Аутоантитела различных уровней специфичности и функциональности при аутоиммунных увеитах: патогенетические и клинические аспекты

• Автор: Третьяк, Евгения Борисовна
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 221 с.

Оглавление
Оглавление
Сокращения
Введение
Глава 1. Обзор литературы. Аутоантитела различной специфичности в патогенезе и диагностике аутоиммунных увеитов

1.1. Современные представления о патогенезе аутоиммунных увеитов

1.2. Естественные аутоантитела как причина и индикатор развития аутоиммунных нарушений

1.2.1. Увеаретинальные аутоантитела и их место в патогенезе аутоиммунных увеитов

1.2.2. ДНК-связывающие аутоантитела и их возможная

роль в патогенезе аутоиммунных увеитов

1.2.3. Каталитические аутоантитела в патогенезе аутоиммунных увеитов
1.3. Антитела различной специфичности как молекулярнодиагностический инструмент в серодиагностике и серопрогно-зированпи аутоиммунных увеитов
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Общая характеристика групп больных
2.2. Расходные материалы, реактивы и наборы иммунодиагно-стических реагентов («киты»)
2.3. Методы иммунологического обследования
2.3.1. Определение содержания в сыворотках крови больных аутоантител различной специфичности
2.3.2. Определение содержания в сыворотках крови больных иммуноглобулинов ЦО,ЦМ и ЦА
2.3.3. Определение содержания в сыворотках крови больных циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК)
2.3.4. Постановка реакции связывания комплемента
2.3.5. Постановка реакции прямой иммунофлюоресценции
2.3.6. Проведение внутрикожной пробы с герпетической поливакциной
2.3.7. Общелабораториые и клинико-инструментальные методы исследования
2.4. Методы молекулярной и клеточной биологии

2.4.1. Метод аффинной сорбции для экспресс-скрининга образцов крови на наличие ДНК-абзимов
2.4.2. Фракционирование, выделение и очистка ДНК-абзимов из сывороток крови
2.4.3. Определение ДНК-гидролизующей активности в препаратах анти-ДНК аутоантител
2.4.4. Культура эукариотических клеток и анализ цито-токсического потенциала ДНК-абзимов
2.4.5. Анализ цитоплазматической фракции клеток на наличие фрагментов ДНК
2.5. Методы статистической обработки результатов
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Увеаретинальные аутоантитела в сыворотках крови больных с аутоиммунными увеитами
3.1.1. Частота встречаемости увеаретинальных аутоантн-тел в сыворотках крови у больных с различными клиническими формами и вариантами течения аутоиммунных увеитов
3.1.2. Титры органоспецифических увеаретинальных ау-тоантителв сыворотках крови у больных с различными клиническими формами и вариантами течения аутоиммунных увеитов
3.1.3. Корреляции между распространенностью и содержанием увеаретинальных аутоантител и клиническими вариантами аутоиммунного увеита
3.2. ДНК-связывающие аутоантитела у больных с аутоиммунными увеитами
3.2.1. ДНК-связывающие аутоантитела в сыворотках крови больных с аутоиммунными увеитами
3.2.1.1. Частота встречаемости ДНК-связывагощих аутоантител у больных с разными клиническими формами и вариантами течения аутоиммунных увеитов
3.2.1.2. Сывороточные уровни ДНК-связывающих аутоантител у больных с разными клиническими формами и вариантами течения аутоиммунных увеитов
3.2.1.3. Корреляции между распространенностью и содержанием ДНК-связывающих аутоантител и клиническими вариантами аутоиммунного увеита

3.2.1.4. Частота встречаемости ДНК-абзимов у больных с различными клиническими формами и вариантами течения аутоиммунных увеитов
3.2.1.5. Корреляции между распространенностью ДНК-абзимов, частотой встречаемости и титрами специфических (увеаретинальных) аутоантитсл и клиническими вариантами аутоиммунного увеита
3.2.2. Каталитическая и цитотоксическая активность ДНК-связывающих аутоантител у больных с аутоиммунными увеитами
3.2.2.1. Уровни каталитической и цитотоксической активности ДНК-абзимов у больных с разными клиническими формами и вариантами течения аутоиммунных увеитов
3.2.2.2. Зависимость между частотой встречаемости и титрами аутоантител разной специфичности, ферментативной активностью ДНК-абзимов и клиническими вариантами аутоиммунного увеита
Обсуждение
Выводы
Практические рекомендации
Приложения
Список литературы

ся также и в ресничном теле [255]. Однако роль антинейрофильных цитоплазматических антител в патогенезе увеитов пока изучена недостаточно, хо,-тя данные целого ряда исследований заставляют рассматривать такие аутоантитела как индикаторы активации более сложных механизмов аутоиммунитета с вовлечением большего числа аутоАГ.
Группа аутоантител к т.н. белкам теплового шока, представленным в сетчатке, оказалась клинически значимой при оценке особенностей развития увеитов при болезни Бехчста [269, 270], а в случае изолированных увеитов (парспланит) - косвенным свидетельством распространенности аутоиммунного воспалительного процесса [95].
По мере прогрессирования аутоиммунных нарушений и нарастания деструкции клеток-«мишеней» в крови больных начинают появляться аутоантитела к неоантигенам, в частности, к бета-галактозидазе [131] и у-субъедннпце циклической ГМФ-фосфодиэстеразы [183], причем увеитоген-ный потенциал этих аутоАГ сравним с таковым для классических увеареги-нальных аутоАГ.
1.2.2. ДНК-связывающие аутоантитела и их возможная роль в патогенезе аутоиммунных увеитов
Хотя основную часть репертуара аутоантител при органоспецифических формах аутоиммунной патологии составляют аутоантитела с направленностью к антигенам конкретного органа, у таких больных можно выявить и рост тигров органонеспецифических аутоантител, в частности, ДНК-связывающих аутоантител.
ДНК-связывающие аутоантитела относятся к группе антиядерных аутоантител, способных связывать одноцепочечную (оц) и двухцепочечную (дц) ДНК. При этом непосредственными аутоАГ для антител, связывающих только оцДНК, служат нуклеиновые основания, нуклеозиды, нуклеотиды и олигонуклеотиды; для антител, связывающих только дцДНК, - пары оснований и рнбозо-фосфатный комплекс, а также нативная ДНК (в большинстве случаев левозакрученная двойная спираль, или Z ДНК) [135, 215].