Замещение клетками пуповинной крови костных полостей экспериментального остеомиелита (экспериментальное исследование)

• Автор: Мельникова, Арина Викторовна
• Шифр специальности: 14.00.27
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 112 с. : 27 ил.

Оглавление.
Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Этиопатогенез, клиника и лечение хронического

остеомиелита

1.2. Современные методы стимуляции регенерации костной ткани

1.3. Клеточные технологии в стимуляции репаративного остеогенеза

1.3.1. Общая характеристика стволовых клеток

1.3.2. Свойства стволовых клеток и их применение в

клинической практике

1.3.3. Клеточная терапия в репаративном остеогенезе

2.1. Экспериментальные методы исследования
2.1.1. Общая характеристика эксперимента
2.1.2. Методы морфологического и иммунофенотипического анализа пуповинной крови животных
2.1.3. Методы исследования репаративных процессов в
костной ткани
2.2. Методы статистической обработки результатов
исследования
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Обоснование применения клеток пуповинной крови с целью стимуляции репаративной регенерации костной ткани
3.1.1. Анализ клеточного состава пуповинной крови
крыс

3.1.2. Иммунофенотипическое и морфологическое исследование клеток пуповинной крови крыс
3.2. Клинико-морфологическая характеристика
экспериментального остеомиелита бедренных костей лабораторных животных
3.3. Изучение эффективности репаративной регенерации после замещения костных полостей экспериментального остеомиелита клетками пуповинной крови
3.3.1. Динамика клинико-морфологических изменений в инфицированных дефектах бедренной кости крыс после замещения клетками пуповинной крови
3.3.2. Динамика клинико-морфологических изменений в полостях бедренных костей крыс без замещения клетками пуповинной крови
3.3.3. Анализ эффективности замещения клетками пуповинной крови костных полостей экспериментального
остеомиелита
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

Введение
Проблема лечения хронического остеомиелита находится в центре внимания хирургов и травматологов и не теряет своей актуальности на протяжении многих лет. Среди гнойных заболеваний на долю остеомиелита приходится от 3 до 10% [23,38,53,105]. Широкое внедрение в практику травматологии и ортопедии различных методов остеосинтеза, часто
необоснованное их применение при недостаточной квалификации специалистов и отсутствии возможности закрытия обширных дефектов тканей вызвало увеличение числа гнойных осложнений. Открытые переломы длинных трубчатых костей в 5,5-75,4% и огнестрельные ранения конечностей в 34-90% случаев осложняются посттравматическим остеомиелитом [27,3 8,53,105]. Послеоперационное нагноение при экстренно выполненном остеосинтезе у больных с открытыми переломами отмечается в 8-10 раз чаще, чем у оперированных в плановом порядке пациентов [62,114,118].
По тяжести клинического течения, трудности ранней диагностики, большому проценту осложнений, приводящих к инвалидности, эту патологию следует отнести к очень тяжелым гнойным заболеваниям. Удельный вес посттравматического остеомиелита длинных трубчатых костей в общей структуре инвалидности колеблется от 10,6 до 11,1% [26,53,105].
Несмотря на применение современных методов и средств борьбы с хирургической инфекцией, результаты лечения остеомиелита пока нельзя признать удовлетворительными. У 15-30% больных острый гематогенный остеомиелит переходит в хроническую форму, рецидивы при хроническом остеомиелите

этических и правовых ограничений; возможность длительного хранения в замороженном состоянии без потери биологических свойств и возможность использования в качестве аутологичного трансплантата [2,34,56,109,136,175,218].
Большим преимуществом клеток пуповинной крови является их низкая реактогенность, что снижает вероятность посттрансплантационных осложнений, а также меньший риск
развития болезни «трансплантат против хозяина» при частичном HLA несовпадении донора и реципиента [34,56,253]. Некоторыми исследователями установлено, что в пуповинной крови
возбудители различных вирусных и бактериальных инфекций встречаются реже, чем в других аллогенных материалах [54].
Экспериментальными работами показано, что
мезенхимальные стволовые клетки пуповинной крови при
культивировании способны к дифференцировке в мезодермальном направлении: в костную, хрящевую и жировую ткань.
Культивирование клеток в остеогенной среде приводило к повышению уровня щелочной фосфатазы, минерализации среды, что подтверждалось окрашиванием по Von Kossa или Alisarin RedS [144,162,200,217,218,222,225]. Помещение клеток в хондрогенную среду приводило к образованию сферических структур, окрашиваемых в синий цвет толуидином, и увеличению экспрессии кератана, хондроитин-4-сульфата, коллагенов 1, 2 типов [200,217,218,222,225].
Основная масса экспериментов сводится к изучению остеогенетических потенций клеток пуповинной крови человека, дифференцированных in vivo или на моделях иммунодефицитных животных [109,144,162,200,215,217,218,225]. Есть единичные сообщения об экспериментальном изучении воздействия клеток