Действие малых доз инкорпорированного плутония-239 на частоту анеуплоидии в соматических клетках человека

• Автор: Васильев, Станислав Анатольевич
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 140 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Прямое и непрямое действие ионизирующего излучения

1.2. Ионизирующее излучение и анеуплоидия

1.2.1. Аномальные сегрегационные события и методы их детекции

1.2.1.1. Механизмы возникновения анеуплоидии

1.2.1.2. Методы регистрации анеуплоидии

1.2.2. Анеугенное действие ионизирующего излучения

1.2.2.1. Анеугенное действие ионизирующего излучения на модельных тест-системах

1.2.2.2. Хромосомоспецифичность анеугенного действия ионизирующего излучения

1.2.2.3. Факторы, модифицирующие влияние ионизирующего излучения на частоту анеуплоидии
1.2.2.4. Анеугенное действие ионизирующего излучения
на человека in vivo
1.2.2.5. Анеугенные и кластогенные повреждения как возможный маркер для выделения групп индивидов с повышенным риском развития онкологической патологии
1.3. Цитогенетические эффекты инкорпорированного плутония
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал
2.2 Методы исследования
2.2.1 Приготовление препаратов двухъядерных цитокинез-блокированных лимфоцитов периферической крови человека
2.2.2. Получение центромеро-специфичных ДНК-зондов
2.2.3. Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH)

2.2.4. Оценка частоты аномальных сегрегационных событий и
образования микроядер
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Оценка влияния инкорпорированного плутония на частоту хромосомного нерасхождения и отставания
3.1.1. Частота анеуплоидных ядер, возникающих в результате аномальной сегрегации хромосом
3.1.2. Анализ межгрупповых различий по частоте аномальной сегрегации хромосом
3.1.3. Межхромосомная вариабельность возникновения анеуплоидии... 75 в норме и при воздействии инкорпорированного плутония-239..
3.2. Оценка влияния инкорпорированного плутония на частоту потери целых хромосом и их фрагментов
3.3. Оценка зависимости частоты регистрируемых аномалий от активности инкорпорированного плутония и от возраста индивидов
3.4. Возможная связь между механизмами кластогенного и анеугенного действия ионизирующего излучения
3.4. Формирование групп индивидов с повышенным риском развития онкологической патологии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений
АЭС - Атомная электростанция Бк - беккерель Гр-Грей
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота Зв - Зиверт нКи - нанокгори
ПО - Производственное объединение СХК - Сибирский химический комбинат ФГА - фитогемагглютинин Эв - электрон-вольт
ЭДТА - Этилендиаминтетрауксусная кислота
CREST - синдром со следующим набором симптомов: Calcinosis -обызвествление, Raynaud's phenomenon - синдром Рейно, Esophageal dysmotility - нарушение моторики пищевода, Sclerodactyly склеродактилия, Teleangiectasia - телеангиэктазия.
CytB - цитохалазин В
dUTP - дезоксирибоуридинтрифосфат
FISH - флуоресцентная in situ гибридизация
LET (ЛПЭ) - linear energy transfer (линейная передача энергии)
МпС— центромеро-негативные микроядра МпС+ — центромеро-позитивные микроядра OR - odd ratio (отношение шансов)
SDS - sodium dodecyl sulfate

Таблица 2 - Анеугенное действие ионизирующего излучения как средового фактора на человека по результатам различных исследований.
Источник Когорта Метод Доза Значимые отличия с контролем
Ohtaki et al., 1994 Пострадавшие при взрыве в Хиросиме Метафазный анализ В среднем 200 мЗв Нет
Thierens et al., 1999 Работники АЭС FISH с панцентромерными ДНК-зондами 10-104 мЗв Нет
Natarajan et al., 1991 Пострадавшие при аварии в Гоянии Метафазный анализ, FISH хромосомы 1, 2, 8, 19 200-7000 мЗв Анеуплоидия по хромосоме 1, дицентрики
Sari-Minodier et al., 2002 Работники радиографических установок FISH с панцентромерными ДНК-зондами 17,4-117 мЗв МпС-
Sari-Minodier et al., 2007 Работники госпиталей FISH с панцентромерными ДНК-зондами 0-86,2 мЗв Микроядра
Thierens et al., 2000 Работники госпиталей FISH с панцентромерпыми ДНК-зондами В среднем 11,25 мЗв МпС+
Chang et al., 1999 Жители домов с повышенным содержанием б0Со FISH с ианцентромерными ДНК-зондами 14-1493 м3 в Микроядра, МпС+, МпС-
Kryscio et al., 2001 Работники урановых рудников FISH с панцентромерными ДНК-зондами - Пег
Назаренко, Тимошевский, 2005 Работники ядерно- химического производства FISH, хромосомы 7, 11, 12, 16, X, Y, 150-1650 мЗв Гипо- и гипердипло- идия
Ramirez et al., 1997 Женщины с опухолями щитовидной железы FISH с панцентромерными ДНК-зондами 100-150 мКи Микроядра, МпС+, МпС-
Примечание: МпС- - центромеро-негативные микроядра, МпС+ -центромеро-позитивные микроядра.
При цитогенетическом анализе метафазных пластинок лимфоцитов
' периферической крови пострадавших в результате радиационной аварии в

Гоянье (Бразилия), где в сентябре 1987 года произошел выброс , радиоактивного 137Сэ, отмечалась повышенная частота анеуплоидных по