Анализ генов MFN2, GDAP1 и NEFL у больных наследственными моторно-сенсорными нейропатиями из Республики Башкортостан

• Автор: Скачкова, Ирина Алексеевна
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 164 с. : ил.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Клиническая характеристика, эпидемиология и классификация

наследственных моторно - сенсорных нейропатий

1.2. Молекулярно - генетические основы наследственных моторно

сенсорных нейропатий

1.2Л. Генетические основы наследственных моторно - сенсорных нейропатий I типа (миелинопатий)

1.2ЛЛ. Миелинопатии, связанные с генами структурных

белков миелиновой оболочки

1.2Л .2. Миелинопатии, связанные с генами белков

регуляторов транскрипции

1.2.1.3. Миелипатии, связанные с генами внутриклеточных

белков шванновских клеток
1.2.2. Промежуточная форма наследственных моторно - сенсорных нейропатий
1.2.3. Генетические основы наследственных моторно - сенсорных нейропатий II типа (аксонопатий)
1.2.3.1. Аксонопатии, связанные с генами белков, участвующих
в формировании хондриома
1.2.3.2. Нейропатии, связанные с генами белков аксонального
цитоскелета
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал для исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Молекулярно - генетические методы исследования
2.2.1.1. Выделение геномной ДНК из периферической
крови

2.2.1.2. Полимеразная цепная реакция синтеза ДНК
2.2.1.3. Метод электофореза
2.2.1.4. Анализ конформационного полиморфизма однонитевой ДНК (ББСР - анализ)
2.2.1.5. Секвенирование
2.2.1.6. Рестрикционный анализ
2.2.2. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Анализ гена МРЫ2 у больных НМСН из Республики Башкортостан
3.1.1. Клиническая характеристика больных НМСН с мутациями в генеМЕ7У2
3.2. Анализ гена СЭАР1 у больных НМСН из Республики Башкортостан
3.2.1. Клиническая характеристика больных НМСН с мутациями в гене ЄР АРІ
3.3. Анализ генаЫЕРЬ у больных НМСН из Республики
• Башкортостан
3 -4. Оптимизация подходов ДНК - диагностики наследственных
моторно - сенсорных нейропатий у больных из Республики
Башкортостан
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Актуальность темы. Наследственные моторно-сенсорные нейропатии (НМСН), или болезнь Шарко-Мари-Тута (ШМТ) - это клинически и генетически гетерогенная группа наследственных заболеваний периферической нервной системы, проявляющихся прогрессирующей слабостью и атрофией дистальных мышц нижних, и, на более поздних стадиях, - верхних конечностей, деформацией стоп и кистей, расстройством чувствительности. В основе заболевания лежат дегенеративные изменения миелиновой оболочки или аксонов двигательных и чувствительных волокон периферических нервов и спинномозговых корешков, ведущие к снижению скорости передачи нервных импульсов. На основании электронейромиографических исследований (ЭНМГ), позволяющих идентифицировать характер поражения нейронов, НМСН подразделяются на два основных типа - демиелинизирующий (НМСН I типа), характеризующийся низкой скоростью проведения возбуждения по периферическим нервам (менее 38 м/сек), и аксональный (НМСН II типа) - с нормальной или незначительно сниженной скоростью проведения нервного импульса (более 38 м/сек). Наряду с двумя основными типами НМСН, выделяют еще несколько редких типов заболевания, сопровождающихся некоторыми дополнительными клиническими признаками [Dyck et al., 1994]. В свою очередь, каждый из этих типов заболевания включает в себя целый ряд отдельных генетических форм НМСН, различающихся по типу наследования, характеру клинических проявлений,
электронейромиографическим и морфогистохимическим особенностям. На сегодняшний день, картировано более 50 ДНК-локусов, идентифицировано более 35 генов, мутации в которых обусловливают развитие различных форм НМСН

Белки теплового шока HSP27 и HSP22 состоят из а - кристаллического домена, находящегося между N - терминирующим доменом, содержащим WDPF - мотив и вариабельным С - терминирующим хвостом. Большинство мутаций, вызывающих данные формы заболевания, находится в а -кристаллическом домене, необходимом для выполнения многих функций Hsp белка [Kolb et al., 2010]. В результате нарушения работы HSP генов снижается активность шаперонов, образуются скопления, в которые могут быть вовлечены нейрофиламенты, происходит разрушение цитоскелета и нарушение аксонального транспорта, разрыв взаимодействия с другими членами Hsp семейства и предрасположенность к апоптозу и атрофии.
Наряду с описанными выше генами, мутации в которых приводят к развитию НМСН II, и функциональная роль которых в развитии данной формы НМСН считается более или менее определенной, существует и ряд генов, связанных с этим типом заболевания, для которых четкие пути развития нейропатологии пока остаются недостаточно понятными.
Так, форма НМСН 2С, впервые описанная Dyck с соавт. в 1994 году в двух семьях, как оказалось, обусловлена мутациями в гене TRPV4, который позиционирован как ген катионных каналов. Этот ген локализован на длинном плече 12 хромосомы в позиции 24.1, но в настоящее время точной идентификации этого гена нет. Он является частью большого семейства катион - селективных каналов [Dyck et al., 1994; Yoshioka et al., 1996; Klein et al., 2011]. Мутации в этом гене уменьшают проводимость ионных каналов и, предположительно, снижают поступление кальция в клетку [Landoure et al., 2010]. НМСН 2С форма была первоначально описана как аутосомно -доминантная аксональная нейропатия, ассоциированная с нарушениями дыхания (диафрагмальная и межреберная слабость) и парезом голосовых связок [Landoure et al., 2010; Deng et al., 2010]. На электромиограмме выявляются признаки аксонального поражения [Fecto et al., 2011].