Молекулярные механизмы васкулогенной мимикрии при злокачественных заболеваниях

• Автор: Вартанян, Амалия Арташевна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 206 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Глава 1. Введение

Глава 2. Обзор литературы

2Л. Ангиогенез в норме и в условиях опухолевого роста

2.1.1. Этапы формирования кровеносных сосудов

2.1.2. Созревание вновь сформированных кровеносных сетей

2.1.3. Особенности ангиогенеза при солидных опухолях

2.1.4. Антиангиогенная терапия

2.1.5. Альтернативные пути кровоснабжения опухоли

2.2. Васкулогенная мимикрия

2.2.1. Функциональная значимость васкулогенной мимикрии
2.2.2. Молекулярные детерминанты васкулогенной мимикрии
2.2.3.Сигнальные пути, вовлекаемые в васкулогенную мимикрию
2.2.4. Стволовая клетка опухоли и васкулогенная мимикрия
2.2.5.Клиническое значение васкулогенной мимикрии
2.3. Молекулярные механизмы развития меланомы
Глава 3. Материалы и методы исследования
3.1. Материалы
3.2. Методы исследования in vitro
3.3. Методы исследования in vivo
Глава 4. Результаты исследований и их обсуждение.
4.1. Молекулярные детерминанты васкулогенной мимикрии
4.2.Сигнальные пути, вовлекаемые в васкулогенную мимикрию
4.3.Прогнорстическая значимость PAS-положительных структур при светлоклеточном раке почки
4.4. Заключение
Выводы
Список литературы

Список сокращений
• ЭК - эндотелиальные клетки
• СПС - сосудисто-подобные структуры
• ВМ - васкулогенная мимикрия
• OK - опухолевая клетка
• СК - стволовая клетка
• СКО - стволовая клетка опухоли
• АФК - активные формы кислорода
• c-kit -рецептор гепатоцитарного фастора роста
• VEGF - фактор роста эндотелия сосудов
• VEGFR1 - рецептор фактора роста эндотелия сосудов І-ого типа
• VEGFR2 - рецептор фактора роста эндотелия сосудов Il-ого типа
• PAS - Periodic—Acid-Shiff (перйодная кислота и реактив Шиффа)
• bFGF - основной фактор роста фибробластов
• TGFßl- траснформирующий фактор роста бета
• TNFa - фактор некроза опухолей альфа
• Angl - ангиопоэтин
• Ang2 - ангиопоэтин
• Tie - тирозинкиназный рецептор ангиопоэтинов
• TF - тканевой фактор
• t-PA - тканевой активатор плазминогена
• и-РА - активатор плазминогена урокиназного типа
• TIMP - тканевой ингибитор матриксных металлопротеиназ
• HIF-la - гипоксия индуцибельный фактор la
• PDGF - тромбоцитарный фактор роста
• ТФ - тимидинфосфорилаза
• P1GF - плацентарный фактор роста
• РКС - протеинкиназа С
• ТРА (РМА) - форбол миристат ацетат

Глава 1. Введение
Актуальность темы:
Гипотеза о том, что рост солидных опухолей и возникновение метастазов зависит от образования новых сосудов, была предложена Г Го1кшап более 30 лет назад [87, 88] и в настоящее время подтверждена последними открытиями в области молекулярных и клеточных процессов, касающихся регуляции пролиферации, миграции и взаимодействия клеток, формирующих сосуды. Для формирования сосудистой сети опухолевым клеткам (ОК) необходимо вновь приобрести способность, характерную для стадии эмбрионального развития - вырабатывать вещества, стимулирующие образование новых сосудов (проангиогенные субстанции) [344]. Учитывая, что во взрослом организме такой способностью обладают далеко не все клетки, возможно именно этот факт значительно увеличивает время до «клинически значимого» увеличения опухолевой массы.
Накопленные к настоящему времени данные говорят о том, что индукция ангиогенеза опухоли регулируется самими ОК. Опухоль секретирует растворимые активаторы ангиогенеза, которые являются сигналом начала процесса ветвления сосудов, в частности УБОГА и его рецепторы [27, 36, 39, 169]. Тот факт, что специфический ингибитор пролиферации эндотелиальных клеток (ЭК) может вызвать регрессию опухоли и поддерживать ее в «дремлющем» состоянии, указывает на то, что клетки эндотелия обладают контролирующим воздействием на рост опухоли. Наряду с факторами роста в процессе ангиогенеза большое значение имеет и состав внеклеточного матрикса опухоли. Изучение микроокружения ОК дает возможность понять индивидуальные особенности опухоли, такие как зависимость ее размеров от локализации в том или ином органе, закономерности метастазирования и рецидивирования [95, 339].
Если для разных типов опухолей характерны большие различия в чувствительности к противоопухолевой терапии, эффективная

Образование подобных структур является уникальной особенностью клеток с высоко злокачественным фенотипом; менее агресивные ОК таких структур не формируют [22, 24, 45]. Предполагается, что формирование сети каналов внутри опухоли может поддерживать гомеостаз и предотвратить ранний некроз внутри опухоли. Анализ экспрессии генов с использованием ДНК-микрочипов показал, что высоко агрессивные клетки меланомы по сравнению с низко агрессивными клетками экспрессируют гены, характерные для ЭК, эпителиальных, гемопоэтических, соединительнотканных, мышечных и стволовых клеток, что говорит о частичной генетической реверсии агрессивных ОК в полипотентный, эмбрионально подобный фенотип. Высоко агрессивные ОК, способные формировать каналы ВМ, также экспрессируют гены, вовлекаемые в ангиогенез. И хотя в таких клетках наблюдается высокая экспрессия УЕвЕ, УЕОИИ, УЕСР112, ЬЕвЕ, ЬРОРЯ, СОХ-2, фактора Виллебранда, УЕ-кадхерина, ламинина 5у2, ВМ не зависит от ангиогенеза опухоли [319]. В таких клетках наблюдается и экспрессия матриксных металлопротеиназ ММР-1, -2, -9 и -14, способных модифицировать внеклеточный матрикс, что необходимо для классического ангиогенеза [125, 127]. Таким образом, высоко агресивные ОК способны имитировать поведение ЭК и инициировать формирование васкулярных каналов.
2.2. Васкулогенная мимикрия.
2.2.1. Функциональная значимость ВМ.
В многочисленных исследованиях последних лет было показано, что присутствие каналов ВМ в опухолевом материале больных коррелирует с быстрой прогрессией опухоли, повышением метастазирования, и как следствие - короткой выживаемостью больных [119, 227, 291, 310, 327]. Подобные наблюдения предполагают, что каналы ВМ функционально активны, могут служить альтернативной, независящей от эндотелия, системой циркуляции крови в опухоли и ОК, формирующие каналы ВМ,-