Клинико-экспериментальное обоснование применения аллогенных фибробластов для лечения ожоговых ран IIIА степени

• Автор: Жиркова, Елена Александровна
• Шифр специальности: 14.01.17
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 92 с. : 36 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные методы лечения ожогов

1.2 Применение аллофибробластов для лечения ожоговых ран

1.3 Мыши мутантной линии Нг'г/Нг (безволосые)

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Характеристика клинических групп больных

2.2 Методы исследования и лечения пациентов

2.2.1 Методы исследования пациентов
2.2.2 Методы лечения пациентов
2.3 Характеристика экспериментальных групп
2.4 Модель ожога ША степени и методика применения аллофибробластов для заживления ожоговых ран у беспородных мышей и мышей генетической линии НгНг/Нгкг
2.5 Методы, использованные в экспериментальных исследованиях
2.5.1. Метод культивирования фибробластов мыши
2.5.2. Морфологические методы исследования
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Клиническое исследование
3.1.1 Применение аллофибробластов у обожженных
3.1.2 Морфологическое исследование процесса заживления ожоговых ран ША степени при применении
аллофибробластов
3.2.2 Обсуждение результатов клинического
исследования

3.2 Экспериментальное исследование
3.2.1 Применение аллофибробластов при заживлении ожоговых ран у беспородных мышей и мышей генетической линии Нг1Г/Нгкг
3.2.2 Морфологическое исследование процесса заживления ожоговых ран ША степени при применении аллофибробластов у мышей двух генетических линий
3.2.2.1 Регенерация кожи после ожоговой травмы у
беспородных белых мышей
3.2.2.2 Регенерация кожи после ожоговой травмы у мышей
мутантной линии Нгг/Нгкг
3.2.2.3 Радиоавтографическое исследование
3.2.3 Обсуждение результатов экспериментального
исследования
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АДП - ауто дермопластика АФ — аллофибробласты ВФ - волосяной фолликул н/э — некрэктомия
ПИФ - прогностический индекс Франка
ПИПС - прогностический индекс «правило сотни»
СК - стволовая клетка ст. - степень (ожога)
Э/П - процентный показатель отношения площади эпителизировавшихся ран после применения повязки с аллофибробластами к площади всех ран, закрытых аллофибробластами % п.т. - процент поверхности тела

ауто дермотрансплантатами, использовали перфорированный (1:3, 1:4)
лоскут.
Для местного лечения, ожоговых ран в группе сравнения применяли только традиционное лечение. В основной группе применяли традиционные методы лечения и трансплантации АФ на раны. Больные основной группы давали письменное согласие на лечение с помощью АФ и взятие биопсийного материала для гистологического исследования.
Для трансплантации на раны клетки подготавливали в лаборатории культивирования тканей НИИ СП под руководством проф. В.Б. Хватова в соответствии с Методическими рекомендациями М3 РФ [33]. Использовали предоставленные НИИ полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН диплоидные фибробласты клеточной линии М-22, полученной в Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН профессором JLJI. Мироновой из дермы эмбриона человека 8-недельного развития в 1985 году [66]. Линия М-22 сертифицирована.
На расположенную на дне чашки Петри гидрофобную прозрачную перфорированную для оттока излишков экссудата кремнеорганическуго пленку «Карбосил-П» переносили фибробласты линии М-22 пассажа №15-25. Плотность посева составляла 5-7,54О4 клеток на 1 см2. Культивирование проводили при 37°С в атмосфере, содержащей 5% С02 и 100% влажности. Через 3-4 часа клетки закреплялись на поверхности основания и распластывались. В качестве культуральной среды использовали среду Игла МЕМ, содержащую 15% сыворотки эмбрионов коров и а-глутамин. Антибиотики на этом этапе не применяли для предупреждения у пациентов местных аллергических реакций, обусловленных непереносимостью антибиотика. Прозрачная кремнеорганическая пленка «Карбосил-П», которую использовали в качестве основания, позволяла контролировать характер роста и формирование клеточного монослоя микроскопически. В течение 18-24 часов на поверхности полимерного основания фибробласты