Оптимизация гемотрансфузионной терапии в онкогематологии с использованием физико-химических методов обработки тромбоконцентратов

• Автор: Огородникова, Мария Дмитриевна
• Шифр специальности: 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 135 с. : 12 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Проблемы обеспечения безопасности трансфузий

1.2. Риски трансфузий, связанные с остаточными лейкоцитами

1.2.1. Фебрильные негемолитические трансфузионные реакции

1.2.2. Аллоиммунизация при трансфузиях

1.2.3. Реакция трансплантат против хозяина, ассоциированная

с трансфузией

1.3. Бактериальная контаминация тромбоцитов
1.4. Высокотехнологичные методы обработки компонентов крови
1.4.1. Гамма-облучение
1.4.2. Фотохимическая обработка тромбоцитов
1.4.2.1. Ультрафиолетовое облучение тромбоцитов
1.4.2.2. Доставка УФ излучения тромбоконцентратам
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Пациенты
2.2. Получение концентратов тромбоцитов
2.2.1. Получение концентратов тромбоцитов на сепараторе клеток крови
2.2.2. Получение пулов тромбоцитов из лейкотромбослоя

2.3. Физико-химическая обработка тромбоцитов
2.3.1. Фотохимическая обработка тромбоцитов
2.3.2. Гамма-облучение тромбоцитов
2.4. Оценка качества тромбоконцентратов in vitro
2.4.1. Подсчет остаточных лейкоцитов
2.4.2. Подсчет количества тромбоцитов в аферезных тромбоконцентратах и пулах тромбоцитов
2.4.3. Исследование донорских тромбоконцентратов методом проточной цитометрии
2.5. Клинико-лабораторные показатели эффективности трансфузий аферезных тромбоконцентратов
2.5.1. Определение динамики развития, характера и локализации геморрагических осложнений
2.6. Статистический анализ полученных данных
Глава 3. Влияние физико-химических факторов заготовки, хранения и обработки тромбоконцентратов на маркеры активации и
апоптоза тромбоцитов
3.1. Результаты исследования аферезных тромбоконцентратов
3.1.1. Изучение экспрессии Р-селектина на тромбоцитах в аферезных тромбоконцентратах
3.1.2. Изучение экспрессии фосфатидилсерина на тромбоцитах в аферезных тромбоконцентратах
3.1.3. Динамика содержания тромбоцитов в аферезных тромбоконцентратах
3.2. Результаты исследования пулов тромбоцитов
3.2.1. Изучение экспрессии Р-селектина на тромбоцитах пулов

3.2.2. Изучение экспрессии фосфатидилсерина на тромбоцитах
пулов
3.2.3. Динамика содержания тромбоцитов в пулах
3.3. Сравнение результатов исследования аферезных тромбоконцентратов и пулов тромбоцитов
Глава 4. Оценка влияния методов физико-химической обработки на
контаминирующие лейкоциты
Глава 5. Клиническое применение фотохимически обработанных и гамма-облученных аферезных тромбоконцентратов у онкогематологических пациентов
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

Потенциальный иммуномодуляторный эффект УФ-облучения был впервые описан К. Lindahl-Kiessling и J. Safwenberg (1971), было установлено, что УФ-облученные лимфоциты теряют способность вырабатывать иммунный ответ к аллогенным мононуклеарам в CKJT.
УФ-излучение классифицируется согласно длине волны: длинноволновое УФ-А 320-400 нм, средневолновое УФ-В 280-320 нм, коротковолновое УФ-С 200-280 нм.
Все формы УФ-облучения в той или иной степени влияют на жизнеспособность лимфоцитов. При этом, УФ-А обладает минимальной активностью, если не используется в сочетании с фотосенсибилизаторами [Kripke M.L., 1984], а УФ-С продемонстрировал менее выраженную
биологическую активность по сравнению с УФ-В [Deeg H.J., 1992]. Было установлено, что пик поглощения УФ излучения ДНК соответствует длине волны 297 нм (УФ-В), приводя к образованию межцепочечных связей в виде тимидиновых димеров [Kripke M.L., 1984; Deeg H.J., 1992]. Поэтому большинство исследований были посвящены изучению эффектов УФ-В облучения.
Н. Deeg и соавт. (1986) использовали экспериментальную модель на собаках, чтобы показать, что УФ облучение крови (с длиной волны 220-300 нм, УФ-С/УФ-В, в дозе 1,35 Jem'2) предотвращало индуцированную трансфузией сенсибилизацию и отторжение костномозгового трансплантата, предположительно, за счет инактивации переливаемых дендритных клеток.
S. Slichter и соавт. (1987) изучили эффекты УФ-С облучения на собаках, получивших по 8 трансфузий аллогенных тромбоцитов от одного донора. Тромбоциты подвергались действию излучения 200-290 нм в дозе 12-36 mJcm'2, при этом 92% собак, получивших УФ-облученные тромбоциты, остались неиммунизированными по сравнению лишь с 14% из контрольной группы (реципиентов необлученных тромбоцитов).