Характеристика микробиоценоза кишечника животных при инвазии Balantidium coli

• Автор: Карпеева, Евгения Александровна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Ульяновск
• Количество страниц: 109 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика бактериального сообщества кишечника в условиях нормоценоза

1.2. Дисбиотические нарушения бактериального профиля кишечника

1.3. Простейшие Balantidium coli как дестабилизирующий фактор микробоценоза кишечника

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект, материалы и методы исследований

2.1.1. Объект исследования

2.1.2 Питательные среды

2.1.3. Методы исследований
2.1.4. Оценка структуры кишечного микробоценоза
2.1.5. Определение межмикробных взаимодействий
2.1.6. Методы статистического анализа результатов
2.2. Результаты исследований и их обсуждение
2.2.1. Исследование паразитоценоза кишечника свиней
2.2.2. Характеристика выделенных штаммов Balantidium coli
2.2.3. Характеристика качественного и количественного состава микробоценоза кишечника свиней
2.2.4. Межмикробные взаимодействия в кишечнике свиней при инвазии
Balantidium coli
Заключение
Выводы
Список использованных литературных источников

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
В' настоящее время хорошо известна важная роль нормальной микробиоты пищеварительного тракта в целом, и кишечника в частности, в создании резистентности макроорганизма к колонизации патогенными и условно-патогенными микроорганизмами, действию токсинов, ферментов защиты и агрессии, формировании иммунного гомеостаза и витаминного баланса, участии в метаболических и ферментативных процессах, антимутагенной активности (Красноголовец, 1989; Куваева, Ладодо, 1991; Воробьев, 1997; Акбаева, 1998; Шендеров, 1998; Ардатская, Дубинин, Минушкин, 2001; Ильина, 2008). В свою очередь, микробиота кишечника является' индикатором состояния макроорганизма и целый ряд факторов приводит к изменению ее качественного и количественного состава. При снижении резистентности макроорганизма представители микробиоценоза кишечника могут проявлять свою патогенность (Шендеров, 2000; Потатуркина-Нестерова с соавт., 2004; Ильина, 2006; Красноперова, 2009).
Среди условно-патогенных микроорганизмов, способствующих возникновению и поддержанию дисбиотического процесса в кишечнике животных, помимо бактерий и грибов, значительное место занимают кишечные простейшие, которые в небольшом количестве встречаются в кишечнике практически всех здоровых животных (Walker, 2005). Естественным резервуаром возбудителей многих паразитарных инвазий, в том числе балантидиаза, являются домашние животные - свиньи.
В последние годы в России особенно напряженной стала эпидемиологическая обстановка по паразитарным болезням животных. В стране ежегодно официально регистрируется более 1,3 миллионов больных различными паразитозами сельскохозяйственных животных, среди которых отмечается рост заболеваемости кишечными протозоозами (Романенко, 2001). Особый интерес вызывает балантидиаз, который очень широко распространен у свиней. По данным ряда авторов зараженность свиней балантидиями

составляет от 21 % до 100 % , так в Великобритании - 36 %, в Египте - 70 %, в Болгарии от 14 до 81 %, в Греции - 74,6 %, в Новой Гвинее - 100 % (Жордания, 1971; Хамцов, 1972; Рочкене, 1977). Носителями балантидий могут быть также крысы, мыши, дикие кабаны, обезьяны (Kobayashi et al., 1995; Hussain et al., 1997; Кипайкин, Рубашкина, 2002).
В настоящее время достаточно хорошо изучены вопросы биологии балантидий, пути и способы заражения ими животных, дана общая оценка инвазированности разных хозяев (Рочкене, 1977; Лаптева, 1970; Лысенко, 1993). Однако, практически отсутствуют данные о состоянии микробиоценоза кишечника животных при инвазии Balantidium coli, об особенностях межмикробных взаимодействий при формировании паразитоценоза. Малочисленность и фрагментарность работ, дающих представление о стабильности адаптационных и функциональных возможностях кишечника, не отражают характер изменения его микробного статуса при балантидиазе, а также не направлены на изучение нарушений паразитоценоза в целом. В этой связи сравнительное изучение состояния микробиоценоза кишечника свиней при инвазии балантидиями и оценка характера взаимоотношений микроорганизмов, определяющего тяжесть заболевания, представляют научный и практический интерес.
Цель работы — изучить качественный и количественный состав микробиоценоза кишечника свиней и оценить характер межмикробных взаимодействий при инвазии Balantidium coli.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
1. Исследовать структуру паразитоценоза кишечника свиней города Ульяновска и Ульяновской области, оценить частоту встречаемости В. coli.
2. Изучить биологические свойства выделенных балантидий в условиях in vivo и in vitro.

2.1.3. Методы исследования
Методы изучения протоценоза
Изучение паразитоценоза проводили в соответствии с Методическим указанием МУК 4.2.735-99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов», утвержденных главным государственным санитарным врачом РФ 25.02.1999 г.
Регламент лабораторной диагностики кишечных простейших представлен на рисунке 3.
Микроскопический метод изучения простейших
Диагностику кишечных протозоозов: балантидиаза, лямблиоза, амебиаза, кокцидиоза (изоспороза) проводили путем микроскопии нативных и окрашенных мазков и после формалин-эфирного осаждения по Ритчи в модификации Аллена-Ридли. Размеры простейших определяли при помощи окуляр микрометра (Сергиев, 1992).
Для приготовления нативных препаратов отбирали неоформленные фекалии, участки слизи или прожилки крови в кале. Затем, на предметное стекло пипеткой наносили каплю физиологического раствора и/или раствора Люголя, в которых эмульгировали биологический материал. Далее мазок накрывали покровным стеклом. При необходимости с целью предотвращения высыхания препарата покровное стекло окантовывали вазелиновым маслом. Приготовленные препараты микроскопировали (х10х40). Дополнительное окрашивание препаратов производили по Романовскому-Гимзе и железным гематоксилином по Гейденгайну. При помощи данного метода выявляли вегетативные формы паразитирующих простейших, для чего анализировали строение, размеры и тип их движения, что имеет важное значение при видовой идентификации простейших, особенно жгутиковых.