Сравнительная характеристика мезенхимальных клеток пульпы молочного зуба и костного мозга: фенотип и первичная оценка возможности применения в тканевой инженерии кости.

• Автор: Вахрушев, Игорь Викторович
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 89 с. : 10 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:

Г. 1. Тканевая инженерия костной ткани: основные принципы и область

применения

1.2! Источники клеточного материала для остеорегенеративной

терапии

1.2.1. Эмбриональные стволовые клетки

1.2.1.1 . История ;изучения эмбриональных' стволовых,клеток

1.2.1.2. О возможности клинического применения эмбриональных СТВОЛОВЫХ клеток.:

1.2.2; Мезенхимальные стволовые клетки
1.2.2.1'. История изучения мезенхимальных стволовых клеток
1.2.2!2. Источники мезенхимальных стволовых клеток
1.2.2.3. Характеристика мезенхимальных стволовых клеток
1.2.2.4. Мультипотентность мезенхимальных стволовых клеток
1.2.2.5. Попытки применения мезенхимальных стволовых клеток в
терапии костных дефектов
Г.2.2:6. Основания для поиска альтернативных источников мезенхимальных,стволовых клеток
1.2.3; Мезенхимальные клетки пульпы зуба
1.23.1. История изучения мезенхимальных клеток пульпы зуба
1.2.3.2. Свойства;мезенхимальных клеток пульпы зуба
1.2.3.3. Мультипотентность мезенхимальных клеток пульпы зуба
1.2.4. Мезенхимальные клетки пульпы молочного зуба
1.2.4.1. Мультипотентность мезенхимальных клеток пульпы молочного зуба
1.2.4.2. Остеоиндуктивный потенциал мезенхимальных клеток
пульпы молочного зуба
1.2.5. Клиническое применение мезенхимальных клеток пульпы зуба
1.3. Скэффолды, применяемые в тканевой инженерии кости:
1.3.1. История создания скэффолдов для тканевой инженерии кости
1.3.2. Биодеградируемые полимеры
1.3.2.1. Полиэстеры
1.3.2.2. Прочие биодеградируемые полимеры
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Культуры.клеток
2.2. Изготовление полилактидных скэффолдов
2.3. Заселение скэффолдов клетками
2.4'. Проточнаячдитофлуориметрия
2.5. Остеогенная дифференцировка
2.6. Адипогенная дифференцировка
2.7. Исследование активности щелочной фосфатазы
2.8. Иммуноцитохимическое окрашивание
2.9. Получение и обработка цифровых изображений
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Морфология полученных культур клеток
3.2 Цитофенотипические профили МСК костного мозга и МК пульпы молочного зуба
3.3. Оценка способности клеток к дифференцировке в адипоциты
3.4. Оценка способности клеток к дифференцировке в остеобласты
3.5. Изменение уровня!Экспрессии остеонектина клетками в процессе остеогенной дифференцировки
3.6. Изменение уровня активности щелочной фосфатазы в клетках в процессе остеогенной дифференцировки
3.7. Культивирование МСК костного мозга и МК пульпы молочного
зуба на полилактидных скэффолдах
3.8. Изменение уровня экспрессии остеокальцина МК пульпы

молочного зуба в процессе остеогенной дифференцировки на
полилактидных скэффолдах
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. МК пульпы молочного зуба и МСК костного мозга обладают сходной морфологией и фенотипом, соответствующим мультипотентным мезенхимальным стромальным клеткам
4.2. Культура МК пульпы молочного зуба содержит прогениторные клетки, обладающие остеогенным потенциалом
4.3. МК пульпы молочного зуба сохраняют остеогенный потенциал при культивировании на полилактидном скэффолде в составе
тканеинженерного комплекса
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

мышечную ткань. Остеоиндуктивные материалы стимулируют недифференцированные стволовые клетки или остеопрогениторные клетки к дифференциации в остеобласты благодаря особому химическому составу, рельефу поверхности, а также выделению биоактивных молекул' в процессе распада [91].
Одной из функций тканеинженерных конструкций, применяемых для замещения костных дефектов, является поддержание-механических свойств кости в зоне повреждения в период восстановления. Следовательно, импланты должны обладать достаточной прочностью и устойчивостью к износу при' продолжительных нагрузках. И, безусловно, они должны быть нетоксичными.
1.3.1. История создания скэффолдов для тканевой инженерии кости.
На, протяжении XX столетия выбор доступных материалов для тканевой инженерии определялся их наличием в других индустриях. Хирурги-пионеры имплантологии использовали в создании вживляемых конструкций, материалы, успешно применявшиеся на тот момент в различных областях промышленности: химической, энергетической,
аэрокосмической и других.
Так как внутренняя среда человеческого организма является сильным корродирующим агентом, одним из первых требований, предъявляемых при отборе материалов для замещения костных дефектом, стала максимальная инертность, что должно предотвращать коррозию и выделение ионов и других частиц из имплантированного материала. В результате, первое поколение имплантов состояло из легко доступных в то время материалов, отвечавших этим требованиям. Механическим свойствам при отборе материалов также уделялось большое внимание.