Молекулярно-генетические и клеточные факторы, ассоциированные с активным долголетием

• Автор: Смирнова, Татьяна Юрьевна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 165 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

1. ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность проблемы

1.2. Цель и задачи исследования

1.3. Основные положения, выносимые на защиту

1.4. Научная новизна полученных результатов

1.5. Теоретическое и практическое значение работы

1.6. Публикации

1.7. Апробация работы

1.8. Финансовая поддержка работы
1.9. Вклад автора
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Долгожительство как модель изучения процесса старения
2.2. Генетические полиморфизмы
2.2.1. Ген ангиотензин-превращающего фермента
2.2.1.1. Структура и функции ренин-ангиотензиновой системы
2.2.1.2. Г/Т) полиморфизм гена АСЕ
2.2.2. Гены серотониновой системы
2.2.2.1. Роль серотониновой системы в организме
2.2.2.2. Ген серотонинового рецептора HTR2A
2.2.2.3. Ген серотонинового транспортера
2.3. Теломерная теория старения
2.3.1. Строение и функции теломер
2.3.2. Существующие методы определения длины теломер
2.3.2.1. Анализ рестрикционных фрагментов теломер (TRF-анализ)
2.3.2.2. Метод защитной гибридизации (HPА)
2.3.2.3. Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH)
2.3.2.4. Праймирование in situ (PRINS)
2.3.2.5. Количественная полимеразная цепная реакция (кПЦР)
2.3.3. Связь длины теломер с возрастом
2.3.4. Возрастные и половые различия в длинах теломер
2.3.5. Связь длины теломер с патологическими состояниями
2.3.6. Корреляция длин теломер со стрессом
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Характеристика групп
3.2. Методы
3.2.1. Экстракция ДНК из лимфоцитов периферической крови
3.2.1.1. Метод фенол-хлороформной экстракции ДНК
3.2.1.2. Выделение ДНК набором Protrans DNA Box
3.2.1.3. Спектрофотометрический анализ
3.2.2. Исследование генетического полиморфизма
3.2.2.1. Методика определения ID полиморфизма в гене АПФ
3.2.2.2. Методика определения 102Т>С полиморфизма гена HTR2A

3.2.2.3. Методика определения І/О полиморфизма гена 5-НТТ
3.2.2.4. Электрофорез
3.2.2.5. Статистическая обработка результатов генетического исследования
3.2.3. Анализ длины теломер
3.2.3.1. Измерение длины теломер методом кПЦР
3.2.3.2. Измерение длины теломер методом проточной цитофлуориметрии (Ыолу-ИБН)
3.2.4. Метод факторного анализа
3.2.5. Материалы историй болезни
3.2.6. Методики психологического тестирования
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Полиморфизм генов
4.1.1. Ген АСЕ
4.1.2. Г ен серотонинового рецептора ШТ12А
4.1.3. Ген серотонинового транспортера 5-НТТ
4.1.4. Факторный анализ результатов генетического исследования и данных анамнеза лиц пожилого возраста
4.2. Длины теломер
4.3. Факторный анализ результатов генетического исследования, длин
теломер и данных анамнеза лиц пожилого возраста
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
Список работ, опубликованных по теме диссертации
Список цитируемой литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АД - артериальное давление
АПФ - ангиотензин-превращающий фермент (АСЕ)
АСЕ - ангиотензин-превращающий фермент (angiotensin-converting enzyme) AT I - ангиотензин I AT II - ангиотензин II
ГГНС - гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система ГСК - гемопоэтические стволовые клетки ДКМП - дилатационная кардиомиопатия ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота дНТФ - дезоксирибонуклеозидтрифосфаты
ДЭ - дисциркуляторная энцефалопатия (хроническая ишемия мозга)
ИБС - ишемическая болезнь сердца
кПЦР - количественная полимеразная цепная реакция
МОА - моноаминоксидаза
мРНК - матричная (информационная) рибонуклеиновая кислота ПААТ - полиакриламидный гель
ПДРФ - анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РАС - ренин-ангиотензиновая система
ФАД - флавинадениндинуклеотид
ХСН - хроническая сердечная недостаточность
ЦБ - цереброваскулярная болезнь
ЦНС - центральная нервная система
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
102Т>С - замена тимина на цитозин в 102 положении гена серотонинового рецептора
5-НТ - рецепторы серотонина (5-гидрокситриптамина)
5-НТТ - ген серотонинового транспортера

(Pezawas et al., 2005; Hariri et al., 2002). Кроме того, у носителей S-аллеля наблюдается неадекватный ответ на терапию селективными ингибиторами обратного захвата серотонина (Silva et al.). Носители S-аллеля характеризуются повышенной невродизацией, лабильностью и скоростью нервных процессов (Hariri et al., 2003), что делает их менее устойчивыми к внешним воздействиям, таким как стресс, усталость и т.п. (Трушкин и др. 2010).
Носительство генотипа LL, приводящее к более быстрому удалению свободного 5-НТ из межклеточного пространства, может играть роль фактора, облегчающего адаптационные реакции ЦНС на физические нагрузки, требующие выносливости, что подтверждается повышенной встречаемостью генотипа LL среди спортсменов (Langfort et al., 2006; Sysoeva et al., 2009). В то же время полиморфизм 5-НТТ по-разному влияет на развитие центрального утомления у мужчин и женщин. Менее выносливы к продолжительной умственной нагрузке юноши с дефицитом серотонина в синаптической щели (генотип LL) и девушки с избытком серотонина (генотип SS) (Малюченко и др., 2009). Это, вероятно, связано с тем, что в 5-НТ-нейронах экспрессируется мРНК рецептора эстрогена и таким образом эстроген может регулировать транскрипционную активность 5НТТ (Amin et al., 2005; Shively et al., 2004).
Инсерционно-делеционный полиморфизм гена 5-НТТ интенсивно исследовался на ассоциацию с суицидальным поведением в различных фенотипических группах. Общий анализ 12 исследований выявил достоверную ассоциацию S-аллеля с суицидальным поведением (Anguelova et al., 2003) . Лин с соавт. (Lin et al., 2004), проведя мета-анализ 18 исследований, установили ассоциацию S-аллеля с суицидальным поведением у лиц с психическими расстройствами, а также с суицидом, совершенным насильственным способом. Полученные результаты позволяют предположить, что данный полиморфизм
ассоциирован с определенным вариантом (субфенотипом) суицидального