Участие стволовых клеток в репаративной и физиологической регенерации почки

• Автор: Йылмаз, Татьяна Сергеевна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 114 с. : 15 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1.ВВЕДЕНИ Е

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Нефрон, образующие его клетки и их маркёры

2 Л. 1. Эндотелиальные клетки клубочка

2Л.2. Подоциты

2Л.З. Мезангиальные клетки

2 Л .4. Канальцевый эпителий

2.2. Репаративная регенерация

2.2.1. Клеточная пролиферация и методы её изучения

2.3. Репаративная регенерация почки
2.4. Участие неповреждённых клеток почки в репарации
нефрона при остром повреждении
2.4.1. Регенерация клубочка при остром гломерулонефрите
2.4.1.1. Острый гломерулонефрит
2.4.1.2. Репаративный ответ клеток клубочка на модели
острого гломерулонефрита
2.4.2. Регенерация эпителия канальцев при остром повреждении
2.4.2.1. Острая почечная недостаточность
2.4.2.2. Регенеративный ответ на модели острой
почечной недостаточности
2.5. Участие неповреждённых клеток почки в репарации
нефрона при хроническом повреждении
2.5.1. Хронический гломерулонефрит
2.5.2. Хроническое повреждение клубочка
2.5.2.1. Изменения эндотелиальных клеток
2.5.2.2. Изменения мезангиальных клеток
2.5.3. Хроническое повреждение эпителия канальцев
2.5.3.1. Причины повреждения канальцев
2.6. Резидентные стволовые клетки и их участие в
регенераторном процессе
2.6.1. Свойства резидентных стволовых клеток
2.6.2. Резидентная стволовая клетка почки
2.6.2.1. Локализация, выделение и участие в регенерации
резидентных стволовых клеток почки
2.7. Стволовые клетки костного мозга и их участие
в регенерации почки
2.7.1. Гемопоэтическая стволовая клетка
2.7.1.1. Источники получения гемопоэтических
стволовых клеток
2.7.2. Мезенхимальная стволовая клетка
2.7.3. Участие клеток костного мозга в репаративной
регенерации почки

2.7.3.1. Гемопоэтические стволовые клетки в восстановлении канальцевого эпителия после повреждения
2.7.3.2. Мезенхимальные стволовые клетки в восстановлении канальцевого эпителия после повреждения
2.7.3.3. Стволовые клетки костного мозга в восстановлении
клеток клубочка
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Объекты исследования
3.1.1. Характеристика нефробиоптатов
3.1.1.1. Морфологическое исследование нефробиоптатов
больных хроническим гломерулонефритом
3.1.2. Лабораторные животные
3.1.2.1. Забор пуповинной крови
3.1.2.2. Выделение мононуклеаров путем седиментации в
градиенте плотности фиколла
3.1.2.3. Подсчёт количества мононуклеаров и
определение их жизнеспособности
3.1.2.4. Забор материала и приготовление
гистологических срезов тканей
3.2. Гистологические и иммуногистохимические методы исследования
3.2.1. Депарафинирование и регидратация парафиновых срезов
3.2.2. Окрашивание по Ван-Гизону
3.2.3. Окрашивание парафиновых срезов биоптатов почек больных хроническим гломерулонефритом антителами к РСИА и а-ГМА
3.2.4. Окрашивание парафиновых срезов биоптатов почек больных хроническим гломерулонефритом антителами к
СИ34 и СИЗ1
3.2.5. Окрашивание парафиновых срезов почки крысы антителами
к НЬА-АВС
3.3. Оценка выраженности экспрессии СИ34 и СОЗ1
клетками клубочка
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Морфологический анализ биоптатов почек больных
хроническим гломерулонефритом
4.1.1. Экспрессия СИ34 и СИ31 в нефробиоптатах больных
хроническим гломерулонефритом
4.1.2. Морфологические проявления гломерулонефрита
4.1.2.1. Изучение присутствия СИ34(+)/СИЗ 1(-)-клеток в клубочках при различных значениях индекса воспалительной
активности гломерулонефрита
4.1.2.2. Изучение присутствия СИ34(+)/СИ31(-)-клеток в клубочках
при различных значениях индекса склероза клубочков
4.1.2.3. Изучение изменения индекса склероза клубочков при различных значениях индекса воспалительной активности гломерулонефрита

4.1.2.4. Изучение изменения уровня мочевины крови больных хроническим гломерулонефритом при различных
значениях индекса воспалительной активности заболевания
4.1.3. Изучение пролиферативной активности и миофибробластической трансдифференцировки клеток
клубочков у больных хроническим гломерулонефритом
4.1.3.1. Экспрессия РСНА в нефробиоптатах больных
хроническим гломерулонефритом
4.1.3.2. Изучение пролиферативной активности клеток клубочков при различных значениях индекса воспалительной
активности гломерулонефрита
4.1.3.3 Изучение пролиферативной активности клеток клубочков
при различных значениях индекса склероза клубочков
4.1.3.4. Экспрессия а-ГМА в нефробиоптатах больных
хроническим гломерулонефритом
4.1.4.4. Изучение миофибробластической трансдифференцировки клеток клубочков при различных значениях индекса
воспалительной активности гломерулонефрита
4.1.3.5. Изучение миофибробластической трансдифференцировки клеток клубочков при различных значениях
индекса склероза клубочков
4.1.4. Сопоставление появления СЭ34(+)/СЭ31(-)-клеток в клубочках с пролиферацией и миофибробластической
трансдифференцировкой клеток клубочков
4.2. Изучение миграции и распределения
трансплантированных мононуклеаров пуповинной крови человека в интакных почках крыс
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
7. БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

вместо усиленной пролиферации неповреждённых клеток, происходящей при остром повреждении, в условиях хронической альтерации начинает преобладать миофибробластическая трансдифференцировка клеток. Всё эти изменения постепенно и неизбежно ведут к развитию нефросклероза и хронической почечной недостаточности.
2.6. Резидентные стволовые клетки и их участие в регенераторном процессе
Стволовая клетка - это незрелая клетка, способная к физиологическому самообновлению, и дающая начало потомкам, развивающимся в специализированные клеточные типы [155, 161, 234].
Различают несколько типов стволовых клеток, и прежде всего -эмбриональные и взрослые стволовые клетки. Самой ранней стволовой клеткой является тотипотентная зигота, из которой формируются все зародышевые и внезародышевые ткани [46]. По мере развития зиготы клетки начинают специализироваться и формируют в бластоцисте кластер клеток - внутреннюю клеточную массу, или эмбриональные стволовые клетки. Эмбриональные клетки являются плюрипотентными, т.е. способными дифференцироваться в клетки трёх зародышевых листков, из которых образуются все клеточные типы взрослого организм. Из этого следует, что клетки внутренней клеточной массы - это родоначальницы резидентных стволовых клеток всех органов [46].
О существовании взрослых (тканевых, резидентных) стволовых клеток в таких органах, как скелетная мышца, костный мозг, желудочно-кишечный тракт, роговица, где они необходимы для непрерывного тканеобразования, известно уже давно.
2.6.1. Свойства резидентных стволовых клеток
По классическим представлениям, для взрослых стволовых клеток любого органа характерны следующие свойства [48]:
1. Высокий пролиферативный потенциал и интенсивная способность к самоподдержанию - свойства, необходимые для осуществления гомеостаза ткани, к которой они принадлежат;