Прогностическое значение молекулярно-генетических характеристик у больных хроническим миелолейкозом при аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

• Автор: Горбунова, Анна Валерьяновна
• Шифр специальности: 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 141 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА L МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАТОГЕНЕЗА И ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОЛЕЙКОЗА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1.Клиническая и молекулярно-биологическая характеристика хронического миелолейкоза

1.1.1. Клиническая характеристика хронического миелолейкоза.

1.1.2. Молекулярная биология хронического миелолейкоз

1.1.3. Молекулярные механизмы прогрессии заболевания

1.2. Ингибиторы тирозинкиназ в терапии хронического миелолейкоза..

1.2.1. Структура и механизм действия ингибиторов тирозинкиназ

1.2.2. Молекулярно-биологические механизмы резистентности к ингибиторам тирозинкиназ
1.3. Аллоген ная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток при хроническом миелолейкозе
1.3.1. Эффективность и безопасность аллоТГСК
1.3.2. Прогностические факторы, влияющие на исход трансплантации
1.3.3. Роль аллогенной трансплантации в эпоху ингибиторов тирозинкиназ
ГЛАВА 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ
2.1. Характеристика пациентов
2.2. Метод исследования уровня относительной экспрессии транскриптов химерного гена BCR-ABL
2.3. Методы исследования мутационного статуса гена BCR-ABL
2.4. Метод исследования уровня относительной экспрессии гена EVI1.
2.5. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ЗЛ. Молекулярно-генетические характеристики больных ХМ Л с
резистентностью к ингибиторам тирозинкиназ
ЗЛЛ. Уровень экспрессии транскрипта р210 BCR-ABL
ЗЛ .2. Коэкспрессия транскрипта р 190 BCR-ABL
ЗЛ .3. Спектр и частота мутаций в киназном домене гена BCR-

ЗЛ.4. Экспрессия гена EVI
3.2. Анализ влияния молекулярно-генетических факторов на эффективность аллоТГСК у больных ХМЛ с резистентностью к ингибиторам тирозинкиназ
3.2.1. Результаты аллоТГСК
3.2.2. Прогностическое значение уровня экспрессии транскрипта р210 BCR-ABL
3.2.3. Прогностическое значение коэкспрессии транскрипта р 190 BCR-ABL
3.2.4. Прогностическое значение мутаций в киназном домене гена BCR-ABL
3.2.5. Прогностическое значение уровня экспрессии гена EVI1
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования
Хронический миелолейкоз (XMJT) - это заболевание крови опухолевой природы, основным проявлением которого является пролиферация гемопоэтических стволовых клеток, на начальных этапах заболевания способных к созреванию. При ХМЛ в опухолевых клетках выявляется так называемая Филадельфийская (Ph) хромосома (Nowell P.C. et al., 1960). Это специфическое нарушение кариотипа возникает вследствие сбалансированной реципрокной транслокации t(9;22)(q34;ql 1). На молекулярном уровне возникновение Ph-хромосомы приводит к возникновению химерного гена BCR-ABL, кодирующего конститутивно активную тирозинкиназу (Melo J.V. et al., 2007). В ряде экспериментов было продемонстрировано, что активность белка BCR-ABL необходима для поддержания лейкемического фенотипа клеток (Daley G.Q. et al., 1990; Kelliher M.A. et al., 1990; Heisterkamp N. et al., 1990).
Исследования патогенеза XMJI на молекулярном уровне позволили подобрать низкомолекулярные соединения, способные специфически связываться с белком BCR-ABL и подавлять его тирозинкиназную активность. Ингибиторы тирозинкиназ показали чрезвычайно высокую эффективность как в исследованиях in vitro и in vivo, так и в клинической практике. С 2001 года ингибитор тирозинкиназ иматиниб используется в качестве первой линии терапии при ХМЛ.
Открытие и внедрение в клиническую практику таргетных ингибиторов тирозинкиназы BCR-ABL стало одним из наиболее заметных достижений в современной онкологии. Тем не менее, терапия ингибиторами тирозинкиназ эффективна далеко не у всех больных ХМЛ. Во-первых, не удается получить стойких длительных ремиссий у пациентов в фазе акселерации и бластного криза. Во-вторых, острой проблемой остается первичная и вторичная резистентность к ингибиторам тирозинкиназ, развивающаяся в 20 - 30 % случаев (Cortes J. et al., 2007; Kantarjian H. et al., 2007).

(Shackelford D. et al., 2006). Поэтому не удивительно, что комбинированная терапия с использованием АТО и талидомида позволяет получить гематологичесий ответ у пациентов с МДС с гиперэкспрессией EVI1 (Raza A. et al., 2004). Таким образом, АТО потенциально может быть одним из видов таргетной терапии EVI1+ МДС.
Другим возможным направлением в терапии EVI+ лейкозов может быть использование ингибиторов mTOR (рапамицин, сиролимус, эверолимус) и ингибиторов ДНК-метилтрансфераз (дакоген и 5-азацитидин).
1.3. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток при хроническом миелоленкозе
Одним из наиболее эффективных методов лечения многих заболеваний крови опухолевой природы является аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК) периферической крови или костного мозга (Зубаровская JT.C. и соавт., 2001; Афанасьев Б.В. и соавт., 2002, 2007; Румянцев А.Г. и соавт., 2003; Абдулкадыров K.M. и соавт., 2004; Савченко В.Г. и соавт., 2010). Несмотря на огромные достижения в развитии таргетной терапии XMJI ингибиторами тирозинкиназ, аллоТГСК до сих пор остается единственным методом, который позволяет достичь полного излечения этого вида лейкоза (Mamaev N.N., 2009). Что касается прогностических факторов, то наиболее значимым для исхода аллоТГСК у больных XMJI считается фаза заболевания (Менделеева Л.П. и соавт., 2003).
1.3.1. Эффективность и безопасность аллоТГСК
АллоТГСК успешно применяется в терапии XMJI уже более 30 лет. С помощью этого метода впервые удалось достичь элиминации клона Ph-позитивных клеток после комбинированной интенсивной химио- и радиотерапии с последующей трансплантацией клеток костного мозга от донора-близнеца (Fefer A. et al., 1977). Этот успешный опыт был быстро распространен. Более того, была показана эффективность аллогенной трансплантации и от доноров-сиблингов,