Дифференциально-диагностические свойства и чувствительность к антибактериальным препаратам бактерий Pseudomonas aeruginosa

• Автор: Чжун Синь
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 152 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Дифференциально-диагностические признаки Pseudomonas aeruginosa

1.2. Факторы вирулентности Pseudomonas aeruginosa

1.3. Циркуляция бактерий Pseudomonas aeruginosa в природе, пути

и источники заражения животных, факторы передачи человеку..

1.4. Чувствительность Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным препаратам

1.5. Заключение по обзору литературы

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Методы индикации и идентификации Pseudomonas aeruginosa..
2.2. Методы изучения патогенных свойств Pseudomonas aeruginosa..
2.3. Методы изучения антагонистических свойств бактерий..
2.4. Методы изучения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам
2.5. Методы статистической обработки результатов исследований... 50 Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Результаты исследований морфологии колоний бактерий Pseudomonas aeruginosa
3.2. Результаты изучения дифференциально-диагностических
свойств бактерий Pseudomonas aeruginosa
3.3. Результаты изучения патогенных свойств Pseudomonas aeruginosa
3.4. Результаты изучения антагонистических свойств микроорганизмов Pseudomonas aeruginosa
3.5. Результаты изучения чувствительности бактерий Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным препаратам
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Бактерии Pseudomonas aeruginosa выделены практически от всех видов млекопитающих, птиц, рыб, при инфицировании восприимчивых видов, реализуют факторы вирулентности, связанные с синтезом экзотоксинов (гемотоксин, лейкоцидин, цитотоксины) и эндотоксина (липополисахариды). Указанные бактерии распространены повсеместно, обнаружены в воде, почве, пищевых продуктах, выделенные из объектов внешней среды, характеризуются психрофильностыо, метаболической пластичностью, ростом на обедненных средах с сохранением вирулентности (Сомов Г.П., Литвин В.Ю., 1988; Павлова И.Б., Ленченко Е.М., 1998; Марченко Т.В., 2006; Павлова И.Б. и соавт., 2007; Макаров В.В., 2008; Шестаков А. Г., 2010; Викторов Д.А., 2011; Захарченко О.Н., Плешакова В.И., 2011; Кондакова И.А. и соавт., 2011, 2014; Николаева Н.В., 2011; Пруцаков B.C., 2011; Рождественская Т.Н., 2011; Серегин И.Г. и соавт., 2011; Баженова Е.А., 2012).
Экзополисахариды, продуцируемые бактериями P.aeruginosa в виде биопленок, обладают защитным эффектом от действия активного кислорода, что приводит к смене бактериями фенотипа в виде перехода в мукоиднуго форму, характеризующуюся изменением способности окраски по Граму, снижением процессов метаболизма и переходом популяции в «некультивируемое состояние», что обусловливает длительность и ретроспективность бактериологических исследований (Мележик И.А. и соавт., 2013; Ленченко Е.М., 2014; Dora Marta, 2011).
При мониторинге распространенности возбудителей инфекционных болезней наблюдается статистически достоверная тенденция роста множественной лекарственной устойчивости бактерий (Куликовский А.В., 2004, 2011; Тарасова И.И. и соавт., 2014; Gram et al., 2002; Huang Meizi et al., 2003; Irohal R. et al., 2011; He Lanxiang et al, 2012).
Учитывая социальную и экономическую значимость проблемы, одной из приоритетных задач является изыскание антибактериальных препаратов,
эффективность которых определяется экологической безопасностью и

широким спектром действия, в том числе и по отношению к бактериям P.aeruginosa, проявляющим множественную лекарственную устойчивость, вследствие повышенного синтеза экзополисахаридов, формирующих биопленки, которые способны замедлять диффузию антибактериальных препаратов (Чеботарь И.В. и соавт., 2012; Не Xianyuan, 2014). Для расширения научных познаний этиологической значимости факторов вирулентности бактерий P.aeruginosa целесообразным является изучение динамики патологических процессов на восприимчивых лабораторных моделях; апробация, изыскание и подбор эффективных диагностических сред, тест-систем для дифференциации бактерий, а также экспресс-тестов изучения чувствительности к антибактериальным препаратам, что и определило актуальность темы диссертационной работы.
Цель работы: изучить дифференциально-диагностические, патогенные, антагонистические свойства, чувствительность к антибактериальным препаратам бактерий P.aeruginosa, выделенных из пищевого сырья и продуктов.
Задачи исследований:
- изучить морфологию колоний бактерий Pseudomonas aeruginosa;
- апробировать и изыскать эффективные диагностические среды и тест-системы для количественного учета, видовой идентификации и дифференциации бактерий Pseudomonas aeruginosa;
- изучить патогенные свойства бактерий Pseudomonas aeruginosa;
- изучить антагонистические свойства бактерий Pseudomonas aeruginosa;
- изучить чувствительность бактерий Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным препаратам
Научная новизна. Научно обоснована и экспериментально подтверждена эффективность применения селективной среды «Cetrimide agar»
(специфичность - 94,8 %) для количественного учета, видовой идентификации и дифференциации бактерий P.aeruginosa. Установлено, что цитопатическое

1.5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ
Бактерии Pseudomonas aeruginosa при инфицировании
восприимчивых видов реализуют факторы вирулентности, связанные с синтезом экзотоксинов (гемотоксин, лейкоцидин, цитотоксины) и
эндотоксина липополисахарндной природы, что обусловливает многообразие клинических проявлений болезней, вызываемых данной группой бактерий. Установлено, что популяции бактерий P. aeruginosa, выделенные из объектов внешней среды, характеризуются психрофильностыо, метаболической пластичностью, ростом на
обедненных средах с сохранением вирулентности. Особенностью
псевдомонад является наличие широкого спектра факторов вирулентности (Scharmann W. 1976; Bodey G. P. et al., 1983; Rocha C.L. et al., 2003;). Адгезия бактерий P. aeruginosa к абиотическим поверхностям обусловлена неспецифическими взаимодействиями (например, за счет разницы заряда), адгезия к живым тканям осуществляется путем контакта с рецепторами эукариотической клетки (Езепчук Ю.В.,1985; Малышева Э.Ф., 1988; Dholakia P.M., 1985). Сравнительное
электронно-микроскопическое исследование штаммов P. aeruginosa показало, что клетки вирулентных штаммов имеют слизеподобную капсулу, в которой различимы два слоя - внутренний ригидный, тесно связанный с клеточной стенкой, и наружный, более тонкий, гомогенный. На поверхности наружного слоя были обнаружены множественные мелкие шаровидные образования, определяющие адгезивные свойства, обеспечивающие прикрепление бактерий к различным субстратам (Дзюбак С.Т., 1983). Клетки авирулентных штаммов слизеподобной капсулой не обладают и имеют типичную для большинства грамотрицательных бактерий структуру. В присутствии очищенного полисахарида слизи адгезивные свойства мукоидных штаммов Paeruginosa повышаются на 30-50 % (Ramphai R., 1985). На основании анализа данных литературы сделано заключение, что функционирование факторов патогенности имеет общие закономерности, связанные со способностью к опознаванию