Мутации и полиморфизмы в генах миоцилина, цитохрома Р450 1В1 у больных с первичной врожденно, первичной ювенеальной и первичной открытоугольной глаукомами из числа жителей Санкт-Петербурга

• Автор: Мотущук, Анна Евгеньевна
• Шифр специальности: 14.01.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 134 с. : 27 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список принятых сокращений

Введение

Глава 1. Современные представления о роли наследственных

факторов в развитии ПВГ, ПЮГ и ПОУГ (Обзор литературы)

1.1 Эпидемиология и факторы риска развития глаукомы

1.2 Структура гена МУОС и белка миоцилина

1.3 Функции белка миоцилина и его роль в патогенезе глаукомы

1.4 Мутации в гене МУОС
1.5 Структура гена СУР1В1 и белка цитохрома Р450 1В1
1.6 Функции белка цитохрома Р450 1В1 и его роль в патогенезе
глаукомы
1.7 Мутации в гене СУР1В1
1.8 Структура гена VDR36
1.10 Мутации в гене VDR36
1.11 Структура гена ОРТИ и белка оптиневрина
1.12 Функции белка оптиневрина и его роль в патогенезе глаукомы
1.13 Мутации в гене ОРТИ
Глава 2. Материалы и методы исследований
2.1 Клинические методы обследования
2.2 Молекулярно-генетические методы исследования
2.3 Статистические методы, использованные в работе
2.4 Общая характеристика обследованных пациентов
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1 Мутации в гене миоцилина (МУОС)
3.2 Полиморфизмы в гене миоцилина (МУОС)
3.3 Мутации в гене цитохрома Р450 1В1 (СУР1В1)
3.4 Полиморфизмы в гене цитохрома Р450 1В1 (СУР1В1)

3.5 Полиморфизмы в гене WDRЗб
3.6 Частоты встречаемости полиморфизмов, обнаруженных в исследуемых экзонах генов миоцилина (МУОС), цитохрома
Р450 1В1 (СУР1В1) и VDR36
Заключение
Выводы
Список литературы
Приложение
Приложение

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ:
А.о. - аминокислотный остаток
ВГД - внутриглазное давление
ВВ - водянистая влага
ГКГ - глюкокортикоидные гормоны
ГТФ-аза - гуанозинтрифосфатаза
ДЗН - диск зрительного нерва
ДТТ - дитиотреитол
ИПТГ - изопропил-Р-О-тиогалактозид
кДНК - комплементарная ДНК
мРНК - матричная РНК
ПААТ - полиакриламидный гель
ПВГ - первичная врожденная глаукома
ПДРФ-анализ - анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов П.н. - пары нуклеотидов
ПОУГ - первичная открытоугольная глаукома
ПСА - персульфат аммония
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ПЮГ - первичная ювенильная глаукома
ПЭГ - полиэтиленгликоль
РРУ - радужно-роговичный угол
ТВЕ - трис-боратный буфер
ТЕМЕД - тетраметилэтиленамид
Т.п.н. - тысячи пар нуклеотидов
Э/Д - отношение диаметра экскавации к диаметру диска зрительного нерва ЭДТА - этилендиамиитетраацетат ЭС - эндоплазматическая сеть
SNP - однонуклеотидные замены (single nucleotide polymorphism) SSCP-анализ - анализ конформационного полиморфизма однонитевых фрагментов ДНК

(g.8131 C>G) аллель G встречается достоверно чаще у пациентов с ПОУГ, чем среди здоровых доноров (р=0,0001; OR=6,027; 95% С1:3,863 - 9,401). Кроме того, при трансфекции культуры клеток пигментного эпителия сетчатки кДНК CYP1B1 с заменой L432V, было отмечено повышенное образование активных форм кислорода (ROS) по сравнению с наблюдаемым при экспрессии аллеля дикого типа. Активные формы кислорода оказывают цитотоксическое действие на сетчатку и зрительный нерв, а также приводят к деструктивным изменениям в дренажном аппарате глаза. На основании этих данных авторы сделали заключение, что полиморфизм L432V является предрасполагающим фактором к развитию ПОУГ.
В 2002 году A.L. Vincent с соавт. обнаружил интересный факт: у пациентов, несущих мутацию R368H в гене CYP1B1 наряду с мутацией G388V в гене миоцилина заболевание глаукомой проявлялось в более раннем возрасте, чем у носителей только лишь одной мутации в гене миоцилина. Средний возраст развития заболевания у пациентов только с мутацией G399V в гене миоцилина был 51 год (48-64 года) (п=4) и они были диагностированы как пациенты с ПОУГ. Однако, в той же семье часть родственников (п=5) несла дополнительную мутацию R368H в гене CYP1B1 и средний возраст развития заболевания у носителей одновременно двух мутаций составил 27 лет (23-38 лет), то есть они должны были быть классифицированы как пациенты с ГПОГ. Первоначально мутации в гене CYP1B1 связывали только с врожденной глаукомой с аутосомно-рецессивным типом наследования. Однако данные, полученные A.L. Vincent с соавт. (2002), свидетельствуют о том, что цитохром Р450 1В1, кодируемый CYP1B1, может также выступать в роли модификатора экспрессии гена MYOC.