополисахарида в водной суспензии
3.3. Характеристика спонтанного структурообразования бактериального липополисахарида в физиологическом растворе натрия хлорида
3.4. Влияние лазерного излучения красной области спектра с различным типом поляризации на структурообразование бактериального липополисахарида в физиологическом растворе
3.5. Влияние лазерного излучения фиолетовой области спектра с различным типом поляризации на структурообразование бактериального липополисахарида в физиологическом растворе
3.6. Влияние характера поляризации лазерного излучения на адгезию и агрегацию тромбоцитов на полистирене
3.7. Влияние излучения красного и фиолетового лазеров с различным типом поляризации на индуцированные ЛПС изменения функции тромбоцитов
3.8. Сравнительный анализ изменений микроциркуляции, вызываемых нативным и облучённым красным лазером бактериальным липополисахаридом
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Литература

ВВЕДЕНИЕ Актуальность проблемы
Инфекционные заболевания на сегодняшний день остаются серьёзной проблемой здравоохранения во всех странах мира. По данным ВОЗ (WHO, 2004), ежегодно в мире от инфекционных болезней погибает около 15 млн. человек. Наиболее высокая смертность отмечается при бактериальном сепсисе. В США ежегодное количество больных с сепсисом достигает 750 ООО, в Европе - 500 000 человек [Macdonald J. et al., 2003; Ма A.C., 2008]. Сепсис является главной причиной смерти пациентов в отделениях интенсивной терапии, что в абсолютных значениях составляет порядка 215 000 случаев в год [Angus D.C. et al., 2001].
Наиболее частыми возбудителями сепсиса являются грамотрицательные микроорганизмы, содержащие в своей мембране липополисахаридный токсический комплекс (эндотоксин) [Николаев А. Ю., Милованов Ю. С., 1999]. Самой тяжелой формой бактериального эндотоксикоза является бактериально-токсический (септический, эндотоксиновый) шок (БТШ) [Llewelyn М.,Cohen J., 2001]. Летальность при БТШ превышает таковую при всех других видах шока и составляет, по данным разных авторов, от 50 до 82% [Salvo I. et al., 1995; Bernard G.R. et al., 2001]. Ежегодно от септического шока в США погибает около 175 000 человек [Stone R., 1994; Ulevitch R.J., Tobias P.S., 1995].
Летальность при БТШ остается высокой, несмотря на широкое применение современного арсенала лекарственных средств, включающего антибиотики, сульфаниламидные препараты, нитрофураны и другие препараты [Lynn W.A., 1998; Jaeschke R., Angus D.C., 2009]. Недостаточная эффективность
антимикробных средств в значительной мере обусловлена тем, что все они являются элементами этиогропного лечения, направленного на уничтожение возбудителя, хотя известно, что при разрушении грамотрицательных микробов из их наружной мембраны освобождается липополисахарид (ЛПС, эндотоксин), являющийся главным фактором, определяющим развитие эндотоксинового

структуры для запуска того или иного пути сигнального каскада. Многокомпонентные рецепторные комплексы, состоящие из ассоциированных JinC:CD14:TLR4/MD-2 и содержащие также белки теплового шока (HSP) и цитокины, могут изменять тип внутриклеточного механизма передачи сигнала в ответ на эндотоксин [Triantafilou М., Triantafilou K., 2002].
Итак, комплекс мономер ЛПС:ЬВР связывается либо с mCD14, активируя CD 14-позитивные клетки, либо с sCD14, вызывая стимуляцию CD 14-негативных клеток, причём в последнем случае возможна как активация клеток-эффекторов, так и выведение ЛПС путём его связывания с ЛПВП. При этом для передачи сигнала требуется перенос мономера эндотоксина от комплекса JinC:LBP:mCD14 или JITJC:sCD14 к акцепторному белку MD-2 [Jiang Q. et al., 2000]. Кроме этого, значение CD14 для эндотоксин-индуцированной активации TLR4 может определяться вовлечением в этот процесс селективных адапторных белковых молекул [Fitzgerald К.А. et al., 2004; Beutler В. et al., 2006], что, вероятно, связано с С-терминальным фрагментом CD 14 и передачей сигнала по Му088-зависимому или независимому пути [Kim J.I. et al., 2005; Gioannini T.L. et al., 2007].
MD-2 (Ly 96 или ESOP-1) - молекула, непосредственно соединяющаяся с эктодоменом TLR4, представляет собой сигнальный протеин, необходимый для реализации сигнального каскада [Shimazu R. et al., 1999]. При этом MD-2 могут быть свободными, то есть находиться в растворённой форме в плазме, а после образования комплекса с ЛПС связываться с TLR4, или ассоциированными с TLR4 [Gioannini T.L. et al., 2004; Prohinar P. et al., 2007]. Получены данные, подтверждающие факт физиологической несостоятельности TLR4 в отсутствие MD-2. Иными словами, TLR4-cnrHajraHr зависит от наличия MD-2. Было установлено, что образцы плазмы пациентов с сепсисом содержат растворённые MD-2, этим объясняются гиперергические ответные реакции организма на ЛПС и развитие системного воспалительного ответа [Pugin J. et al., 2004]. Зрелый белок MD-2 состоит из 143 аминокислотных остатков и может быть отнесён к ML-суперсемейству липид-связывающих белков