Изучение роли гена Hr в работе ВМР- и WNT-зависимых генных регуляторных сетей в цикле волосяного фолликула мыши

• Автор: Головатенко-Абрамов, Павел Кириллович
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 133 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Цели и задачи работы

Часть I. Обзор литературы

Глава 1. Постнатальный морфогенез волосяных фолликулов у мыши

Глава 2. Ключевые генные регуляторные сети, контролирующие морфогенез волосяных фолликулов

2.1. Генная регуляторная сеть БНН

2.2. Г енная регуляторная сеть ’АТМТ

2.3. Г енная регуляторная сеть ВМР

2.4. Взаимодействие VNT- и ТОЕ-Р-зависимых механизмов в индукции морфогенеза волосяных фолликулов у мыши
2.5. Роль специфических антагонистов VNT- и ВМР-зависимых генных сетей в обеспечении взаимодействия этих генных сетей
Глава 3. Ген Нг и его мутантные аллели как инструмент для изучения генетического контроля развития волоса
3.1. Мыши, мутантные по гену Нг, как модель наследственной алопеции
3.2. Молекулярные принципы действия гена Нг и илейотропные эффекты его мутантных аллелей
Часть П. Экспериментальная часы»
Г лава 4. Материалы и методы
4.1. Животные
4.2. Выделение ДНК и определение мутантного аллеля гена Нг

4.3. Изучение экспрессии мРНК BMP- и WNT-зависимых генов в коже мышей генотипов Hr1' 1+ и Нг"/Нгг
4.4. Изучение регенерационной способности кожи мышей генотипа HrhrIHrh
4.5. Исследование действия препарата NOGGIN на скорость роста волос у мышей СВА
4.6. Статистическая обработка данных
Глава 5. Определение мутантного аллеля гена Hr
Глава 6. Изучение влияния мутации в гене Hr на
пространственно-временной паттерн транскрипционной активности BMP- и WNT-зависимых генов в коже мыши
6.1. Экспрессия мРНК гена Втр2
6.2. Экспрессия мРНК гена Idl
6.3. Экспрессия мРНК гена Mitf
6.4. Экспрессия мРНК гена Sostdcl 77 Глава 7. Изучение влияния мутации в гене Hr на
регенерационную способность кожи мыши
Глава 8. Изучение влияния экзогенного препарата NOGGIN на скорость роста волос у мыши
Обсуждение
Заключение
Выводы
Список литературы
Приложения
Приложение 1. Выравнивание последовательностей нормального гена Hr и продуктов ПЦР, полученных с праймерами Hr-I6-F/Pmv43-R и HLTR-F/HLTR-R
Приложение 2. Результаты измерений количества мРНК генов Втр2, Idl, Mitf Sostdcl в коже мышей
Приложение 3. Результаты измерений количества мРНК гена Idl у мышей после подкожного введения препарата NOGGIN

Сверхэкспрессия Nog, находящегося под промотором гена Msx-2, связана также с активацией и эктопической экспрессией Lef-I в ВФ (Kulessa et al., 2000). Как ранее было показано, ВМР2, ВМР4 и LEF-1 экспрессируются в прекортикальных клетках матрикса луковицы ВФ, и сайты связывания LEF-1 присутствуют в определенных генах волос-специфичных кератинов (Lyons et al., 1990; Zhou et al., 1995; Dale, Wardlc, 1999; Kulessa et al., 2000). ß-катенин, ближайшая мишень LEF-1, также экспрессируется в матриксе луковицы ВФ в коже новорожденных мышей дикого типа. Более того, морфогенез ВФ у Те/Т-нокаутных мышей также останавливается на стадии, предшествующей формированию сгержня волоса (van Genderen et al., 1994). Таким образом, есть основания считать, что в контроле дифференцировки клеток матрикса луковицы ВФ существует взаимодействие между сигнальными путями BMP и WNT/ß-катенин/LEF-1. Это согласуется с результатами, полученными на других моделях, свидетельствующих о том, что сигнализации BMP и Wnt играют противоположные роли в ходе развития (Baker et al., 1999).
Все вместе, эти данные указывают на то, что сигнальный путь WNT/ß-KaTeHHH/LEF-1 является важной мишенью регуляции BMP. Избирательное вовлечение антагониста BMP NOGGIN в процесс индукции вторичных ВФ подтверждает концепцию, в соответствии с которой сигнальные пути EDAR и LEF-1 на определенных стадиях развития функционируют и регулируются независимо друг от друга (Headon, Overbeek, 1999; Tucker et al., 2000). Более того, разные сигнальные механизмы необходимы для формирования первичных и вторичных ВФ, что позволяет провести параллель с морфогенезом разных структур, развивающихся из одного орган-специфичного эпителия. Сходно, морфогенез зубов различных типов зависит от дифференциальной активности активина ACTIVIN-ßA и активности ряда регуляторов транскрипции, в частности, DLX1 и DLX2 (Thomas et al., 1997; Ferguson et al., 1998).