Гепатопротекторная активность милиацина при метотрексат-индуцированном повреждении печени (экспериментальное исследование)

• Автор: Калинина, Ольга Вячеславовна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 137 с. : 14 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список основных сокращений

Введение

Глава Г Обзор литературы

1Л. Гепатотоксичность антибластомных химиопрепаратов. Проявления и механизмы гепатотоксичности
1.2. Метотрексат. Антиметаболическая активность и участие в формировании токсических поражений печени

1.3. Гепатопротекторы. Основные механизмы защитного действия

1.4. Гепатопротекторная активность тритерпеноидов

Глава II. Материалы и методы исследований

Глава III. Гепатопротекторная активность милиацина при токсическом поражении печени метотрексатом
3.1. Защитное влияние милиацина при метотрексат-индуцированном поражении паренхимы печени
3.2. Защитное влияние милиацина при метотрексат-индуцированном нарушении клиренсной функции макрофагальной системы печени
3.3. Сравнительная оценка эффективности защитного действия милиацина и карсила при метотрексат-индуцированной гепатотоксичности
3.4. Обсуждение результатов
Глава IV. Влияние милиацина на фармакокинетику метотрексата
и его противоопухолевую активность
4.1. Влияние милиацина на параметры фармакокинетики метотрексата
4.2. Влияние милиацина на противоопухолевую эффективность метотрексата на модели перевиваемой карциномы легких Льюис ЬЕС
4.3. Обсуждение результатов

Глава V. Антиоксидантная активность милиацина как основа реализации 100 его гепатопротекторного влияния
5.1. Влияние милиацина на выраженность окислительного стресса и экспрессию генов сур-2е1 и глутатионредуктазы у мышей, подвергнутых воздействию метотрексата
5.2. Обсуждение результатов
Заключение
Выводы
Литературный указатель

Список основных сокращений
АлАТ - аланинаминотрансфераза
АсАТ - аспартатаминотрансфераза
АФК - активные формы кислорода
у-ГТ - гамма-глутамилтранспсптидаза
мтх - метотрексат
пол - перекисное окисление липидов
ТБК-РП - продукты окисления, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой
ТРО - торможение роста опухоли
УПЖ - увеличение продолжительности жизни
цх Р 450 - цитохром Р
АР-1 (activated protein -1) -транскрипционный фактор; димер онкобелков Jun и Fos
ARE (antioxidant responsive element) - регуляторный сайт в промоторных участках генов, контролирующий редокс - баланс клетки сур 450s - цитохром Р 450 зависимые монооксигеназы сур 2е1 - изоформа сур 450s
сур 2е1 - ген, кодирующий продукцию изоформы сур 450s сур 2е1 glured - глутатионредуктаза
glured - ген, кодирующий продукцию глутатионредуктазы
Nf-kB (nuclear transcription factor кВ) - ядерный фактор транскрипции
каппа В
Nrf-2 (nuclear-related factor 2) - фактор транскрипции Р-53 - ядерный белок - онкосупрессор

Глава II
Материалы и методы исследований
Исследования выполнены на 696 мышах-самцах (CBAxO;7Bl6)F|, 63 мышах - самцах гибридов I поколения BDFj (C57BI/6X DBA/2) массой 18-22 г, а также на 84 крысах-самцах Вистар массой 350-400 г. Все животные были поставлены из питомника АМН РФ «Столбовая». Животных содержали в стандартных пластмассовых клетках при комнатной температуре, двухразовом питании натуральным кормом в количестве, соответствующем суточным нормам, при неограниченном доступе к воде.
Эксперименты проведены в соответствии с этическими нормами и рекомендациями по гуманизации работы с лабораторными животными, отраженными в «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1985). Эвтаназию мышей осуществляли цервикальной дислокацией или декапита-цией под эфирным наркозом; выведение из эксперимента крыс - передозировкой наркотизирующего препарата.
Метотрексат (МТХ) австрийской фирмы-производителя «Ebeve» (серии 301715; 700045; 82172909) вводился внутрибрюшинно однократно в дозе 10 мг/кг массы тела животного. Основанием для выбора дозы и способа введения МТХ послужили данные М. Ccliner et al. [2571, A. Cetinkaya et al. [222], применявших однократное внутрибрюшинное введение 20мг/кг цитостатика при воспроизведении токсического поражения печени у крыс. Однако, проведенное нами предварительное испытание этой дозы на мышах (СВА х C57B16)F 1 в двух сериях опытов (рис. 1; серии I и II) показало высокую летальность животных, составившую на протяжении 14 дней 85% и 65%. Аналогичный способ применения МТХ в дозе 10 мг на кг массы приводил к ослаблению летального эффекта, находившемуся в диапазоне от 20% до 8,3% (рис.1; серия III и IV). В связи с этим данная доза (10 мг/кг) и была выбрана для проведения дальнейших экспериментов. Целесообразность исполь-