Совершенствование методов диагностики и оценки эффективности вакцинопрофилактики бешенства животных

• Автор: Истомина, Мария Александровна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Щелково
• Количество страниц: 120 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ.

Список сокращений

Введение

Актуальность темы

Цель и задачи исследований

Научная новизна исследований

Практическая значимость работы

Основные положения, выносимые на защиту

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Бешенство. Характеристика болезни

1.2 Эпизоотическая ситуация по бешенству на территории РФ

1.3 Характеристика возбудителя бешенства
1.3.1 Морфология и химический состав
1.3.2 Иммуногенные свойства
1.4 Профилактика и меры борьбы
1.4.1 Специфическая профилактика
1.5 Лабораторная диагностика
Заключение
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.2.1 Разработка тест-системы на основе скй-ЕЫБА для выявления
антигена вируса бешенства в слюне
2.2.1.1 Получение компонентов тест-системы на основе скй-ЕЫБА
2.2.1.2 Тест-система на основе боСЕЫБА для выявления антигена вируса бешенства в слюне
2.2.2 Разработка тест-системы на основе точечного анализа с применением иммунозолотого маркера для индикации антигена вируса бешенства в слюне

2.2.3 Выявление антигена вируса бешенства методом контрастной
иммунофлюоресценции
2.2.4 Набор реагентов для определения уровня специфических антител в
сыворотке крови вакцинированных против бешенства животных методом
непрямого ИФА
3 ОБСУЖДЕНИЕ
4 ВЫВОДЫ
5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Список литературы
Приложения

Список сокращений
ВНА - вируснейтрвлизующие антитела
ВП - ветеринарные правила
ГА - гемагглютинирующие антитела
ИФА - иммуноферментный анализ
КРС - крупный рогатый скот
КСА - комплементсвязывающие антитела
ЛА - лизирующие антитела
МКА - моноклональные антитела
MPC - мелкий рогатый скот
МФА - метод флюоресцирующих антител
ОП - оптическая плотность
ОТ-ПЦР - обратнотранскриптазная полимеразная цепная реация
ПА - преципитирующие антитела
ПЦР - полимеразная цепная реация
РДП - реакция диффузионной преципитации
PH - реакция нейтрализации
РНК - рибонуклеиновая кислота
РНП - рибонуклеопротеин (рибонуклеокапсид)
РСК - реакция связывания комплемента РФ - Российская Федерация СП - санитарные правила Т.н. - тысяча нуклеотидов
ТФ-ИФА - твердофазный иммуноферментный анализ
ЦНС — центральная нервная система
ABLV - Australian bat lyssavirus
CVS - Challenge Virus Standard
dot-ELISA - точечный иммуноферментный анализ
DUVV - Duven-hage virus
EBLV - European Bat Lyssa Virus

1 Обзор литепат-*-?-н
вагусе сердца [159]. С использованием моноклональных антител дантт-ткгм методом может проводиться дифференциация лиссавирусов [257].
Реакцию связывания комплемента применяют как для обнаружеттпя нуклеопротеина вируса бешенства, так и для выявления антирабическптх комплементсвязывающих антител в сыворотке крови вакттинировантчг-гчтх против бешенства животных и людей [2, 59, 172]. Для достижения высокой специфичности реакции в первом случае используют моноспецифическгую анти-М сыворотку с высоким титром антител, во втором — очищенвд&д й концентрированный антиген (нуклеопротеин) вируса бешенства. Дэннселй метод обладает низкой чувствительностью, поэтому он не нашел применетзгия в диагностических лабораториях, им пользуются в исследовательсгЕслих лабораториях.
Реакция диффузионной преципитации используется для выявлевгия нуклеопротеина вируса бешенства в пробах мозга. Антитела-преципитиыикг и ГОМОЛОГИЧНЫе ИМ аНТИГеНЫ (нуклеопротеин) ИМеЮТ СВОЙО'ЗГВО диффундировать в агаровом геле и при соединении образовывать видиччзгые визуально линии преципитатов - комплексов «антиген-антителго». Преимуществами метода являются простота постановки реакции: и
возможность исследования несвежего патологического материала, контаминированного бактериальной микрофлорой [16]. Однако матер1з:ал5 консервированный в формалине, глицерине, спирте, ацетоне, не пригоден .длдтя исследования в РДП. Данным методом можно выявить антиген бешенства, присутствующий в исследуемом материале в высоких концентрацтесздх, чувствительность метода составляет 45-70% [66]. Кроме того, имеются сведения о получении ложноположительных результатов данной реакхдрии [66]. Поэтому РДП используют как дополнительный метод диагностлЕоси бешенства. В РФ основным производителем коммерческой тест-системы ДЛЯ диагностики бешенства методом РДП является ГНУ ВНИТИБП (Щелково).
Радиошшунный метод основан на связывании меченпэпых радионуклеидом специфических антител с рабическим антигеном:: в