Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Домнина, Алиса Павловна
03.03.04
Кандидатская
2014
Санкт-Петербург
98 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
ОГЛАВЛЕНИЕ
1. СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
2. ВВЕДЕНИЕ
• Актуальность проблемы
• Цели и задачи исследования
• Научная новизна работы
• Теоретическое и практическое значение работы -
• Апробация работы
• Основные положения, выносимые на защиту
• История изучения мезенхимных стволовых клеток человека
• Основные характеристики эМСК
• Применение эМСК для регенеративной медицины на экспериментальных моделях
• Получение и культивирование эМСК
• Иммуноцитохимия
• Адипогенная дифференцировка
• Остеогенная дифференцировка
• Изучение кинетики роста
• Анализ активности 8А-(3-галактозидазы
• Кариотипический анализ
• Проточная цитофотометрия
• Криоконсервация эМСК
• Получение мононуклеаров костного мозга крысы
3. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
• Подготовка клеток к трансплантации
• Подготовка животных и проведение операции
• Подготовка гистологических срезов и морфометрический анализ
5. РЕЗУЛЬТАТЫ
• Получение и характеристика эМСК
• Трансплантация эМСК в матку псевдобеременным крысам
• Трансплантация ККМ в матку псевдобеременным крысам
6. ОБСУЖДЕНИЕ
7. ВЫВОДЫ
8. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
9. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Ю.СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
МСК - мезенхимные стволовые клетки
эМСК - эндометриальные стволовые клетки
ККМ - клетки костного мозга крысы
PBS - фосфатно-забуференный солевой раствор
БДК - большие децидуальные клетки
МДК - малые децидуальные клетки
ЭКО - экстракорпоральное оплодотворение
10. Получение мононуклеаров костного мозга крысы
В качестве стволовых ККМ использовали мононуклеарную фракцию ККМ (МККМ), выделенную из длинных костей конечностей крыс при помощи промывания костей раствором PBS. Для получения мононуклеарной фракции клеточную суспензию фракционировали в 63%-ном растворе Перколла, центрифугируя при 1500 g в течение 15 мин. Фракцию собирали и отмывали от Перколла в растворе PBS. Клетки считали в камере Горяева.
11. Подготовка клеток к трансплантации
Культивирование клеток эндометрия для подготовки к трансплантации производилось на среде DMEM/F12, содержащей 10 % бычьей эмбриональной сыворотки, 1 % смеси антибиотика и
антимикотика, 1 % глутамакса. На третий - четвертый день после пересева, когда культура клеток достигала монослоя, производилось снятие клеток с подложки и переведение их в суспензию. Для открепления клеток применялась смесь трипсина и EDTA. Поскольку ферментативное действие трипсина может повредить мембраны клеток, что привело бы к снижению их жизнеспособности при трансплантации, применялся трипсин низкой концентрации (0.05%) и на возможно более короткий срок (в пределах 5 мин). Для быстрого действия трипсина после удаления ростовой среды монослой клеток несколько раз промывался раствором PBS. После открепления клеток действие трипсина инактивировалось путем добавления к суспензии достаточного количества ростовой среды с 10% содержанием сыворотки. Для достижения гомогенности суспензия аккуратно пипетировалась. После приготовления одноклеточной суспензии производился подсчет клеток в камере Горяева. Далее культуральная среда заменялась раствором PBS.
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Лимфатический регион молочной железы в норме, при индуцированной опухоли, химиотерапии и фитокоррекции | Волкова, Мария Сергеевна | 2015 |
Гистофизиология слизистой оболочки тонкой и толстой кишки мышей Balb/c и C57Bl/6 при стрессорном холодовом воздействии | Абдулаева, Сабина Олеговна | 2012 |
Роль мембранного холестерина в регуляции механочувствительных ионных каналов и актинового цитоскелета | Чубинский-Надеждин, Владислав Игоревич | 2012 |