Влияние экзогенных мезенхимальных стволовых клеток плаценты человека на динамику некоторых патологических процессов ЦНС в эксперименте.

• Автор: Кониева, Алина Аланбековна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 117 с. : 37 ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АТФ Аденозинтрифосфат

ГСК Гемопоэтические стволовые клетки

ГЭБ Гематоэнцефалический барьер

мРНК Матричная рибонуклеиновая кислота

МРТ Магнитно-резонансная томография

МСК Мезенхимальные стволовые клетки

НСК Нейрональные стволовые клетки

ОРІМК Острое нарушение мозгового кровообращения

ПС Полная среда

РЧ-сигнал Радиочастотный сигнал

СВЗ Субвентрикулярная зона
СГЗ Субгранулярная зона
СК Стволовые клетки
CM Спинной мозг
СМА Средняя мозговая артерия
СМТ Спинно-мозговая травма
ТБСМ Травматическая болезнь спинного мозга
ЦНС Центральная нервная система
Шкала ВВВ Неврологической шкале Basso-Beattie-Bresnehan
Шкала BMS Неврологическая шкала для мышей Basso
ЭСК Эмбриональные стволовые клетки
АЕ Амниотический эпителий
AM Амниотическая мезодерма
a-SMA Гладкомышечный а-актин
BDNF Нейротрофный фактор головного мозга
bFGF Основной фактор роста фибробластов
cAMP Циклический аденозинмонофосфат
CD Кластер дифференцировки
CFU-f Колоние-формирующая единица фибробластоподобных клеток)
CM Мезодерма хориона
DAPI 4',6-диамидино-2-фенилиндол
DMEMF12 Смесь модифицированной по способу Дульбекко среды Игла и F12 в соотношении 1:1
DMSO Диметилсульфоксид
FBS Фетальная телячья сыворотка
EGF Эпидермальный фактор роста
EPO Эритропоэтин
FGF Фактор роста фибробластов
Fit Fms-подобная тирозинкиназа
GABA Гамма-аминомасляная кислота
GDNF Глиальный нейротрофический фактор
GFAP Глиальный фибриллярный кислый белок
hAEC Человеческие амниотические эпителиальные клетки
hAMSC Человеческие амниотические мезенхимальные стромальные

клетки
hBMC Человеческие клетки костного мозга
hCMSC Человеческие хориальные мезенхимальные стромальные клетки
hCTC Человеческие хориальные трофобластные клетки
HLA-I Главный комплекс гистосовместимости I класса
HLA-DR Главный комплекс гистосовместимосги II класса
hNT Нейроны из иммортализованной клеточной линии NT2, Полученной из человеческой тератокарциномы
hUCBC Человеческие клетки пуповинной крови
ICAM-1 Молекулы межклеточной адгезии
IGF Инсулин-зависимый фактор роста
IL-1(2,6) Интерлейкин-1 (2,6)
mNSS Modified Neurological Stroke Scale
MTT 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолиум бромид
NeuN Нейронспецифический ядерный белок
NGF Ростовой фактор нервов
NMDA-рецепторы Н-метил-О-аспартат-рецепторы
NSC/NPC Нейрональные стволовые/прогениторные клетки
NSE Нейронспецифичная энолаза
NT3 Нейротрофин
Oct-4 Октамер-связывающий белок
PAF Фактор активации тромбоцитов
PBS Фосфатно-солевой буфер
PECAM Молекулы адгезии тромбоцитов и эндотелия
PI Пропидиум иодид
RA Ретиноевая кислота
RARE Rapid Acquisition with Relaxation Enhancement
SCF Фактор стволовых клеток
SDF-1 Фактор хоуминга
SNAP Sensory nerve action potential
ТЕ Время эхо
TGF-ßl Трансформирующий фактор роста ßl
TNF Фактор некроза опухоли
TR Время повторения
VCAM-1 Васкулярная молекула клеточной адгезии
VEGF Васкулярный эндотелиальный фактор роста
VLA Очень поздний антиген

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Общие характеристики стволовых клеток
1.1.1. История открытия стволовых клеток
1.1.2. Определения и понятия биологии стволовых клеток
1.1.3. Ниши мулътипотентных стволовых клеток
1.2. Мезенхимальные стволовые клетки
1.2.1. Развитие концепции мезенхимальных стволовых клеток
1.2.2. Общие характеристики мезенхимальных стволовых клеток
1.2.3. Фенотипическая характеристика МСК
1.2.4. Дифференцировочный потенциал МСК in vitro
1.3. Плацентарные стволовые клетки
1.3.1. Происхождение плаценты в эмбриогенезе
1.3.2. Структура человеческой плаценты
1.4. Клеточная терапия заболеваний центральной нервной системы
1.4.1. Ишемический инсульт
1.4.1.1. Клеточная терапия ишемического инсульта
1.4.1.2. Потенциальные механизмы действия 42 трансплантированных стволовых клеток.
1.4.1.3. Клинические испытания клеточной терапии при 46 инсульте.
1.4.2. Травматическая болезнь спинного мозга
1.4.2.1. Клеточная терапия травмы спичного мозга
1.4.2.2. Клинические испытания трансплантации стволовых 56 клеток при травме спинного мозга.
Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Материалы
2.2. Выделение и культивирование мезенхимальных стволовых 59 клеток (МСК) из плаценты человека.
2.2.1. Меченис МСК магнитными микрочастицами
2.2.2i Оценка уровня пролиферации МСК, меченых магнитными
микрочастицами.

Вторым немаловажным фактором в восстановлении архитектуры и функций ЦНС после повреждения является своевременная медицинская помощь. Лечебные мероприятия, направленные на восстановление кровообращения и защиту тканей ЦНС от действия негативных факторов, ассоциированных с ишемическим или травматическим повреждениями, должны быть начаты в первые часы после возникновения такого повреждения, в течение так называемого «терапевтического окна». Однако для многих пациентов получение квалифицированной помощи в столь короткие сроки оказывается по техническим или иным причинам недоступным. Действия врача по стимуляции процессов регенерации также оказываются более эффективными при их своевременном проведении.
В связи с этим возникает необходимость разработки новых терапевтических подходов, направленных на усиление эндогенного нейрогенеза и дополнительную помощь организму в репарации структуры и функций мозга. Одним из наиболее перспективных направлений анатомического и функционального восстановления ЦНС после повреждения является использование методов регенеративной медицины, в частности, трансплантации стволовых, прогениторных или дифференцированных клеток (клеточная терапия). К настоящему моменту уже проведено множество экспериментальных работ по трансплантации эмбриональных, фетальных и взрослых стволовых клеток в различных моделях заболеваний ЦНС.
Ишемический инсульт.
Ишемический инсульт - клинический синдром, развивающийся вследствие критического снижения кровоснабжения участка мозга в определенном артериальном бассейне, что приводит к ишемии с формированием очага острого некроза мозговой ткани - инфаркта головного мозга. При этом в зоне инфаркга происходит массовая гибель нейронов, астроцитов и олигодендроцитов [92].
Наиболее часто ишемический инсульт развивается вследствие атеросклероза артерий головного мозга и шеи, поражения мозговых артерий при гипертонической болезни и сахарном диабете или кардиогенной эмболии. Не смотря на обилие патологических состояний, вызывающих инсульт,, патогенез его однотипен и