Противоишемическая защита печеночного трансглантата с помощью Липина - водорастворимого препарата липидной природы (экспериментальное исследование)

• Автор: Шагидулин, Мурат Юнусович
• Шифр специальности: 14.00.41
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 131 с. : 14 ил.

ПРИНЯТЫЕ В РАБОТЕ СОКРАЩЕНИЯ

АДФ - аденозиндифосфат;

АМФ - аденозинмонофосфат;

АТФ - аденозинтрифосфат;

СРО - свободнорадикальное окисление;

ФЛ - фосфолипиды;

ФС - фосфатидилсерин;

ФИ - фосфатидилинозитол;

ФХ - фосфатидилхолин;

ЛФХ - лизофосфатидилхолин;

МДА - малоновый диальдегид;

ПОЛ - перекисное окисление липидов;
С 15:0 - пентадециловая кислота;
С 16:0 - пальмитиновая кислота;
С 18:0- стеариновая кислота;
С 18:1 ш9 - элединовая кислота;
С18:2у6- линолевая кислота;
С18:3ш6- линоленовая кислота;
С 19:0- нонадециловая кислота;
С 20:0 - арахиновая кислота;
С 20:3(’у6+уЗ) - эйкозатриеновая кислота;
С 20:4у6 - арахидоновая кислота;
С 22:0 - бегеновая кислота;
НТК - консервационный раствор: гистидин-триптофан-
кетоглюторат (Кусто диол);
КНВ раствор для реперфузии: Кребс Хензиляйт;
ТСХ тонкослойная хроматография.
ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение
Глава 1. Патогенез ишемического повреждения и методы консервации
изолированной донорской печени (Обзор литературы)
1.1. Патогенез ишемического и реперфузионного повреждения
печени при трансплантации
1.1.1 Роль эндотелиальных, купферовских клеток и клеток крови в
развитии реперфузионного повреждения
1.1.2. Медиаторы реперфузионного повреждения клеток
1.2. Медико-биологические проблемы разработки надежных методов 26 консервации органов
1.3. Формирование противоишемической резистентности органов 30 консервирующими растворами
1.4. Использование фармакологических препаратов для 35 противоишемической защиты печени
Глава 2. Материалы и методы исследований
2.1. Общая характеристика экспериментальных животных и 40 проведенных экспериментов
2.2. Характеристика используемых консервирующих растворов, 41 реперфузионных составов и медикаментозных препаратов липидной природы
2.3. Хирургическая техника забора печени крыс, методы консервации
и реперфузии
2.3.1. Техника забора печени
2.3.2. Техника консервации изолированной печени
2.3.3. Техника реперфузии изолированной печени
2.4. Методы морфологических исследований
2.4.1. Гистологическая характеристика биопсийного материала

2.4.2. Цитологическая характеристика биопсийного материала
2.5. Методы биохимических исследований
2.5.1. Определение показателей липидного обмена
2.5.2. Определение метиловых эфиров жирных кислот и холестерола
2.5.3. Определение аминотрансфераз в перфузате
2.5.4. Определение адениновых нуклеотидов и глутатиона в печени
2.6. Другие методы 53 Глава 3. Гистологическая и морфометрическая характеристика ткани 54 печени при консервации и реперфузии
3.1. Характеристика повреждения ткани печени после консервации в 54 растворе НТК без и с добавлением препарата Липин
3.1.1. Гистологическая характеристика печеночной ткани при
консервации в растворе НТК (контроль)
3.1.2. Гистологическая характеристика печеночной ткани при
консервации в растворе НТК с добавлением Липина
3.1.3. Сравнительные морфометрические исследования печени при 64 консервации в р-ре НТК без и с добавлением препарата - Липин
3.1.4. Энтропия и относительная организация клеточной системы 68 печени после консервации
3.2. Характеристика реперфузионного повреждения после
консервации печени в растворе НТК без и с добавлением препарата Липин
3.2.1. Гистологическая характеристика реперфузионного 70 повреждения печеночной ткани после консервации в растворе НТК
без и с добавлением Липина
3.2.2. Энтропия и относительная организация клеточной системы 73 печени после реперфузии
Резюме

обеспечения трансплантатами нуждающихся пациентов на всех этапах стали использовать фармакологические препараты.
1.4. Использование фармакологических препаратов для протнвоншемичсской защиты печени
В клинической практике фармакологические препараты являются основным средством борьбы с ишемическими повреждениями органов [31,33,34,55,73,116,127,295,202]. Как известно, для этих целей с успехом применяются препараты разных фармакологических групп, но, у препаратов с мембранотропной активностью защитный противоишемический эффект наиболее выражен, поскольку повреждение мембран является важным звеном ишемического повреждения [49]. Основной поиск эффективных средств ведется среди тех препаратов, которые предотвращают необратимые структурные перестройки мембран за счет стимуляции пластической конформации их белково-липидного комплекса. Эти препараты существенным образом повышают резистентность органов и тканей к ишемии. В литературе, посвященной результатам использования фармакологических препаратов для противоишемической защиты печени [15,33] имеются указания на положительные результаты применения убихинона (кофермента СЬо) как при предварительном введении (в дозе 5-6 мг/кг), так и при введении в состав консервирующего раствора; аналогичным образом использовались хлорпромазин и 2-деоксикоформицин - ингибитор ферментов деградации аденозина, а также простациклин, которые существенно улучшали функцию трансплантированной печени и препятствовали развитию деструктивных изменений. Все известные и до сих пор используемые противоишемические препараты представляли собой регуляторы энергетического метаболизма, регуляторы микроциркуляции, а также препараты с антиоксидантными свойствами, способствующими сохранению структуры и свойств липидного бислоя мембран, состоящих преимущественно из фосфолипидов. Между тем,