Стабилизация биологически активных соединений методом включения их в структуру природных биоразлагаемых полимерных материалов

• Автор: Волосова, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Ставрополь
• Количество страниц: 133 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,
СИМВОЛОВ И ЕДИНИЦ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Анализ методов получения, свойств биоразлагаемых композитов и их применение в качестве основы для иммобилизации биокатализаторов
1.2. Иммобилизация биологически активных веществ на носители различной природы
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ, ОБРОРУДОВАНИЕ И МЕТОДЫ ИС
СЛЕДОВАНИЯ
2-1. Материалы и реактивы
2.2. Оборудование
2.3. Методы исследования
2.3.1. Определение удельной активности растворимого трипсина
2.3.2. Приготовление фосфатного буферного раствора
2.3.3. Метод определения прочности полимерных материалов при деформации растяжения
2.3.4. Определение степени набухания полимерных материалов из
жидкой фазы воды
2.3.5. Количественное определение белка в растворе
2.3.6. Количественное определение удельной активности Р-гиалуронидазы
2.3.7. Определение активности лизоцима
2.3.8 Проведение апробации биоразлагаемых пленочных материалов на экспериментальных животных
2.3.9. Методы математической и статистической обработки материалов
Глава 3. КОНСТРУИРОВАНИЕ БИОРАЗЛАГАЕМЫХ МАТЕРИАЛОВ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ ФЕРМЕНТАМИ
3-1 Синтез биоразлагаемых полимеров как основы для иммобилизации ферментов
3.2. Иммобилизация фермента р - гиалуронидазы
3.2.1 Влияние pH среды на удельную активность растворимого и

иммобилизованного фермента (3 - гиалуронидазы
3.2.2. Влияние температуры на удельную активность растворимого
и иммобилизованного фермента Р - гиалуронидазы
3.2.3. Изучение кинетики ферментативной реакции
3.3. Иммобилизация фермента трипсина
3.3.1. Влияние pH среды на удельную активность растворимого и иммобилизованного фермента трипсина
3.3.2. Влияние температуры на удельную активность растворимого
и иммобилизованного фермента трипсина
3.3.3. Влияние времени постановки ферментативной реакции и количества фермента на изменение удельной активности растворимого и иммобилизованного фермента трипсина
3.4. Иммобилизация фермента лизоцима и исследование факторов, влияющих на активность растворимого и иммобилизованного фермента лизоцима
3.4.1. Влияние pH среды на удельную активность растворимого и иммобилизованного фермента лизоцима
3.4.2. Влияние температуры на удельную активность растворимого
и иммобилизованного фермента лизоцима
3.4.3. Изучение влияния времени постановки ферментативной реакции на изменение удельной активности растворимого и иммобилизованного фермента лизоцима
3.5. Апробация биоразлагаемых материалов с иммобилизованным
трипсином на экспериментальных животных
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,
СИМВОЛОВ И ЕДИНИЦ
УФ - ультрафиолетовая область
пэвд - полиэтилен высокого давления
ЭАК - сополимер этилена с акриловой кислотой
БЦ - бактериальная целлюлоза
ПЭНП - полиэтилен низкой плотности
ПАВ - поверхностно-активные вещества
БАВ - биологически активные вещества
ПЭ - полиэлектролит
ХТР -а-химотрипсин
А - альгинат натрия
Р1Х - поли-Ь-лизин
ДЭАЭ-целлюлоза - диэтиламиноэтилцеллюлоза
- карбоксиметилцеллюлоза
- поливиниловый спирт
- поперечно-сшитые ферментные кристаллы
- поперечно-сшитые ферменты
- поперечно-сшитые ферментные агрегаты
- композиты из одностенных углеродных нанотрубок
- оптическая плотность
- государственный стандартный образец
- фармакопейная статья предприятия
- этилендиаминтетрауксусная кислота
ФГБОУ ВПО - федеральное государственное бюджетное образователь-СГУ ное учреждение «Ставропольский государственный уни-
верситет»
МЦ - метилцеллюлоза
ДАЦ - диальдегидцеллюлоза
ТХУ - трихлоруксусная кислота

ПСФК

ПСФА
ОСНТ
ОП,Б

ЭДТА

цифическую реактивность организма. Полисахариды, как известно, также стимулируют защитные силы организма и тем самым повышают его устойчивость к различного рода неблагоприятным воздействиям, в том числе к инфекциям. Таким образом, предложенный авторами состав обусловливает комбинированную биологическую активность композиции.
Шеховцовой Т.Н. и др. (2007) обобщены результаты цикла исследований, посвященных разработке ферментативных методов определения биологически активных соединений - ингибиторов, активаторов и субстратов растворимых и иммобилизованных ферментов классов оксидоредуктаз (пероксидаз, алкоголь-дегидрогеназ) и гидролаз (щелочных и кислых фосфатаз), выделенных из различных источников. Обсуждены предложенные авторами новые оригинальные подходы к направленному повышению чувствительности, селективности и экс-прессности методов. Приведены многочисленные примеры использования разработанных ферментативных методик в анализе широкого круга объектов.
В работах Солдатовой Л.С. и Бабич О.О. (2010) изучены современные химические способы модификации ферментов, позволяющие увеличить каталитическую активность и стабильность. Представлены преимущества использования магнитных наночастиц для получения стабильных иммобилизованных ферментных препаратов. Установлено, что иммобилизация химотрипсина на наночастицах БезОд, модифицированных аминогруппами, приводит к переходу 88 % фермента в твердую фазу. Показано изменение оптимальных диапазонов температур и pH, а также повышение стабильности для иммобилизованного химотрипсина по сравнению с растворимым.
Воробьевой О.В. (2004) разработаны методы ковалентной иммобилизации фермента липазы на биосорбентах, полученных путем активации поверхности пористого носителя методами окисления и диазотирования. Получены каталитически стабильные и активные ферментные препараты. Установлено, что на активность иммобилизованной различными методами липазы оказывают влияние структурные, физико-химические характеристики сорбентов и методы им-