Изучение особенностей положения хромосом 6, 12, 18 и X в ядрах мезенхимных стволовых клеток в зависимости от направления дифференцировки и сроков культивирования

• Автор: Вольдгорн, Яна Иосифовна
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 127 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВАС - бактериальная искусственная хромосома Bgp - билиарный гликопротеин Cbfal - фактор ядра альфа-1

DAPI - флуоресцентный краситель 4, 6-диамино-2-фенилиндол

DMSO - диметилсульфоксид

EGF - эпидермальный фактор роста

FGF - фактор роста фибробластов

FISH - флюоресцентная гибридизация in situ

FSP27 - жир-специфичный ген

GDF3 - фактор роста и дифференцировки

GLUT4 - мембранный переносчик глюкозы

HGF - фактор роста гепатоцитов

HIF-l,0a - индуцируемый гипоксией фактор-1,0а
F1LA - антиген тканевой совместимости
FISA - хромосома Homo sapiens
IGF1 - инсулиноподобный фактор роста
LCL - лимфобластная клеточная линия
NANOG - гомеобоксный транскрипционный фактор Nanog
ОСТ4 - Octamer-4, транскрипционный фактор
OPN - остеопонтин
PDGF - тромбоцитарный фактор роста
РЕРСК - фосфоенолпируват карбоксилаза
SCD1 - стерол-СоА дезатураза
Sir - группа генов регуляторов сайленсинга
SSC - натриевый цитратный буфер
TGF-ІЗЗ - трансформирующий фактор роста бета
VEGF - эндотелиальный фактор роста сосудов
Wnt - сигнальный путь в животной клетке
A.destillata — дистиллированная вода

БА - болезнь Альцгеймера
ВКМ - внеклеточный матрикс
ГКГС - главный комплекс гистосовместимости
ГСК - гемопоэтические стволовые клетки
ДА - дисперсионный анализ
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
КМ Б - костный морфогенетический белок
КМЦ - кардиомиоцит
МСК - мультипотентные мезенхимные стромальные клетки
ПТГ - паратиреоидный гормон
РНК - рибонуклеиновая кислота
ТЭС - сыворотка крови телячья
ФБ - фосфатный буфер
ХТ - хромосомные территории
цАМФ - циклический аденозинмонофосфат
ЭСК - эмбриональные стволовые клетки
ЯПК - ядерный поровой комплекс

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГЛАВА I.ВВЕДЕНИЕ
1.1 .Актуальность проблемы
1.2.Цель и задачи исследования
1.3.Научная новизна
1.4.Теоретическая и практическая значимость
1.5.Положения, выносимые на защиту
1.6. Апробация работы
1.7. Личное участие автора в получении результатов, изложенных в диссертации
1.8.Публикаци и
1.9.Структура и объем диссертации
ГЛАВА 2.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. История изучения хромосом в интерфазном ядре
2.2. Понятие о хромосомных территориях (ХТ)
2.3. Возможные механизмы образования хромосомных территорий
2.4. Расположение ХТ в ядре
2.5. Роль ХТ в регуляции активности генов
2.6. Влияние активности генов на положение ХТ
2.7. ХТ и эволюция
2.8. Роль ХТ в развитии заболеваний
2.9. ХТ в стволовых клетках
2.10. Общая характеристика МСК
2.11. Дифференцировочный потенциал МСК
2.12. Применение МСК в медицине
2.13. Адипогенная дифференцировка
2.14. Остеогенная дифференцировка
2.15. Культивирование МСК и проблемы биобезопасности
ГЛАВА 3 .МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
данные и об экспериментах in vivo, в которых было показано, что прекультивированные МСК костного мозга после пересадки в миокард дифференцировались в кардиомиоциты, образуя щелевые контакты [8]. В эксперименте на крысах была показана положительная роль МСК в восстановлении сердечной ткани после имитации инфаркта миокарда. В сердце крысам имплантировали МСК костного мозга на подложке из фиброина шелка и гиалуроновой кислоты. Иммунных реакций на имплантат не наблюдалось. В группах имплантации наблюдалось эффективное восстановление ткани миокарда и значительно снижался апоптоз в зоне инфаркта. Также было отмечено увеличение неоваскуляризации и стимуляция секреции различных паракринных факторов, например, VEGF [26].
МСК, как и вспомогательные клетки (типа эндотелия, макрофагов, лимфоцитов, стромальных механоцитов), способны секретировать многочисленные цитокины, ростовые факторы и создавать необходимое микроокружение для прогениторных клеток [82].
Возможно использование МСК и при котрансплантации с гемопоэтическими стволовыми клетками для поддержания кроветворения и при недостаточном количестве ГСК. Использование МСК в данном случае повышает эффективность трансплантации. В мультицентровых исследованиях показано, что внутривенное введение 1,0-5,0x106 МСК, культивированных в течение 4-7-ми пассажей, приводит к более быстрому приживлению ГСК [2].
Особая роль МСК в лимфопоэзе, в частности, в положительной селекции Т-лимфоцитов делает возможной аллогенную трансплантацию МСК без сопутствующей иммуносупрессии. В экспериментах in vivo при аллогенной трансплантации МСК и их дифференцировке не отмечалось каких-либо иммунологических реакций отторжения при отсутствии иммуносупрессии. Вместе с тем в некоторых работах указывается на