Молекулярно-генетические маркеры иммунного ответа при воспалительных заболеваниях органов женской репродуктивной системы

• Автор: Бурменская, Ольга Владимировна
• Шифр специальности: 03.03.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 214 с. : 35 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
1. ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ОРГАНОВ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ В ДИАГНОСТИКЕ ВАГИНИТОВ И ХРОНИЧЕСКОГО ЭНДОМЕТРИТА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1 КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЛИЗИСТОЙ ВЛАГАЛИЩА И ЭНДОМЕТРИЯ
1.1.1 Воспалительные заболевания слизистой влагалища: распространение, симптомы, этиология и факторы риска развития заболевания
1.1.2 Современные представления о микробиоценозе влагалища у женщин репродуктивного возраста
1.1.3 Хронический эндометрит: распространение, патогенез и факторы риска развития заболевания
1.2 МЕХАНИЗМЫ ИММУННОЙ ЗАЩИТЫ ПОЛОВЫХ ПУТЕЙ ЖЕНЩИН
1.3 КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВУЛЬВОВАГИНИТОВ И ХРОНИЧЕСКОГО ЭНДОМЕТРИТА
1.3.1 Диагностика воспалительных заболеваний нижних отделов органов женской репродуктивной системы
1.3.2 Клинико-лабораторная диагностика хронического эндометрита
1.4 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МАРКЕРОВ ЛОКАЛЬНЫХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ
1.4.1 Микроскопия мазков с подсчетом числа лейкоцитов
1.4.2 Метод лазерной проточной цитометрии с применением моноклональных антител
1.4.3 Метод иммуноферментного анализа

1.4.4 Технология мультиплексного иммуноанализа для исследования цитокинового профиля генов иммунного ответа
1.4.5 Методы иммуногистохимического исследования
1.4.6 Определение транскрипционных профилей генов
1.4.7 Полиморфизмы генов иммунной системы и современные методы их идентификации
1.4.8 Ассоциация полиморфизмов генов иммунной системы с предрасположенностью к развитию инфекционно-воспалительных заболеваний нижних отделов органов женской репродуктивной системы
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Материалы исследования
2.2 Объем исследования
2.3 Методы исследования
2.3.1 Определение состава микрофлоры влагалища
2.3.2 Определение транскрипционного профиля генов иммунного ответа
2.3.3 Определение замен одиночных нуклеотидов
2.3.4 Дополнительные клинико-лабораторные методы
2.4 Параметры, используемые для описания ПЦР в реальном времени
2.5 Нормировка
2.6 Статистика
2.7 Метод бинарной логистической регрессии
2.8 ЛОС-анализ
2.9 Характеристики диагностических тестов
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Разработка систем для оценки профиля экспрессии мРНК генов иммунной системы
3.1.1 Подбор праймеров и флуоресцентно-меченных проб
3.1.2 Проверка праймеров и зондов
3.1.3 Выбор референсных генов и разработка алгоритмов нормировки, оптимальных для оценки уровней экспрессии мРНК генов человека в тканях эндометрия и влагалища
3.1.4 Апробация метода исследования транскрипционных профилей на
образцах тканей эндометрия двух стадий менструального цикла
3.2 Прикладные аспекты идентификации молекулярно-генетических маркеров с использованием ПЦР в реальном времени
3.2.1 Воспалительные заболевания нижних отделов половых путей
3.2.1.1 Характеристика состава микробиоценоза влагалища небеременных женщин
3.2.1.2 Характеристика состава микробиоценоза влагалища беременных женщин
3.2.1.3 Типирование и количественная оценка лактобактерий
3.2.1.4 Транскрипционные профили генов иммунного ответа в соскобах отделяемого слизистой влагалища
3.2.1.5 Характеристика уровней представленности транскриптов генов иммунного ответа в соскобах отделяемого слизистой влагалища
3.2.1.6 Зависимость транскрипционных профилей от стадии менструального цикла
3.2.1.7 Сравнение транскрипционных профилей генов иммунной системы в клетках вагинальных соскобов у беременных и небеременных женщин
3.2.1.8 Особенности экспрессии мРНК генов иммунной системы в клетках вагинальных соскобов в норме, при вагините и БВ
3.2.1.9 Корреляция ЬасІоЬасіїиз іпегя с уровенем экспрессии генов
3.2.1.10 Разработка способа оценки локальной воспалительной реакции
3.2.1.11 Преимущества использования индексов и интегральной оценки локального воспаления
3.2.1.12 Сравнение предложенного способа оценки локальной воспалительной реакции с клиническими данными
собственных рецепторов, но, напротив, подавляет его, а также синтез рецепторов эстрадиола [59].
Данные литературы по экспрессии эстрогенового и прогестеронового рецепторов являются противоречивыми. Согласно данным Nikas G. в период имплантации содержание ESR1 в эндометрии повышается, при этом наибольшая концентрация ядерных рецепторов к эстрогенам характерна для конца поздней пролиферативной и начала секреторной фазы [231]. Овуляторный всплеск эстрогенов способствует наиболее высокой экспрессии ESR1 в эпителиальных клетках эндометрия в период имплантационного окна [293], что приводит к активной пролиферации эпителия [88] и способствует инвазии эмбриона.
Прогестерон является ключевым гормоном имплантации и элонгации беременности. Помимо участия в процессе инвазии эмбриона он участвует в процессах децидуализации фибробластов эндометрия и формировании железистого эпителия [316]. Экспрессия прогестероновых рецепторов в эпителии резко понижается в период имплантационного окна [293] и резко возрастает в строме эндометрия при децидуализации фибробластов [316].
В значительной степени результаты исследования могут зависеть от локуса взятия материала, в норме наиболее высокая концентрация рецепторов, обладающих сродством к стероидным гормонам, отмечается в эндометрии в области «дна» матки (верхняя стенка) и трубных углов. Количество рецепторов к гормонам уменьшается от «дна» к шейке матки [230].
Влияние гормонов на уровень экспрессии эстрогеновых и
прогестероновых рецепторов было изучено Tibbetts Т.А. и соавт. на мышах с
удаленными яичниками, которым экзогенно вводили гормоны [298]
отсутствии гормональной стимуляции высокий уровень экспрессии ESR1
отмечался в железистом эпителии и строме, высокий уровень экспрессии
PGR - в лгоминальном и железистом эпителии. При введении эстрогенов