Функциональная активность рибосомных генов при детских аллергозах

• Автор: Стабровская, Наталия Викторовна
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Курск
• Количество страниц: 220 с.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структура и локализация рибосомных генов у человека

1.2. Функциональная активность рибосомных генов в норме и при различных патологиях человека
1.3. Распространенность, классификация, этиология и патогенез некоторых аллергических заболеваний у детей: бронхиальной астмы, аллергического ринита и атопического дерматита

1.3.1. Бронхиальная астма

1.3.2. Аллергический ринит

1.3.3. Атопический дерматит

Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы исследования

2.2. Методы исследования
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава III. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИССЛЕДУЕМЫХ ВЫБОРОК
3.1. Характеристика выборки родителей
3.2. Характеристика выборки детей
3.2.1. Особенности антенатального и раннего постнатального периодов развития детей
3.2.2. Особенности постнатального периода
3.2. Показатели функциональной активности рибосомных генов при аллергопатологии
3.3. Многомерный анализ
3.4. Обсуждение
Глава IV. ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
4.1. Характеристики родителей детей, больных бронхиальной астмой
4.2. Характеристика детей, больных бронхиальной астмой

4.2.1. Особенности антенатального и раннего постнатального периодов развития детей с бронхиальной астмой
4.2.2. Особенности постнатального периода развития детей с бронхиальной астмой
4.2.3. Особенности клинического течения бронхиальной астмы
4.2.4. Функциональная активность рибосомных генов при бронхиальной астме у детей
4.3. Особенности течения бронхиальной астмы в зависимости от уровня функциональной активности рибосомных генов
4.4. Обсуждение
Глава V. ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ АЛЛЕРГИЧЕСКИМ РИНИТОМ
5.1. Характеристика родителей детей, больных аллергическим ринитом
5.2. Характеристика детей, больных аллергическим ринитом
5.2.1. Особенности антенатального и раннего постнатального периодов развития детей с аллергическим ринитом
5.2.2. Особенности постнатального развития детей с аллергическим ринитом
5.2.3. Особенности клинического течения аллергического ринита
5.2.4. Функциональная активность рибосомных генов при аллергическом рините у детей
5.3. Особенности течения аллергического ринита в зависимости от уровня функциональной активности рибосомных генов
5.4. Обсуждение
Глава VI. ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ
6.1. Характеристика родителей детей, больных атопическим дерматитом.
6.2. Характеристика детей с атопическим дерматитом
6.2.1. Особенности антенатального и раннего постнатального периодов развития детей с атопическим дерматитом

6.2.2. Особенности постнатального периода развития детей с
атопическим дерматитом
6.2.3. Особенности клинического течения атопического дерматита у детей
6.2.4. Функциональная активность рибосомных генов при атопическом дерматите у детей
6.3. Особенности течения атопического дерматита в зависимости от уровня функциональной активности рибосомных генов
6.4. Обсуждение
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЛИТЕРАТУРА
ПРИЛОЖЕНИЯ
Микроскопирование препаратов проводилось с помощью микроскопа «ZEISS» (увеличение окуляра 10, увеличение объектива 90).
Получение цитогенетических препаратов проводили с помощью микрометода из лимфоцитов периферической крови человека [92]. Сама процедура проводилась в специальном боксовом помещении по следующей рабочей схеме. В каждый стерильный культуральный флакон вносилось 0,6'мл цельной гепаринизированной крови, далее 0,1 — 0,15 мл ФГА. Через 1-2 минуты, после наступления агглютинации, во флакон добавлялось 6,0 мл среды RPMI-1640, смешанной с раствором глютамина и витаминами, и 1,5 мл сыворотки крупного рогатого скота. Флаконы с культуральной смесыо плотно закрывались стерильными резиновыми пробками, встряхивались и помещались в термостат при 37° G сроком на 72 часа.
Обработка культур лимфоцитов и приготовление из них препаратов метафазных хромосом осуществлялись с применением ряда последовательных методических процедур: колхицинизации, гипотонизации культур, фиксации клеток смесью метилового спирта с уксусной кислотой, нанесении клеточной, взвеси на предметные стекла [92].
Колхицин добавлялся за 1,5-2 часа до начала фиксации в конечной концентрации 0,5 мкл/мл. По окончании инкубации на 72 часе после стимуляции ФЕА культуральная смесь из каждого флакона сливалась в чистые маркированные центрифужные пробирки и подвергалась, центрифугированию в течение 10 минут при 1000 оборотах в минуту. Затем удалялась надо-садочная: жидкость, осадок ресуспендировался и к нему добавлялся предварительно нагретый до 37°С гипотонический раствор (0,55% раствор КС1). Гипотонизация проводилась в термостате в течение 30 минут. Далее клетки центрифугировались, удалялась надосадочная жидкость, осадок ресуспендировался и подвергался фиксации. В качестве фиксирующей смеси: использовался этанол и ледяная уксусная?кислота в соотношении 3:1. Первая фиксация проводилась при температуре - 10°С в течение 20 минут. Затем фиксатор сменялся-еще 2 раза с промежуточным центрифугированием. Показателем