Биологические свойства эпизоотических штаммов вируса ящура типов А, О и Азия-1, выделенных в Республике Таджикистан в период с 2006 по 2012 гг.

• Автор: Косумбеков, Маъруф Имомёрбекович
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 130 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. Введение

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Ящур как мировая проблема в инфекционной патологии животных

2.2. Современная эпизоотическая ситуация по ящуру

в Дальне - Восточном и Центрально-Азиатском регионах

2.3. Биологические особенности вируса ящура

2.4. Методы изучения биологических свойств вируса ящура и противоящурных антител к нему

2.5. Меры борьбы и профилактика ящура

2.6. Заключение по обзору литературы Й

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ЗЛ. Материалы и методы

3.1.1. Материалы
3.1.1.1. Вирусный материал
3.1.1.2. Подопытные животные
3.1.1.3. Культуры клеток и питательные среды
3.1.1.4. Сыворотки крови
3.1.1.5. Оборудование, химические реактивы, растворы
3.2. Методы исследования
3.2.1. Выделение вируса ящура
3.2.2. Культивирование вируса ящура в клеточных культурах
3.2.3. Серологические реакции
3.2.4. Титрование вируса ящура
3.2.5. Статистическая обработка результатов
4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1. Анализ эпизоотической ситуации по ящуру в Республике Таджикистан в 2001-2012 гг

4.2. Изучение биологических свойств эпизоотических штаммов, выделенных в Таджикистане
4.2.1. Типирование и выявление вируса ящура из патологического материала с помощью ИФА
4.2.2. Изучение биологических свойств штамма вируса ящура типа А/Таджикистан/06/Нурабад
4.2.2.1. Культивирование вируса ящура типа А/Таджикистан/06/Нурабад
в клеточных культурах
4.2.2.2. Изучение антигенного родства штамма А/Таджикистан/06/Нурабад методом РСК
4.2.2.3. Изучение антигенного родства штамма А/Таджикистан/06/Нурабад в РМН
4.2.2.4. Изучение антигенного родства штамма А/Таджикистан/06/Нурабад в ИФА
4.2.2.5. Филогенетический анализ изолята вируса ящура типа А/Таджикистан/06/Нурабад
4.2.3. Биологические особенности эпизоотического штамма 0/Таджикистан/Т5 2/2
4.2.4. Биологические особенности эпизоотического штамма
Азия1/Таджикистан/2011/Шурабад
4.3. Серологические исследования по выявлению антител к неструктурным белкам вируса ящура у крупного рогатого скота и коз в Республике Таджикистан

5. ОБСУЖДЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
8. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
9. ПРИЛОЖЕНИЯ

Список сокращений
АЭЭИ - аминоэтилэтиленимин;
ГД 50/мл - генерализованная доза для морских свинок;
ГЛА - гидролизат лактальбумина;
ГБАО - Горно-Бадахшанская автономная область;
ИД50 - доза вируса, вызывающая заболевание ящуром у 50% зараженных животных;
ИФА - иммуноферментный анализ;
КББ - карбонат-бикарбонатный буфер;
КК - культура клеток;
КРС - крупный рогатый скот;
MPC - мелкий рогатый скот;
МСХ - министерства сельскохозяйство;
МЭБ - международной эпизоотический бюро;
ПСГК-30 - перевиваемая линия культуры клеток почки сибирского горного козерога;
ПЦР - полимеразная цепная реакция; , ,
РМН - реакция микронейтрализации;
PH - реакция нейтрализации;
РСК - реакция связывания комплемента;
РРП - районы республиканского подчинения;
СП - первичная культура клеток свиной почки;
ТЦД50/мл - 50% тканевая цитопатическая доза вируса;
ТАСХН - Таджикская академия сельскохозяйственных наук;

ФБР - фосфатно-буферный раствор;
ЦПД - цитопатическое действие вируса, на клетку;
IB-RS - перевиваемая культура клеток почки свиней;
3 ABC - неструктурные белки вируса ящура;
FAO - продовольственная и сельскохозяйственная организация ООН.

Таким образом, имеющиеся в литературе многочисленные данные по разностороннему изучению ИФА указывают на возможность ее широкого использования в ветеринарии для диагностики вируса ящура.
Проведение сравнительной оценки ИФА с различными серологическими тестами по разным критериям показывает его преимущества: высокая чувствительность, количественная оценка
результатов, возможность автоматизации процесса [5, 57].
Разные схемы проведения ИФА имеют как достоинства, так и недостатки. Выбор схемы анализа зависит от многих факторов в том числе от состава среды, в котором находится антиген, свойств фермента, используемого в качестве маркера и др.у
Исходя из этого, в вирусологии для определения антител чаще всего используют неррямой вариант и разные модификации конкурентных методов ИФА. Чувствительность их в 20-30 раз выше, чем реакции нейтрализации. В ряде случаев непрямой вариант используется для определения типа вирусов.
Для определения вирусов чаще всего используют простой двойной или сэндвич варианты. Эти модификации позволяют определять не только вирусы, но и их типовую принадлежность.
По мнению Hamblin и Armstrong (1985) двойной сэндвич вариант ИФА не имеет существенных преимуществ перед РСК при типировании вируса ящура в дфтозном материале.
Таким образом, анализ данной литературы по использованию ИФА в
вирусологии, свидетельствует о том,:?чтр этот метод широко используется

для определения антигенов вирусов в клиническом и патологическом материалах.
ИФА широко используется в изучении проблем, связанных с вирусом ящура. Здесь наиболее важными областями применения ИФА является типирование и субтипирование вируса ящура, изучение его антигенной структуры. «Сэндвич - анализ» представляет особую схему