иммунотропная терапия в комплексном лечении генитального герпеса

• Автор: Аль, Сабунчи Татьяна Валерьевна
• Шифр специальности: 14.01.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 93 с. : 18 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ

ОБ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И КЛИНИЧЕСКОЙ КАРТИНЕ ГЕНИТАЛЬНОГО ГЕРПЕСА

(ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР)

1.1. Современные представления об этиопатогенезе

герпесвирусной инфекции

1.2. Современные подходы к лечению генитального герпеса 22 ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ И ЛЕЧЕНИЯ

2.1. Методы исследования

2.1.1.Иммунологические методы исследования

2.1.2.Иммуноферментный анализ
2.1.3.Определение активности естественных
клеток-киллеров
2.1.4.0пределение уровня иммуноглобулинов
2.1.5,Определение общей окислительно - восстановительной активности нейтрофилов в тесте восстановление нитросинего тетразоля (НСТ-тест)
2.2. Методика лечения больных генитальным герпесом тилороном
2.3.Статистическая обработка
ГЛАВА 3. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ
С ГЕНИТАЛЬНЫМ ГЕРПЕСОМ
3.1. Характеристика клинических наблюдений
ГЛАВА 4 СОСТОЯНИЕ РЕГУЛЯЦИИ ИММУННОГО ОТВЕТА
У БОЛЬНЫХ ГЕРПЕСОМ
4.1. Иммунологические показатели у больных генитальным
герпесом
4.2. Влияние тилорона на иммунологические показатели
у больных генитальным герпесом
ГЛАВА 5. КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ
КОМПЛЕКСНОГО МЕТОДА ЛЕЧЕНИЯ АЦИКЛИЧЕСКИМИ НУКЛЕОЗИДАМИ И ТИЛОРОНОМ БОЛЬНЫХ
С ГЕНИТАЛЬНЫМ ГЕРПЕСОМ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВПГ - вирус простого герпеса ГВИ - герпес-вирусная инфекция ГГ - генитальный герпес ГИ - герпетическая инфекция ЕКК - естественные клетки киллеры ЕЦТ - естественная цитотоксичность ИЛ - интерлейкин
ИЛ 1, 2, 4, 5, 6, - интерлейкины 1,2,4, 5, 6,
ИРИ - иммунорегуляторный индекс
ИФ - интерферон
ИФА - иммуноферментный анализ
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ПЯЛ - полиморфноядерных лейкоцитов
РГГ - рецидивирующий генитальный герпес
Тс - Т-супрессоры
Тх - Т хелперы
ТФ - трансферрин
ФГА - фитогемагглютинииа
ФИО - фактор некроза опухоли
ХРГГ - хронический рецидивирующий генитальный герпес
ЦИ - цитотоксический индекс
ЦИК - циркулирующие иммунные клетки
ЦМВ - цитомигаловирус
ЦТЛ - цитотоксические лимфоциты
С133+клетки - зрелые Т-лимфоциты
С04+клетки - Т-хелперы-индукторы
СБ8+клетки - Т-супрессоры цитотоксические клетки
СО 16 (14 К) - естественные киллеры

своей поверхности рецептор к интерлейкину-2 (ИЛ-2) - С025+клетки и антигены HLA-DR - HLA-DR+клетки. Идентификацию фенотипа исследуемых популяций и субпопуляций лимфоцитов осуществляли следующим образом. Лимфоциты выделяли на одноступенчатом градиенте плотности фиколл -верографина (плотность 1,077г/мл). Гепаринизированную кровь, взятую из локтевой вены в количестве 2мл, разводили физиологическим раствором в соотношении 1:1 и осторожно наслаивали с помощью пастеровской пипетки на 2мл фиколл-верографина (плотность 1,077 г/мл) в центрифужной пробирке. Центрифугировали 30 минут при 1500 об/мин на холоде. Образовавшееся в интерфазе «белое облачко» лимфоцитов переносили в пластиковую пробирку и отмывали 2 раза физиологическим раствором. Суспензию лимфоцитов в объеме 100 мкл вносили в лунки 96-луночного круглодонного планшета. К клеткам добавляли 5 мкл тестируемых моноклональных антител и инкубировали 30 минут при +4 °С. Затем клетки отмывали 2 раза как указано выше. После удаления супернатанта клетки фиксировали 100 мкл 2% раствора формалина.
Окрашенные клетки анализировались на проточном цитофлюориметре «FACScan» фирмы «Becton Dickinson» (США).
2.1.2.Иммуноферментный анализ.
Уровень цитокинов определяли в сыворотке крови больных с помощью иммуноферментного анализа, используя наборы Pro-con (ООО «Протеиновый контур», Санкт-Петербург, Россия). Определяли уровень ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-6, ИФНу и ФНОа.
До начала проведения анализа лунки планшета дважды промывали
буферным раствором. Затем в лунки вносили по 10 мкл буфера В, при этом
диапазон концентрации цитокинов становился от 20 пкг до 0,3 МЕ/мл.
Добавляли по 100 мкл исследуемой сыворотки. Инкубировали 60 минут при
+25 С и непрерывном встряхивании. Удаляли жидкость и трижды промывали
буферным раствором. После тщательной аспирации пипеткой вносили в
каждую лунку по 200 мкл раствора вторых антител и инкубировали при