Значение лабораторной диагностики краснушной и парвовирусной инфекций в период элиминации краснухи

• Автор: Антипова, Анастасия Юрьевна
• Шифр специальности: 03.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 145 с. : ил.

ОГДАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА Е ВИРУС КРАСНУХИ И ПАРВОВИРУС В19; КЛИНИКОЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТРИСТИКА И ДИАГНОСТИКА ОБУСЛОВЛЕННЫХ ИМИ ИНФЕКЦИЙ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Вирус краснухи и парвовирус В19; их тератогенное действие

1.2. Характеристика эпидемического процесса краснухи

и парвовирусной инфекции в РФ и в мире

1.3. Лабораторная диагностика краснушной

и парвовирусной инфекций

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ГЛАВА 3. АНАЛИЗ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ И ОХВАТ ПРОФИЛАКТИЧЕСКИМИ ПРИВИВКАМИ ПРОТИВ КРАСНУХИ В СЕВЕРО-ЗАПАДНОМ ФЕДЕРАЛЬНОМ ОКРУГЕ В ПЕРИОД С 2002 ПО 2011 гг
3.1. Характеристика заболеваемости краснухой на территориях
СЗФО за десятилетний период
3.2. Уровень охвата первичной иммунизацией и ревакцинирующей прививкой против краснухи в СЗФО с 2002 по 2011 гг.
и мониторинг иммунитета к краснухе в индикаторных группах населения
3.3. Характеристика генотипов вируса краснухи, циркулирующих
в России до 2005 г. и в 2009-2011 гг
ГЛАВА 4. ЗНАЧИМОСТЬ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ В ПЕРИОД СПОРАДИЧЕСКОЙ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ КРАСНУХОЙ
4.1. Организация лабораторного обследования больных
с экзантемными заболеваниями в СЗФО
4.2. Частота лабораторного подтверждения диагноза «корь»
и «краснуха» при обследовании больных с экзантемными заболеваниями
ГЛАВА 5. РАСПРОСТРАНЕНИЕ ПАРВОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В СЕВЕРО-ЗАПАДНОМ ФЕДЕРАЛЬНОМ ОКРУГЕ
5.1. Частота обнаружения антител класса 1рМ к парвовирусу В
у больных с экзантемными заболеваниями на территориях СЗФО

5.2. Серопревалентность парвовирусной инфекции среди
беременных женщин на отдельных территориях СЗФО
5.3. Вспышки парвовирусной инфекции в СЗФО
ГЛАВА 6. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ПАРВОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ И ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ИЗОЛЯТОВ РУ19, ЦИРКУЛИРУЮЩИХ В СЕВЕРО-ЗАПАДНОМ ФЕДЕРАЛЬНОМ ОКРУГЕ
6.1. Лабораторная диагностика парвовирусной инфекции в системе надзора за экзантемными инфекциями
6.2. Молекулярно-генетическая характеристика геновариантов парвовируса В19, изолированных на территориях СЗФО
в 2010-2011 гг
ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
ПРИЛОЖЕНИЕ 1. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ ПОСТНАТАЛЬНОЙ КРАСНУХИ И ПАРВОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
ПРИЛОЖЕНИЕ 2. НУКЛЕОТИДНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ИЗОЛЯТОВ РУВ
ПРИЛОЖЕНИЕ 3. ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ДРЕВО ШТАММОВ ВИРУСА КРАСНУХИ, ВЫДЕЛЕННЫХ В СНГ В 2004-2009 гг

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
а.о. - аминокислотный остаток АТ - антитела
ВКИ - врожденная краснушная инфекция ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения ИФА - иммуноферментный анализ КДЛ - клинико-диагностическая лаборатория НАО - Ненецкий автономный округ
НИИЭМ - научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии нк - нуклеотид
ННМЦ - Национальный научно-методический центр
ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция
п.о. - парные основания
ПВИ - парвовирусная инфекция
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РНК - рибонуклеиновая кислота
СВК - синдром врожденной краснухи
СЗФО - Северо-Западный федеральный округ
СПбРЦ - Санкт-Петербургский Региональный центр
ФБУН - федеральное бюджетное учреждение науки
ЦРБ - центральная районная больница
CDC - Centers for Disease Control
NCBI - National Center for Biotechnology Information
PV В19 - Human parvovirus В19, парвовирус В

Выделение парвовируса В19 in vitro возможно на первичных культурах клеток человека и обезьян: культуры клеток костного мозга, печени плода, пуповинной крови, периферической крови, линии мегакариобластных клеток человека МВ-02 и UT-7/Epo-Sl, линии клеток эритроидной лейкемии человека JK-1 и KU812Ep6 [228, 247, 275, 280, 285]. В лабораторной практике метод не применяют следствии трудоемкости и дороговизны клеточных линий и реагентов.
Для детекции ДНК парвовируса человека применяются Western blot и dot-blot гибридизация [208, 249]. В случае прямой гибридизации, обычно в формате slot-blot или dot-blot (точка-пятно), применяются проба полноразмерной вирусной ДНК, меченной 32Р, дигоксигенином или биотином, и хеми-люминесцентные субстраты. Анализ занимает около 30 часов. Чувствительность метода составляет приблизительно 105 копий /мл.
Метод гибридизации in situ позволяет локализовать специфические вирусные нуклеиновые кислоты внутри любых морфологически целых клеток [215, 217]. С помощью этого метода можно исследовать аспират костного мозга у пациентов с апластическим кризом или гипопластической анемией, эмбриональные ткани. Требуется колориметрическая детекция окрашенных продуктов. Чувствительность метода - от 1,5 х 105 до 3 х 10'1 копий генома/мл [215]. Применение люминесцентных субстратов в гибридизации in situ позволило повысить чувствительность метода. По некоторым данным чувствительность методов увеличивается в ряду dot-blot-гибридизация - колориметрическая in situ гибридизация - люминесцентная in situ гибридизация [208].
Для обнаружения ДНК PV В19 широко применятся ПЦР. Причем в 2% случаев ДНК PV В19 выявляют у людей с IgM(-)/IgG(-) [88, 185, 186, 249]. Проведение ПЦР исследования предполагает использование плазмы периферической и пуповинной крови, амниотической жидкости, слюны, носоглоточных смывов и мазков из зева. Рекомендуется одновременное применение нескольких пар праймеров, так как не все праймеры могут выявить штаммы парвовируса 3 генотипа [94]. Для решения специальных задач возможно использование усовершенствованного метода ПЦР с защитой гибридизации (PCR-