Анализ иммуномодулирующего действия экстракта слюнных желез клещей Ixodes persulcatus

• Автор: Зырина, Екатерина Витальевна
• Шифр специальности: 03.02.03, 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Оболенск
• Количество страниц: 125 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1 Л. Иксодовые клещи — переносчики трансмиссивных заболеваний

1.2. Особенности функционирования слюнных желез иксодовых клещей

1.3. Морфологические изменения в месте питания клещей

1.4. Влияние компонентов слюны клещей на развитие иммунных реакций хозяина

1.5. Специфическая противоклещевая резистентность

1.6. Другие факторы, влияющие на противоклещевой иммунитет

1.7. Перспективы создания антиклещевых вакцин
1.8. Особенности взаимодействия клегц-возбудитель-хозяин
1.8.1. Адаптации возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов в организме клеща
1.8.2. Адаптации возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов в организме теплокровного хозяина
1.9. Borrelia burgdorferi и развитие инфекционного процесса..
1.10. Использование иммунологических методов в исследованиях иммунопатогенеза иксодовых клещевых боррелиозов
1.11. Диагностика иксодовых клещевых боррелиозов
1.11.1. Актуальность разработки иммунодиагностического клеточного теста
1.12. Заключение по обзору литературы
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 2. АНАЛИЗ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТА СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ IXODES PERSULCATUS НА ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫЕ КЛЕТКИ МЫШЕЙ ЛИНИИ BALB/C
2.1. Характеристика экстракта слюнных желез
2.2. Влияние экстракта слюнных желез /. persulcatus на жизнеспособность иммунокомпетентных клеток
2.3. Оценка in vitro влияния экстракта слюнных желез на макрофаги мышей
2.4. Оценка in vitro воздействия экстракта слюнных желез
I. persulcatus на клетки адаптивного иммунитета интактных
мышей
ГЛАВА 3. ФОРМИРОВАНИЕ У МЫШЕЙ УСТОЙЧИВОСТИ К ЗАРАЖЕНИЮ БОРРЕЛИОЗОМ ПОСЛЕ ПОВТОРНЫХ НАПУСКОВ КЛЕЩЕЙ
3.1. Оценка in vitro формирования у мышей иммунного ответа на экстракт слюнных желез
3.2. Оценка in vivo антиклещевого иммунитета у мышей
3.3. Устойчивость мышей к заражению возбудителями боррелиоза
через укус клеща
ГЛАВА 4. ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА КЛЕЩЕЙ
I. PERSULCATUS SALP15 И ИССЛЕДОВАНИЕ ЕГО ИММУНОГЕННЫХ, ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ И ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ
4.1. Получение и характеристика по чистоте рекомбинантного белка

4.2. Изменение активности генов слюнных желез I. persulcatus в зависимости от стадии питания клещей
4.3. Исследование in vitro иммуногенных и цитотоксических свойств рекомбинантного белка Salp 15 клещей/, persulcatus

4.4. Опсонизация рекомбинантным белком Ба1р 15 I. регяикаШх поверхности боррелий
4.5. Оценка протективного действия анти-Ба1р 15-антител в модели инфицирования боррелиями через зараженных клещей
ГЛАВА 5. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АНТИГЕНОВ БОРРЕЛИЙ В КЛЕТОЧНЫХ ТЕСТАХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАРАЖЕНИЯ БОРРЕЛИОЗОМ МЫШЕЙ НА РАННЕЙ СТАДИИ БОЛЕЗНИ
5.1. Получение и характеристика по чистоте рекомбинантных белков ОЬрАиВВК
5.2. Определение специфической активации лимфоцитов антигенами боррелий
5.3. Определение цитокинового профиля инфицированных мышей
5.4. Определение изменений в уровне синтеза цитокинов Т-хелперами, при их специфической активации антигенами боррелий.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,
СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
БЛАГОДАРНОСТИ

иммунитета положительно коррелирует и с интенсивностью кожной реакции на клещевые Аг [4].
Следует отметить, что лишь некоторые клещевые Аг стимулируют формирование защитных Ат [4].
Наряду с защитным действием Ат [16; 36; 56; 58; 171] большое значение имеет лимфоцитарное звено иммунитета. В опытах с трансфузией иммунных лимфоцитов морских свинок была доказана большая устойчивость к D. andersoni и I. ricinus, чем при переливании одной только сыворотки крови [16; 101; 102; 202]. Так же в экспериментах in vitro [96; 177; 206] при культивировании лимфоцитов от животных, сенсибилизированных питанием на них клещей, в присутствии экстракта слюнных желез происходил бластогенез клеток, а стимулированные КонА лимфоциты продуцировали значительное количество TNF-a и GM-CSF [95]. Максимальные значения определяли у клеток, полученных в течение повторных экспозиций.
1.6. Другие факторы, влияющие на противоклещевой иммунитет
Приобретенная противоклещевая резистентность в большинстве случаев не исключает возможности повторного питания клещей и препятствует развитию на хозяине лишь части напавших на него паразитов [4]. Значительно влияние могут оказывать как факторы внешней среды, например, климатические колебания, так и физиологическое состояние, возраст, пол животных. Степень приобретенной резистентности может быть различной у разных видов хозяев [7]. Поэтому во многих случаях трудно вычленить воздействие на питание и последующее развитие клещей собственно иммунных механизмов от не связанных с ним факторов окружающей среды и организма хозяина [4]. Специфичность противоклещевого иммунитета у разных хозяев отмечается многими исследователями [38; 72; 121; 139; 141; 162].