Влияние микробного фермента литиказы на развитие экспериментального кандидозного вагинита

• Автор: Сачивкина, Надежда Павловна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 117 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Цель и задачи исследования

Научная новизна

Практическая значимость

Положения, выносимые на защиту

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы
2.1.1. Коллекция микроорганизмов
2.1.2. Характеристика продуцентов литиказы
2.1.3. Питательные среды
2.1.4. Тест — системы
2.1.5. Реагенты
2.1.6. Биообъекты
2.1.7. Оборудование
2.2. Методы
2.2.1. Определение активности литиказы
2.2.1.1. Определение литического действия литиказы по отношению к
С.albicans по модифицированному методу J. Scott и Schekman R
2.2.1.2. Определение фунгицидного и фунгистатического
действия литиказ ы
2.2.1.3. Определение фунгицидного и фунгистатического действия литиказы методом серийных разведений в жидкой питательной среде
2.2.1.4. Определение жизнеспособности Candida albicans после
обработки литиказой
2.2.2. Оценка влияния литиказы на Candida albicans, наблюдаемое при электронной микроскопии
2.2.3. Определение способности дрожжеподобных грибов адгезироваться
на эпителиоцитах влагалища
2.2.4. Коадгезия лактобацилл к дрожжеподобным грибам
2.2.5. Определение влияния литиказы на способность дрожжеподобных грибов фагоцитироваться
2.2.5.1. Реакция фагоцитоза с перитонеальными макрофагами мышей
in vitro
2.2.5.2. Реакция фагоцитоза с альвеолярными макрофагами крыс in vitro
2.2.6. Методы изучения индукции морфогенеза С. albicans
2.2.7. Определение протеиназной активности С. albicans
2.2.8. Статистическая обработка полученных данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Получение литиказы
3.1.1. Выделение и очистка литиказы из культуральной жидкости Cellulomonas cellulans АС-
3.1.2. Оценка острой токсичности полученного фермента литиказы
3.2. Действие литиказы на биообъекты
3.2.1. Литическое действие фермента на дрожжеподобные грибы
3.2.2. Влияние литиказы на Candida albicans, наблюдаемое при электронной микроскопии
3.2.3. Изменение адгезивных свойств С. albicans после обработки литиказой
3.2.4. Коадгезия лактобацилл к дрожжеподобным грибам, обработанным литиказой

3.2.5. Влияние литиказы на способность Candida albicans фагоцитироваться
3.2.5.1. Реакция фагоцитоза с перитонеальными макрофагами мышей
3.2.5.2. Реакция фагоцитоза с альвеолярными макрофагами крыс in vitro
3.2.6. Факторы индукции морфогенеза C.albicans
3.2.7. Влияния ингибитора протеиназы - контрикала на морфогенез
C.albicans
3.2.8. Влияние литиказы на морфогенез C.albicans
3.3. Изучение терапевтического действия литиказы при моделировании
кандидозной инфекции у мышей
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

После достижения ЮО'% клиренса, у животных вызывали вторичную инфекцию повторным введением возбудителя без предварительного введения эстрадиола. Было показано, что перенесённый КВ вызывает защиту от повторного заражения.
Данных о разработке модели рецидивирующего КВ без повторного введения ДПГ в литературе не представлено.
В настоящее время ряд зарубежных и отечественных авторов придерживаются следующей схемы моделирования инфекции для испытания антимикотических препаратов [1,172]: самок мышей в возрасте 8-10 недель поддерживают в состоянии течки подкожными инъекциями эстрадиола бензоата (25 мг/кг) 5 дней до и 2 дня после интравагинального заражения бластоспорами С. albicans (5 х 104) в ЗФР. В первую неделю развития КВ животных разделяют на опытную и контрольную группы. Опытной группе вводят интравагинально испытуемые препараты местного действия в количестве 0,03 мл по следующим схемам:
1. однократная доза за 1 ч до инфицирования (профилактика);
2. и/или многократное введение на 2-й, 4-й, 6-й дни и т.д. после инфицирования до полной санации.
Эффективность препаратов оценивают по клиренсу кандид (методом Сабуро), и выражают как процентное уменьшение количества /I) II по сравнению с контрольными животными (инфицированными, но получавшими плацебо).
Приведённые выше варианты моделирования КВ позволяют изучать острую инфекцию, но не предусматривают моделирование хронического течения КВ.
Из приведённых данных литературы следует, что проблема лечения рецидивирующего КВ выходит за рамки поиска новых антимикотиков, мишенью для которых являются стеролы. Альтернативой этого направления может быть создание препаратов, действующих на иные морфофункциональные структуры, имеющие новые точки приложения. Из