Введение в культуру in vitro и in vivo видов рода Passiflora L.

• Автор: Кириллов, Алексей Александрович
• Шифр специальности: 03.01.06, 03.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 139 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Введение

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 История интродукции пассифлор

1.2 Особенности распространения и экологии представителей рода

Passiflora

1.3 Ресурсный потенциал пассифлор в культуре

1.4 Восприимчивость к галловой нематоде как проблема практической

интродукции пассифлор в условия защищенного грунта

1.5 Использовании прививки в производстве маракуйи

1.6 Микроклональное размножение пассифлор

1.7 Систематика и молекулярная филогения пассифлор
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 3. ВВЕДЕНИЕ ПАССИФЛОР В КУЛЬТУРУ IN VITRO
3.1 Изолирование и стерилизация первичных эксплантов
3.2 Клональное микроразмножение пассифлор
3.3 Влияние регуляторов роста и минерального состава питательной среды на коэффициент размножения
3.4 Получение интактного материала пассифлор с помощью прививки
3.6 Укоренение in vitro и адаптация растений-регенерантов к условиям in vivo

ГЛАВА 4. ВВЕДЕНИЕ ПАССИФЛОР В КУЛЬТУРУ IN VIVO
4.1 Общая характеристика коллекции
4.2 Особенности адаптации пассифлор к оранжерейной культуре
ГЛАВА 5. ОЦЕНКА УСТОЙЧИВОСТИ ПАССИФЛОР К ГАЛЛОВЫМ НЕМАТОДАМ
5.1 Восприимчивость пассифлор к галловым нематодам
5.2 Влияние способа прививки и типа подвоя на рост и развитие некоторых видов и сортов пассифлор
ГЛАВА 6. ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ
6.1 Таксономическая характеристика коллекции
6.2 Характеристика исследуемых участков генома
6.3 Филогенетические связи видов рода Passiflora
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Род Passiflora L. - крупнейший в семействе Passifloraceae и включает 575 видов (Jorgensen et al., 2012), распространенных, главным образом, в тропиках и субтропиках Нового Света, 22 вида происходят из Юго-Восточной Азии, Австралии и Океании. Почти все пассифлоры являются травянистыми или одревесневающими лазающими лианами, 10 видов представлены кустарниками и невысокими деревьями, ещё реже среди них встречаются однолетние травы (Killip, 1938; Feuillet, MacDougal, 2007). Род богат эндемичными редкими видами (Ocampo et al., 2010). Большой ресурсный потенциал рода Passiflora, включающего декоративные, плодовые и лекарственные виды, до настоящего времени полностью не раскрыт.
Крупные коллекционные фонды ботанических садов являются живым генным банком для выявления и отбора ресурсно-значимых видов растений, проведения биотехнологических работ в области микроклонального размножения и оздоровления, а также для длительного хранения генетического материала in vitro (Litz et al., 2005; Черевченко и др., 2008). Сегодня микроклональное размножение разработано для небольшого числа видов и сортов пассифлор (Faria, Segura, 1997; Alexandre et al., 2008; Pinto et al., 2010; Paikrao et al., 2012), в том числе, для плодовых сортов P. edulis Sims и красивоцветущих сортов P. 'Guglielmo Betto', P. ‘Manta P. x allardii Lynch, (Pipino et al., 2008, 2010; Braglia et al., 2009). Основные трудности введения в культуру in vitro связаны с сильной эндофитной контаминацией первичных эксплантов. Поиск приемов, позволяющих уменьшить заражение материнских растений и добиться стабильной стерильной культуры, является ключом к успешному культивированию и длительному хранению in vitro полезных и редких видов пассифлор.

описал развитие триплоидных растений P. foetida из половинок эндосперма после удаления зародыша семени. Регенерация наблюдалось на полутвердой среде MC при добавлении 0,5 мг/л ИУК, 2 мг/л БАП и 250 мг/л пептона, а также при добавлении 2 рМ БАП + ГК3 1 г/л и гидролизата казеина.
В последнее время значительно возрос интерес к выявлению в частях растений естественных антиоксидантов, способных заменить синтетические антиоксиданты, поскольку последние вызывают токсичные побочные эффекты, такие как рак. Хорошо известно, что культура растительных тканей in vitro способна производить вторичные метаболиты в больших количествах, чем это возможно выделить из тканей живых растений, выращенных in vivo (Fujitha et al., 1981). Культура каллуса является одним из основных биотехнологических подходов при получении лекарственных веществ из растений. Так, каллусную культуру листовых эксплантов Р. foetida успешно использовали для получения антиоксиданта СС]4 и исследования его действия на крыс (Rasool et al., 2011). Также культуру in vitro этого вида использовали для изучения дифференциации клеток секреторных трихом из зиготических эмбрионов и исследования их потенциала для выделения пассифлорина (Rosa, Domelas, 2012). Суспензионную культуру P. garckei, полученную на среде В5-2 (Gamborg et al., 1968) и дополненную 2,4D 2 мг/л при 25°С, Fraccaroli et al. (1991) использовали при разработке преаналитического метода для определения метаболического профиля. Культуру in vitro также использовали при изучении антиоксидантной активности листьев Р. edulis (Silva et al, 2013).
Ряд работ затрагивают разработку методов культуры in vitro в целях дальнейшей генетической трансформации. Особую значимость эти исследования приобрели для Р. edulis var. edulis и P. edulis var. flavicarpa. Вирусы PWV (Вирус древесности страстоцвета) и Xanthomonas campestris pv. passißorae наиболее опысные патогены этой культуры (Bueno dos Reis et al., 2005) (Vieira, Cameiro, 2004; Alfenas et al., 2005).