Обоснование приемов световой биотехнологии при клональном микроразмножении винограда

• Автор: Соболев, Андрей Александрович
• Шифр специальности: 06.01.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Новочеркасск
• Количество страниц: 218 с. : ил.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биотехнология как фактор развития сельского хозяйства

1.2 Оздоровление растений от хронических инфекций: необходимость, преимущества и недостатки методов
1.3 Возможности, модели и необходимые условия реализации клонального микроразмножения
1.4 Влияние светового излучения на растения винограда в условиях изолированной культуры

1.5 Сохранение генофонда винограда in vitro. Роль освещения при депонировании

1.6 Резюме анализа литературных данных

2 ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Изучение интенсивности излучения при клональном микроразмножении винограда

3.1.1 Исследование интенсивности излучения на этапе ввода эксплантов в культуру

3.1.2 Установление оптимальных параметров интенсивности освещения на этапе микрочеренкования
3.1.3 Оптимизация параметров интенсивности излучения на этапе адаптации и доращивания растений в условиях СУВР
3.2 Определение оптимальной продолжительности фотопериода
3.3 Изучение влияния синергетического эффекта интенсивности освещения и регулятора роста эмистим в предельно малых дозах на морфогенез винограда in vitro

3.3.1 Влияние интенсивности освещения и фиторегулятора эмистим на этапе ввода в культуру
3.3.2 Изучение влияния интенсивности освещения и эмистима на этапе укоренения побегов
3.3.3 Влияние малых доз интенсивности освещения и эмистима на этапе микрочеренкования побегов, сохраняющих апикальное доминирование
3.4 Исследование влияния на морфогенез спектрального состава света низкой интенсивности
3.4.1 Влияние качества света на регенерационную способность меристем
3.4.2 Выявление спектральной избирательной реакции на этапе микрочеренкования побегов
3.4.3 Изучение отзывчивости адаптированных растений на облучение разнокачественным светом
3.5 Минимализация роста растений при депонировании
3.6 Проверка качества оздоровленных растений
3.7 Экономическое обоснование оздоровления и клонального микроразмножения винограда
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ТЕРМИНОВ И СОКРАЩЕНИЙ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
"... Каждый луч солнца, не уловленный зелёною поверхностью поля, луга или леса, — богатство, потерянное навсегда и за растрату которого более просвещённый потомок когда-нибудь осудит своего невежественного предка”.
К. А. Тимирязев'
Для стабилизации и устойчивого развития отрасли виноградарства и виноделия РФ необходимо создание долговечных высокопродуктивных виноградников. Их закладка должна осуществляться сертифицированным по международным стандартам посадочным материалом с лучшими наследственными свойствами, оздоровленного от заболеваний хронического и системного характера.
На сегодняшний день наиболее надёжным и перспективным методом оздоровления растений является выделение апикальных меристем, регенерация из них пробирочных растений и дальнейшее клональное микроразмножение в условиях изолированной культуры.
В нашей стране данный метод разработан и успешно применяется в промышленных масштабах для ряда ценных сельскохозяйственных культур. Однако, применение этого прогрессивного способа оздоровления и ускоренного размножения растений значительно отстаёт от реальных потребностей виноградарства. Наиболее существенной причиной, сдерживающей его распространение, является отсутствие массового производства. В первую очередь данное явление можно объяснить низким уровнем материально-технической базы, которая в настоящее время устарела и морально, и физически. Но вместе с тем, и сама технология культивирования нуждается в усовершенствовании. Наряду с другими факторами оптимизации, огромная роль принадлежит световым воздействиям, роль которых в процессе производства безвирусного посадочного
'Тимирязев К.А. Земледелие и физиология растений. Растение и солнце// М.: Сельхозгиз, 1937.-С.85.

температур (1-10 °С, в зависимости от холодостойкости вида растений) при интенсивности освещения 4000-5000 лк.
Такого же мнения придерживается и Е. JI. Петрова (2003). При длительном хранении in vitro растений ежевики она рекомендует использовать пониженную положительную температуру (+2 °С) или совместное использование салициловой кислоты в концентрации 1 мг/л и низкой положительной температуры.
Н. В. Кухарчик, С. Э. Семенас и др. (2002) сохраняли растения ежевики без ежемесячной пересадки в бытовом холодильнике в течение шести-восьми месяцев. При этом количество хорошо сохранившихся регенерантов составляло 70-100%. Авторами не замечено существенных различий в степени сохранности растений на различных средах.
Э. В. Трускинов (1983) при хранении in vitro оздоровленной коллекции картофеля установил, что удлинению цикла культивирования способствует добавление в питательную среду ингибиторов роста, пониженная температура (2-5 °С) и клубнеобразование. При соблюдении этих условий образцы сохраняются в течение 1-3 лет. Коллекции же ягодных культур in vitro сохраняются как вегетирующие в условиях ограниченного роста при 2-5 °С, освещённости 1 клк, 16 часовом фотопериоде в течение одного-двух лет без переноса на свежие питательные среды (С. Е. Дунаева, Э. В. Трускинов и др., 2003).
О. И. Молканова, Е. М. Ветчинина и др. (2003) обеспечивали минимальный рост коллекций за счёт уменьшения минеральной основы питательной среды и изменения физических условий культивирования. По их мнению, оптимальным режимом хранения основной части коллекции является температура 3-5 °С. Для успешного сохранения регенерантов растений семейства Могасеае и Ranunculaceae необходимо добавлять в среду антиоксиданты. Создание оптимальных условий для сохранения коллекции сортов Syringa vulgaris L. (1/2 MS, 8 г/л маннита, 20 г/л сахарозы) позволяет сохранять жизнеспособность регенерантов на протяжении 30 месяцев без пересадки их на свежие питательные сре-