Стабильность растений земляники садовой (Fragaria ananassa Duch.) после длительного хранения in vitro

• Автор: Рыжкова, Надежда Сергеевна
• Шифр специальности: 06.01.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 135 с. : ил.

Содержание:

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Коллекции растительных объектов in vitro

1Л Л. Пересадочные коллекции

1Л .2. Депонированные коллекции

1 Л.З. Использование методов криоконсервации для сохранения генетических ресурсов

1Л.ЗЛ. Использование низкотемпературных криобанков для длительного хранения генетической информации
1Л.4. Нерешенные проблемы, связанные с хранением растительных объектов в условиях in vitro

1.2. Генетическая стабильность растений при использовании культуры

in vitro
1.2.1. Сомаклональная изменчивость в культуре клеток, возможные причины ее возникновения
1.2.1.1. Генные мутации
1.2.1.2. Хромосомные аберрации
1.2Л.З. Изменения числа хромосом
1.2.1.4. Нарушение коррелятивных связей при изолировании тканей
от растения
1.2.1.5. Особенности исходного материала
1.2.1.6. Условия культивирования
1.2.1.7. Длительность субкультивирования
1.2.2. Использование сомаклональной изменчивости в селекции
1.2.3. Появление уклоняющихся форм в процессе микроклонального размножения земляники
1.3. Цель и задачи исследований
2. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3. МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТОВ

3.1. Состав и приготовление питательных сред
3.2. Соблюдение стерильных условий при операциях посадок и пересадок
3.3. Условия культивирования
3.4. Перевод микроразмноженных растений в нестерильные условия
3.5. Изучение фертильности пыльцы растений земляники
3.6. Учеты и наблюдения
3.7. Обработка результатов
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Влияние длительного хранения in vitro на пролиферирующую способность растений земляники
4.2. Поведение эксплантов земляники, прошедших этап длительного депонирования in vitro, на этапе укоренения
4.3. Влияние длительного хранения in vitro на приживаемость и частоту появления аномалий у растений-регенерантов земляники на этапе адаптации
4.4. Поведение растений земляники различных сортов после
длительного культивирования т vitro в полевых условиях
4.4.1. Вегетативная продуктивность растений в первый год высадки
4.4.2. Поведение растений во второй сезон вегетации
4.4.2.1. Учет генеративной продуктивности, определение сроков цветения и созревания плодов
4.4.2.2. Изучение фертильности пыльцы
4.4.2.3. Изучение урожайности
4.4.2.4. Изучение вегетативной продуктивности
4.4.2.5. Уклоняющиеся формы у растений земляники в полевых условиях, пестролистность и поражаемость грибными болезнями
5. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ СОДЕРЖАНИЯ КОЛЛЕКЦИЙ ЗЕМЛЯНИКИ IN VITRO
РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВ АНЫХ ИСТОЧНИКОВ
ПРИЛОЖЕНИЕ
Актуальность темы. В настоящее время биотехнология - важнейший инструмент внедрения научных достижений в производство. Исследование процессов жизнедеятельности на клеточном и молекулярном уровнях позволили создать необходимые предпосылки возникновения и быстрого развития современной биотехнологии и ее важнейших направлений -генетической и клеточной инженерии (B.C. Шевелуха, 2000).
Современная биотехнология охватывает широкий круг методов, отраслей и задач, объединенных в несколько крупнейших блоков. В частности, в растениеводстве можно выделить следующие направления: 1) микроклональ-ное размножение и освобождение от вирусов (Р. Boxus et al., 1984; R.A. Drew et al., 1986; B. Borkowska, 2001; Е.Д. Бондаренко, Н.И. Киссель, 2002); 2) создание новых форм растений с помощью методов генной инженерии (G.S. Warren, 1992; A.B. Поляков, 2002); 3) клеточная селекция с использованием сома-клональной изменчивости в культуре in vitro (В.М. Тюленев, 2000; JI.JI. Бун-цевич, В.В. Захарченко, 2002; Е.А. Гладков и др., 2003); 4) сохранение генетических ресурсов культурных и дикорастущих видов и форм растений (К.К. Kartha, 1984; L.A. Withers, 1995).
Использование методов клеточной и генной инженерии открывает большие возможности для генетической реконструкции организмов в желаемых для исследователей направлениях (А. Атанасов, 1993). Но гены, необходимые для таких инженерных манипуляций должны быть надёжно сохранены в виде банка генов. В связи с этим в практической селекции особое значение имеет сохранение генетически ценных образцов.
С другой стороны, для широкой селекционной работы по выведению новых сортов необходимо сохранение разнообразия видов, подвидов, рас и сортов культурных растений и их ближайших диких сородичей, которые могли быть использованы в качестве доноров ценных признаков (морозоустойчивости, зимостойкости, повышенной устойчивости к патогенам и другим неблагоприятным факторам).

каждые 20 дней. Особо отмечали экземпляры, имеющие различные отклонения. Учет биологической урожайности проводили по стандартной методике (Программа и методика ... , 1999). Определяли среднюю массу,
✓V-vпроцент поражения ягод серой гнилью, долю ягод крупнее 20 г, меньше 5 г в трех сборах. Оценку поражаемости листьев пятнистостями проводили во второй половине лета, в августе согласно стандартной методике (Программа и методика ... , 1999). При этом использовали шкалу, разработанную ВНИИР:
0 - отсутствие поражения;
1 - слабое поражение, не более 10 мелких или средних пятен на листе;
2 - среднее поражение: пятна занимают до 25 % поверхности листа, хорошо заметно спороношение;
3 - сильное поражение: крупные пятна, занимающие 26-50 % площади листа, спороношение обильное;
4 - очень сильное поражение: крупные пятна занимают свыше 50 % площади листа, спороношение обильное, лист отмирает.
Объем учитываемых растений во всех опытах составлял 25-30 экземпляров.
3.7. Обработка результатов
Результаты опытов обрабатывали с помощью программируемой ЭВМ типа МК-61 по специально разработанным программам (В.А. Потапов и др., 1997), а также пакета стандартных программ “Excel” на персональном компьютере PC “Athlon”. Математическую обработку осуществляли путем сравнения количественных показателей по критерию Стьюдента, процент укоренения и приживаемости, а также фертильности пыльцы - с помощью метода угла ср и дисперсионного анализа (H.A. Плохинский, 1970).