Патогенетическая роль транскрипционных факторов лимфоцитов PAX-5, NF-kB, STAT6 при бронхиальной астме

• Автор: Нёма, Михаил Александрович
• Шифр специальности: 14.01.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 149 с. : 16 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Оглавление
Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Строение и функции транскрипционного фактора РАХ

1.2 Строение и функции транскрипционного фактора №-кВ

1.3 Строение и фунуции транскрипционного фактора 8ТАТ6

Глава 2. Материалы и методы

2.1 Клиническая характеристика обследованных больных

2.2 Методологическая схема

2.3 Методы исследования

2.3.1 Выделение лимфоцитов периферической крови
2.3.2 Исследование экспрессии мРНК методом ЯТ-РСЯ
2.3.3 Исследование экспрессии белков методом иммуноблоттинга
2.3.4 Определение концентрации цитокинов плазмы
2.3.5 Определение концентрации активной формы транскрипционного фактора БТАТб методом проточной флюориметрии
2.3.6 Определение концентрации общего Е сыворотки
2.4 Методы статистической обработки
Глава 3. Результаты проведённых исследований
3.1 Характеристика экспрессии транскрипционного фактора РАХ-5 в лимфоцитах периферической крови при бронхиальной астме
3.2 Характеристика экспрессии транскрипционного фактора ЫБ-кВ
в лимфоцитах периферической крови при бронхиальной астме
3.3 Характеристика экспрессии транскрипционного фактора БТАТ6 и матричной РНК БТАТб в лимфоцитах периферической крови при бронхиальной астме
3.4 Взаимодействие транскрипционных факторов РАХ-5,ИГ-кВ и 8ТАТ6 в
патогенезе аллергической бронхиальной астмы
Глава 4. Обсуждение полученных результатов

Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Бронхиальная астма (БА) является одной из важнейших проблем в современной пульмонологии и приобретает всё большую социальную значимость [Федосеев Г.Б., Трофимов В.И., 2006]. При этом, несмотря на появление новых инновационных стратегий в диагностике и лечении этого хронического заболевания, увеличения количества медикаментозных препаратов, в последние годы, как свидетельствуют различные источники [Илькович М.М. и др., 2007; Чучалин А.Г., Илькович М.М., 2009], отмечается неуклонный рост заболеваемости, растёт распространённость этой патологии во многих странах мира, составляя в настоящее время более 4-10% среди взрослых. Интенсивная индустриализация ведёт к прогрессированию распространённости аллергического варианта БА.
Сохраняются относительно высокими показатели смертности и инвалидизации [Кокосов А.Н., 2005; GINA, 2011]. Увеличивается число больных с тяжёлым течением, среди которых велик процент лиц молодого возраста и детей, растёт количество пациентов, имеющих устойчивость к проводимой терапии.
Складывающаяся ситуация требует поиска новых путей решения проблемы диагностики и лечения БА с обязательным обращением к вопросу о патогенетических механизмах развития бронхолёгочной патологии, генетических аспектах формирования аллергических заболеваний [Келембет
H.A., Гембицкая Т.Е., Иващенко Т.Э. и др., 2008], центральным дефектом которых является изменение и нарушение функционирования клеточного мембранно-рецепторного аппарата [Минеев В.Н., 2005] и сигнальных систем [Barnes J.P., 2008].
Одной из сигнальных систем, играющих решающую роль в патогенезе воспалительных изменений в бронхолёгочной системе, является JAK-STAT (Janus Kinases - Signal Transducer and Activator of Transcription), которая

и GM-CSF (granulocyte-macrophage colony-stimulating factor) возможно благодаря ингибированию NF-кВ глюкокортикостероидами [Tobler A., Meier R., Seitz M., et al., 1992; MukaidaN., Morita M., Ishikawa Y. et al., 1994].
В связи с тем, что в последнее время активно изучаются взаимодействия транскрипционных факторов при различных заболеваниях, в частности при бронхиальной астме, необходимо обратить внимание на взаимосвязь NF-кВ с FOXP3, T-bet, GATA-3 - важными транскрипционными факторами лимфоцитов.
Кроме этого, выявлена способность NF-кВ взаимодействовать с различными компонентами JAK-STAT-сигнальной системы. Было показано, что ацетилированный STAT1, регулятор экспрессии транскрипционного фактора T-bet, способен ингибировать ряд NF-кВ-зависимых генов, участвующих в регуляции апоптоза [Placek К, Gasparian S, Coffre М. et al., 2009]. Также установлена способность NF-кВ индуцировать выработку IL-6 совместно со STAT5 [Iguchi-FIashimoto М., Usui Т., Yoshifuji H., et al., 2011], a пути взаимодействия NF-кВ и STAT3 в настоящее время рассматриваются как возможная мишень новых терапевтических стратегий [Yoon J., Cho S.J., Ко Y.S. et al., 2013].
В исследовании Thieu et al. была подтверждена способность IL-4 регулировать экспрессию генов В-лимфоцитов именно за счет реализации функций NF-кВ и STAT6 [Thieu V.T., Nguyen Е.Т., McCarthy B.P. et al., 2007]. В то же время предполагалось, что STAT6 не способен вызывать экспрессию IL-4-активируемых генов без взаимодействия с другими транскрипционными факторами, в частности NF-кВ. Так Shen et al. было показано, что ДНК-связывающая способность STAT6 усиливается фактором NF-кВ, причем синергетическая активация транскрипции под действием STAT6 и NF-kB осуществляется за счёт количественных и функциональных изменений STAT6 [Shen С.Н., Stavnezer J., 1998].
Сайты связывания для NF-кВ, к которым присоединяется субъединица р50, присутствуют и в промотере 8-GLT, где соседствуют с сайтами