Экспериментальная оценка цитогенетического и цитотоксического действия акриламида на клетки щитовидной железы

• Автор: Алтаева, Александра Андреевна
• Шифр специальности: 14.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 138 с. : 19 ил.

, Оглавление

Введение

Глава 1. Оценка мутагенного действия факторов окружающей

среды на щитовидную железу (обзор литературы)

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Цитогенетические исследования

-Разработка методов приготовления суспензионных препаратов клеток щитовидной железы

экспериментальных животных

-Кариологический анализ препарата щитовидной железы
-Оценка результатов кариологического анализа на клетках щитовидной железы с учетом интегральных показателей
2.2.2. Морфологический анализ щитовидной железы
-Методика фиксации, приготовления препарата
-Анализ, оценка результатов исследования
морфологического препарата
Собственные исследования
Глава 3. Исследование кариологнческих и морфологических показателей щитовидной железы у экспериментальных животных
3.1 Морфологический анализ щитовидной железы у интактньтх
животных
3.2 Кариологический анализ щитовидной железы у интактных
животных

3.3 Влияние гемитиреоидэктомии на клетки щитовидной
железы крыс
Глава 4. Оценка цитогенетического и цитотоксического эффектов
акрнламида в клетках щитовидной железы экспериментальных
животных
4.1 Зависимость «доза-эффект» цитогенетического и цитотоксического эффектов а крил амида на фолликулярные тироциты (А-клетки) экспериментальных животных
4.2 Зависимость «доза-эффект» цитогенетического и цитотоксического эффектов акрнламида на другие клеточные популяции щитовидной железы крыс
4.3 Зависимость выраженности цитогенетического и цитотоксического эффектов акрнламида на фолликулярные тироциты (А-клетки) крыс при разных режимах введения
4.4. Зависимость действия акрнламида на другие клеточные популяции ЩЖ экспериментальных животных при разных режимах
введения
4.5. Цитогенетическое и цитотоксическое действие акрнламида на фолликулярные тироциты (А-клетки) при его введении до и после гемитиреодэктомии у крыс
4.6. Цитогенетическое и цитотоксическое действие акрнламида на другие клеточные популяции щитовидной железы крыс при его введении до и после гемитиреодэктомии
4.7. Анализ корреляций между цитогенетическими показателями, показателями пролиферации и деструкции ядра при действии акрнламида на клетки щитовидной железы
крыс

Глава 5. Оценка патоморфологического действия акриламида на
щитовидную железу экспериментальных животных.
5.1. Зависимость «доза-эффект» выраженности морфологических
изменений в ЩЖ экспериментальных животных при воздействии акриламида
5.2. Эффект выраженности морфологических изменений в ЩЖ экспериментальных животных при действии акриламида в
зависимости от кратности его введения
5.3. Зависимость выраженности морфологических изменений в ЩЖ экспериментальных животных при воздействии акриламида от времени проведения гемитиреоидэктомии
Глава 6. Обсуждение результатов
6.1 Кариологический анализ на клетках щитовидной железы
6.2 Оценка влияния мутагенов на клетки щитовидной железы на примере
акриламида
6.3 Значение краткосрочных тестов (кариологический анализ) для прогноза канцерогенного действия ФОС на клетки щитовидной железы
Выводы
Приложение
Список использованной литературы
Список публикаций по теме диссертации
Список сокращений

2.2.1. Цитогенетические исследования
Разработка методов приготовления суспензионных препаратов клеток ЩЖ экспериментальных животных
Фиксация исследуемого органа. Крыс умерщвляли парами эфира (расход эфира составляет 50 мл на одно животное). Выделяли комплекс «щитовидная железа-трахея» и помещали в 10% раствор формалина (4% по формальдегиду), приготовленный из нейтрального формалина с pH 7,0, используя 0,1М фосфатный буфер с pH 7,0.
Для приготовления фосфатного буфера использовали следующие растворы:
раствор А: 1/10М КН2РО4
раствор Б: l/10MNa2HPO4 х 12 Н20 35,8 г/л
Фосфатный буфер готовили ex tempore, смешивая 390 мл раствора А и 610 мл раствора Б.
Материал фиксировали - не менее 4 недель.
Получение суспензионных препаратов клеток ЩЖ. Кариологические показатели определяли на суспензионных препаратах, приготовленных методом щелочной диссоциации фиксированных формалином тканей. Методика получения препаратов, окраска и их последующий анализ является предметом изобретения (Евразийская заявка на изобретение № 201000068 от 18.11.2009 г. «Способ выявления цитогенетического и цитотоксического действия факторов окружающей среды в клетках щитовидной железы»), а интерпретация полученных данных требует профессиональной подготовки и в должном объеме ее можно освоить в условиях стажировки в лабораториях соответствующего профиля.
Из зафиксированного в 10% формалине комплекса «щитовидная железа-трахея» выделяли долю ЩЖ, а затем получали отдельные клетки с помощью 6-14 часовой диссоциации раствором КОН (временные