Роль апоптоза кардиомиоцитов в патогенезе ремоделирования миокарда при ишемической болезни сердца

• Автор: Хлапов, Андрей Павлович
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 106 с. : 3 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Современный взгляд на проблему

ремоделирования миокарда

1Л.1. Общие представления о ремоделировании миокарда

1Л .2. Клеточные и молекулярные механизмы

ремоделирования миокарда

1.2. Постинфарктное ремоделирование миокарда

1.2.1. Раннее постинфарктное ремоделирование миокарда

1.2.2. Позднее постинфарктное ремоделирование миокарда
1.3. Апоптоз кардиомиоцитов - ключевой механизм
ремоделирования миокарда
1.3.1. Морфологические характеристики апоптоза кардиомиоцитов..
1.3.2. Молекулярные механизмы реализации и регуляции
апоптоза кардиомиоцитов при ишемии
1.3.3. Апоптоз кардиомиоцитов при ишемическом
повреждении миокарда
1.4. Особенности лимфоцитарного гомеостаза при
ишемическом ремоделировании миокарда
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика клинического материала
2.2. Методы исследования
2.2.1. Оценка структурных особенностей и апоптоза кардиомиоцитов
2.2.1.1. Морфологические методы исследования миокарда
2.2.1.2. Окраска срезов миокарда гематоксилином-эозином
2.2.1.3. Окраска срезов миокарда пикрофуксином
по способу Ван-Гизон
2.2.1.4. Выявление Вс1-2+- и Вах+-кардиомиоцитов
с использованием иммуногистохимического исследования
2.2.1.5. Детекция апоптоза кардиомиоцитов
с использованием метода ТЛЖЕЬ
2.2.2. Оценка гематологических показателей и детекция
апоптоза мононуклеарных лейкоцитов крови
2.2.2.1. Определение общего количества
лейкоцитов периферической крови
2.2.2.2. Приготовление мазков из лейкоконцентрата
(метод с трилоном Б)
2.2.2.3. Подсчет отдельных форм лейкоцитов
2.2.2.4. Выделение мононуклеарных лейкоцитов крови
2.2.2.5. Проведение аннексинового теста с применением проточной лазерной цитофлуориметрии
2.2.3. Статистический анализ результатов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Особенности морфо-функциональных свойств миокарда
у больных ишемической болезнью сердца
3.2. Особенности программированной гибели
кардиомиоцитов при ишемическом ремоделировании миокарда
3.2.1. Выраженность апоптоза кардиомиоцитов
при ишемическом ремоделировании миокарда
3.2.2. Экспрессия ключевых белков-регуляторов
апоптоза кардиомиоцитами при ишемической болезни сердца
3.3. Особенности программированной гибели мононуклеарных лейкоцитов крови при ишемическом ремоделировании миокарда
3.3.1. Результаты оценки количества лейкоцитов и их субпопуляций у пациентов при ишемическом ремоделировании миокарда
3.3.2. Особенности апоптоза мононуклеарных лейкоцитов
крови при ишемическом ремоделировании миокарда
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АТФ - аденозинтрифосфат
ИБС - ишемическая болезнь сердца
ИКДР - индекс конечно-диастолического размера левого желудочка, см/м2 (конечно-диастолический размер левого желудочка/поверхность тела)
ИММ — индекс массы миокарда, г/ м2 (масса миокарда/поверхность тела)
КДО - конечно-диастолический объем, мл КДР - конечно-диастолический размер, см
КИ - коронарный индекс (отражает степень коронарной окклюзии и значимость окклюзированной коронарной артерии в кровоснабжении миокарда)
КСО - конечно-систолический объем, мл ЛЖ - левый желудочек
ОТС - относительная толщина стенки миокарда левого желудочка ((толщина задней стенки левого желудочка + толщина межпредсердной перегородки)/КДР)
СИ - склеротический индекс (отражает интенсивность склероза миокарда)
УД - ударный объем левого желудочка, мл (КДО-КСО)
ФВ - фракция выброса левого желудочка (УД/КДО)
ФК - функциональный класс стенокардии напряжения (по классификации Канадского сердечно-сосудистого общества)
ХСН - хроническая сердечная недостаточность
Вах - проапоптотический белок, относящийся к семейству белков-регуляторов апоитоза Вс
Вс1-2 - антиапоптотический белок, относящийся к семейству белков-регуляторов апоптоза Вс
Fas (CD95) — мембранный проапоптотический рецептор
Fas-L — лиганд к мембранному проапопто гическому рецептору Fas (CD95)
NF-кВ -ядерный транскрипционный фактор-кВ
РТР-поры - канал митохондриальной проницаемости (комплекс, сформированный в участке контакта между внутренней и наружной митохондриальными мембранами)
TNF-a - фактор некроза опухоли-а

Не исключается также роль каспаз в качестве инициаторов процесса активации Вах [86].
Для. выполнения своей проапоптотической функции Вах образует особый димерный комплекс Вах/Вах [151]. Это осуществляется за счет особого, полипептида ffiid (truncated form of Bid). В отсутствии проапоптотического стимула Bid находится в цитоплазме. После активации апоптоза Bid подвергается разрушению при участии каспазы-8, после чего его короткий фрагмент СООН-конца (tBid) переносится на митохондрию. Находясь на наружной мембране митохондрии, он усиливает образование гомодимеров белка Вах [143].
Домен ВНЗ, входящий в состав белка Вах, опосредует связывание с антиапоптотическими белками семейства Вс1-2, что определяет его роль в-качестве индуктора апоптоза [118]. На примере митохондрий кардиомиоцитов было показано, что Вах одновременно воздействует на наружную и внутреннюю мембраны [53]. Это проявляется открытием больших пор наружной мембраны митохондрии и формированием новых пор [122], ингибированием и повреждением некоторых участков дыхательной цепи [53], выделением цитохрома с в цитозоль [100].
Опухолевый супрессор р53 вовлечен в развитие ИБС, хронической' сердечной.недостаточности [152], диабетической кардиомиопатии [81], отторжение трансплантатов [95].
Белок р53 человека состоит из 393 аминокислотных остатков, которые можно объединить в несколько структурно-функциональных доменов. Остатки аминокислот 1-42 на БГНг-конце белка р53 (I функциональный домен) обеспечивают функциональную активность домена III. Функциональный домен II содержит пять_одинаковых. повторов пролин-Х-Х-пролин_и .обеспечиваетхсвязь-С.-другим и белками. Домен III, центральный, является ДНК-связывающим доменом и обеспечивает транскрипционную активность белка. Для осуществления свой транскрипционной активности р53 тетрамеризуется, что обеспечивается IV функциональным доменом. С-концевой. домен V является регуляторным и обеспечивает переходы из активной в неактивную формы белка р53 и наоборот [27].