Механизмы устойчивости к гипоксии клеток эстрогеннезависимого рака молочной железы

• Автор: Стефанова, Лидия Борисовна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 108 с. : ил.

Оглавление

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2 1 Регуляция клеточного метаболизма в условиях гипоксии

2.1.1 Механизмы детекции уровни кислорода

2.1.2 Транскрипционный фактор /УТР

2.1.3 Структура НТИ-!

2.1.4 Механизмы регуляции ШГ-

2.1.5 Изофор <иы ИП'-о

2 2 Гипоксия и злокачественные новообразования

2.2.1 Гипоксия и РМЖ
2 3 Воздействие эстрогенов на клетки-мишени Рецепторы эстрогенов
2.3.1 Сигшпьные пути рецепторов ктрогенов
2.3.2 Современные представления о возникновении гормональной резистентности РМЖ.
2 4 Гипоксия н гормональная резистентность РМЖ
2 5 Гипоксия и эпитепи&пьно-мезенчимальный переход
2.5.1 ЭМП и рак
2.5.2 Гипоксии и индукция ЭМП
2 6 ЭМП п гормональная зависимость кпеток РМЖ
3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Список реактивов и производителей
Оборудование и приборы

3.1 Культивирование клеток
3.2 МТТ-тест
3.3 Получение клеточных экстрактов и иммуноблоттинг
3.4 Транзиентная трансфекция
3.5 Трансдукция клеток лентивирусной конструкцией
3.6 Использование специфического ингибитора |3-катенина 1CG-00I
3.7 Использование активатора |3-катеннна CH1R 99
4 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1 Сравнительный анализ выживаемости в условиях гипоксии клеток
эстрогензависимого и эстрогенрезистентного рака молочной железы
4.1.1 Рост клеток MCF-7 и HBL-100 в условиях гипоксии
4.1.2 Индукция I1IF-1 под действием гипоксии
4.1.3 Влияние гипоксии пи содержание и активность рецептора эстрогенов ERa
4.2 Гипоксия и эстрогеннезависимые сигнальные пути
4.2.1 Влияние гипоксии па уровень HER2/Neu
4.2.2 Гипоксия и белок Snuill. Значение Snuill в регуляции выживаемости клеток в условиях гипоксии
4.2.3. Взаимоотношения между Snuill и ERo
4.2.4. Участие кадхерип-катешшового сигнального пути в реакции клеток но гипоксию

5 ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6 ВЫВОДЫ
7 ЛИТЕРАТУРА

Список сокращений
ЛФК - активные формы кислорода
РМЖ - рак молочной железы
ЭМГ1 - эпителиально-мезенхимальный переход
ARNT - aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator (арил-гидрокарбоновый рецепор ядерного транслокатора)
СА1Х - carbonic anhydrase 9 (угольная ангидраза 9)
EGF - epidermal growth factor (эпидермальный фактор роста)
EGFR - epidermal growth factor receptor ( рецептор эпидермального фактора роста)
ERa - estrogen receptor a (рецептор эстрогена a)
FGF - fibroblast growth factor (фактор роста фибробластов)
GLUT I - glucose transporter 1 (белок-переносчик глюкозы 1)
HER2/Neu - human epidermal growth factor receptor 2 (рецептор человеческого эпидермального фактора роста 2)
H1F - hypoxia inducible factor (гипоксия-индуцируемый фактор)
HRE - hypoxia response elements (гипоксия-зависимые элементы)
IGF - insulin-like growth factor (инсулиноподобный фактор роста)
1GFR - insulin-like growth factor receptor (рецептор инсулиноподобного фактора роста) LDH - lactate dehydrogenase 5 (лактатдегидрогеназа 5)
МАРК - Mitogen-activated protein kinases (митоген-активируемые киназы) mTOR - mammalian target of rapamycin (мишень рапамицина у млекопитающих) NF-kB - nuclear factor kappa В (ядерный фактор каппа В)
PI3K - Phosphatidyhnositol-3-kinase (фосфатидмлинозит-З-киназа)

2.3 Воздействие эстрогенов на клетки-мишени. Рецепторы эстрогенов.
Эстрогены - группа стероидных гормонов, регулирующих формирование и функционирование женских половых органов и молочных желез, развитие вторичных половых признаков и некоторые стороны психофизического
состояния организма млекопитающих и человека. В небольших количествах эстрогены производятся также яичками у мужчин и корой надпочечников у обоих полов. Эстрогены играют ключевую роль в морфогенезе матки, яичников, молочных желез и простаты [85]. Кроме того, как у мужчин, так и у женщин, они вызывают широкий спектр биологических эффектов в сердечно-сосудистой, опорно-двигательной, иммунной и центральной нервной системах [73].
В связи с тем, что эстрогены выполняют важную роль в физиологии человека, они вовлечены также и в развитие многих заболеваний, в том числе различных видов опухолей.
Важными органами-мишенями для эстрогенов являются молочные железы, в которых эти гормоны вызывают рост и разветвление молочных протоков, развитие долек и альвеолярных ходов, а также размещение жировой ткани. Благодаря способности эстрогенов значительно стимулировать рост клеток молочной железы, эти гормоны играют ключевую роль в развитии рака молочной железы [I, 4, 81].
На сегодняшний день установлено, что биологические эффекты эстрогенов реализуются через высокоаффинные рецепторы, ЕЯа и ЕЯР, которые кодируются отдельными генами (Елг1 и Е$г2 соответственно), расположенными на разных хромосомах. В нормальных тканях молочной железы экспрессируются оба рецептора, но конкретная их локализация изучена недостаточно [28]. Так. 1ш и соавт. изучали локализацию ЕКа и ЕЯ(3 в нормальной ткани молочной железы человека. Образцы тканей, взятые от женщин в период пременопаузы показали, что ЕИл локализованы