Морфофункциональная организация печени крыс при введении прооксиданта-параквата

• Автор: Сомова, Татьяна Юрьевна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 83 с. : 28 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Морфофункциональная организация печени
1.2. Морфофункциональная организация клеточного ядра
1.3. Митотический цикл
1.4. Роль перекисного окисления липидов в физиологии
и патологии клетки
1.5. Регенерация. Способы, виды, клеточные источники
1.6. Физиологические механизмы регенерации печени
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования и модель эксперимента
2.2. Электронно-микроскопические исследования
2.3. Методы морфометрического анализа
2.4. Цитофотометрические исследования ДНК
2.5. Методы статистического анализа
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ЗЛ.Морфофункциональная организация генатоцитов контрольных
самцов
3.2. Морфофункциональная организация гепатоцитов крыс через
12 часов после введения параквата
3.3. Морфофункциональная организация гепатоцитов крыс через
1 сутки после введения параквата
3.4. Морфофункциональная организация гепатоцитов крыс через
2 суток после введения параквата
3.5. Морфофункциональная организация гепатоцитов крыс через
5 суток после введения параквата
3.6. Морфофункциональная организация гепатоцитов крыс через
7 суток после введения параквата
3.7. Морфофункциональная организация гепатоцитов крыс через
11 суток после введения параквата
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования. В клинике внутренних болезней

заболевания печени являются наиболее распространенными видами патологии. Острые и хронические гепатиты чаще всего развиваются под влиянием инфекционных факторов и различных ксенобиотиков, в последнюю группу входят и лекарственные препараты (Полунина Т. Е., 1999; Sturgill М. G., Lambert G. Н., 1997; Kaplowitz N., 2004; Marti L., 2005; Bleibel W. et al., 2007).
При этом необходимо отметить, что большинство токсических гепатитов не имеют выраженной клинической картины, поэтому часто и не диагностируются (Sturgill М. G., Lambert G. Н., 1997; Gunawan В., Kaplowitz N., 2004).
Проблема регенерации тканей и органов является актуальной медикобиологической проблемой. К настоящему времени по этому вопросу в литературе накоплен большой фактический материал. Особенно детально изучались регенерационные процессы после частичной гепатэктомии. Показано, что синтез ДНК начинается через 18 — 24 часа после операции. Через 1 сутки содержание ДНК в печени превышало контрольные значения более чем в 2 раза. Наблюдается две волны митозов — через 26 - 36 часов и 45 - 48 часов. Характерной чертой является и значительное снижение доли двуядерных клеток, которое не восстанавливается даже через 2 недели после операции (Сидорова В. Ф., 1966; Саркисов Д. С., 1970; Романова JI. К., 1984; Tarla М. R. et al., 2006; Michalopoulos G. К., 2007).
Через 14 дней после операции средняя величина ядер и количество в них ДНК соответствует контрольным значениям, что является свидетельством завершении регенерационного процесса. Однако на 21-й день после частичной гепатэктомии количество ДНК вновь возрастает на 60 — 70 %, а площадь ядер на 50 — 60 %. Через 1 месяц после операции отмечается уменьшение количества диплоидных гепатоцитов и увеличение количества тетраплоидных гепатоцитов соответственно на 40 — 50 % и октаплоидных на 9,0 — 12,0 %. Через

2.2. Электронно-микроскопические исследования
Кусочки печени крыс фиксировали в 2,5 % растворе глутаральдегида на 0,1 М фосфатном буфере (pH 7,4) в течение 4 часов. После промывки постфиксировали 1 % раствором OsC>4 на том же буфере с 0,1 М сахарозой в течение 2-х часов, дегидратировали в спиртах восходящей концентрации и заливали в эпон-аралдит. Полутонкие срезы окрашивали толуидиновым синим, ориентируясь в блоке, выбирали в печени животных 2-ю зону печеночной дольки, которую в последующем и исследовали под электронным микроскопом.
Ультратонкие срезы толщиной 300 — 400 А нарезали на ультратоме. После окрашивания насыщенным водным раствором уранилацетата (Уикли Б., 1975) и цитратом свинца (Remolds Е. S., 1963), сетки напыляли углеродом просматривали в электронном микроскопе JEM — 7А (Япония).
2.3. Морфометрический анализ
Для общегистологического анализа и количественных изменений кусочки печени заливали в парафин по стандартной методике.
Исследование на светооптическом уровне проводили на полутонких срезах с помощью окулярной морфометрической сетки, которая была представлена тестовой системой, вмонтированной в окуляр микроскопа. Подсчитывали количество тест - точек, попавших при случайном положении на ту или иную структуру, и выражали в условных единицах (уел. ед.). Препараты исследовали с использованием иммерсионного объектива при конечном увеличении 900. В образцах печени животных определяли среднюю площадь ядра и цитоплазмы гепатоцитов, количество ядрышек в паренхиматозных клетках, количество двуядерных гепатоцитов, ядерно-цитоплазматические соотношения, а также количество непаренхиматозных клеток на стандартную площадь.