Молекулярно-клеточные механизмы патогенеза болезни двигательного нейрона: роль гамма-синуклеина

• Автор: Нинкина, Наталья Николаевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 265 с. : 50 ил.

Оглавление

Список сокращений

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

Цель работы и основные задачи исследования

Научная новизна

Теоретическая и практическая значимость

Положения, выносимые на защиту

Апробация работы

Объем и структура диссертации

Введение
1 Обзор литературы
1.1 Протеинопатии
1.1.2 Физико-химические свойства амилоидных включений
1.1.3 Современная концепция классификации протеинопатий
1.1.4 Системы контролируемой деградации белков в развитии и прогрессии протеинопатий
1.1.5 Синуклеины и синуклеинопатии
1.2 Новые аспекты патогенеза бокового амиотрофического склероза

1.2.1 Генетические локусы и гены, ассоциированные с наследственными формами БДН
1.3 Моделирование синуклеинопатии in vivo
1.3.1 Линии трансгенных мышей с пан-нейрональной экспрессией гена а-синуклеина
1.3.2 Линии трансгенных мышей, экспрессирующих ген а-синуклеина
в определенных типах нейронных или глиальных клеток
1.3.3 Моделирование синуклеинопатий в беспозвоночных животных
1.3.4 Защитная функция а-синуклеина в развитии нейродегенеративных изменений при синуклеинопатиях
1.4 Использование трансгенных животных для разработки новых подходов в лечении синуклеинопатий
1.5 Семейство синуклеинов
1.5.1 Функции синуклеинов в дофаминовой нейротрансмиссии
1.5.2 Регуляция активности ключевого фермента синтеза дофамина тирозингидроксилазы
1.5.3 Регуляция белков-транспортёров моноаминов
1.5.4 Регуляция рециркуляции синаптических везикул
2 Материалы и методы
2.1 Материалы
2.1.1 Клинический аутопсийный материал
2.1.2 Экспериментальные животные
2.2 Методы

2.2.1 Хирургические манипуляции на мышах
2.2.2 Манипуляции с ранними эмбрионами мыши
2.2.3 Техника микроинъекций
2.2.4 Поведенческие тесты
2.2.5 Оценка тактильной чувствительности
2.2.6 Введение препаратов
2.2.7 Молекулярно-биологические и биохимические методы
2.2.8 Анализ белка
2.2.9 Генетические конструкции и клонирование
2.2.10 In situ гибридизация
2.2.11 Гистологические и иммуногистохимические методы
2.2.12 Электронная микроскопия
2.2.13 Методы культур клеток
3 Результаты исследования и их обсуждение
3.1 Идентификация у-синуклеина, анализ структуры, экспрессии и распределения белка в нервной системе
3.2 Моделирование болезни двигательного нейрона в трансгенных мышах
3.2.1 Создание линии генетически модифицированных мышей, воспроизводящих основные этапы протеинопатии
3.2.2 Прогрессия у-синуклеинопатии
3.2.3 Анализ экспрессии трансгена на уровне мРНК

нормальная структура и выполняемые в клетке функции (ДНК/РНК -связывающие белки, регулирующие процессинг, сплайсинг и транспорт РНК) существенно отличаются от всех ранее описанных белков и пептидов, способных к патогенной агрегации в нервной системе.
Следует ожидать, что список потенциально амилоидогенных белков, вовлеченных в патогенез НДЗ, будет в ближайшее время пополняться. Выявление всех возможных компонентов патогенной агрегации и изучение их структуры, свойств, а также структуры олигомеров, протофибрилл, их взаимосвязи со зрелыми фибриллами является необходимым звеном в стратегии разработки методов воздействия на процессы формирования и стабильности патогенных белковых агрегатов при создании новых терапевтических средств лечения протеинопатий.
1.1.3 Современная концепция классификации протеинопатий
В клинической практике диагностики НДЗ до сих пор используется термин “возрастная деменция”, часто без определения типа нейродегенеративного процесса, лежащего в основе заболевания. Традиционно при диагностике и характеристике НДЗ основополагающим является фактор анатомической локализации патологического процесса, поскольку набор клинических симптомов во многом определяется именно тем, в каких структурах нервной системы наблюдаются наиболее выраженные патологические изменения. Второй важный критерий классификации НДЗ - это данные патогистологического анализа, которые позволяют идентифицировать морфологический тип амилоидных включений, характерных для определенных форм протеинопатий. Более того, современными методами молекулярной медицины возможно во многих случаях определить конкретный тип биохимической патологии и провести дифференциальную диагностику протеинопатий, и современная концепция классификации НДЗ предлагает учитывать при определении формы заболевания непосредственный тип молекулярной патологии.