Разработка технологии глубинного культивирования гриба Trichophyton verrucosum

• Автор: Тищенко, Елена Викторовна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 127 с. : ил.

1. Обзор литературы

1.1 Общее состояние проблемы микозов животных

1.2 Культурально-морфологические свойства возбудителей дерматомикозов

1.3 Микроскопия как важнейший метод изучения дерматомикозов

1.4 Действие возбудителей микозов на иммунную систему макроорганизма

1.5 Современные средства специфической защиты от микозов

2. Собственные исследования

2.1 Материалы и методы

2.2 Результаты исследований

2.2.1 Оптимизация состава питательной среды и параметров культивирования Trichophyton verrucosum

2.2.1.1 Влияние углеводов на развитие культуры Trichophyton verrucosum

2.2.1.2 Влияние аэрации и температуры на развитие Trichophyton verrucosum в глубинных условиях
2.2.1.3 Развитие Trichophyton verrucosum при различных дозах инокулята (ВПМ)

2.2.1.4 Апробация культивирования Trichophyton verrucosum в
производственных биореакторах
2.2.2 Световая и сканирующая электронная микроскопия
Trichophyton verrucosum при глубинном и поверхностном
культивировании
2.2.3 Изучение антигенных свойств глубинной биомассы
Trichophyton verrucosum
2.2.4 Экономические показатели технологии получения биомассы
Trichophyton verrucosum в глубинных условиях
Обсуждение результатов исследований
Выводы
Практическое использование полученных научных
результатов
Рекомендации по использованию научных
выводов
Библиографический список
Приложения

Актуальность работы. Несмотря на интенсивное развитие ветеринарной медицины и, в частности ветеринарной дерматологии, трихофития по-прежнему имеет значительный и стабильный удельный вес среди кожных болезней животных в большинстве стран мира.
Эта болезнь распространена повсеместно и наносит ощутимый экономический ущерб за счет снижения прироста живой массы и качества кожевенного сырья, увеличения затрат на проведение лечебнооздоровительных мероприятий (Борисова Л.И., 1986; Поляков И.Д., Иванова Л.Г., 1994; Кухар Е.В., 2006).
Существующие технологии получения вакцин против микозов (Саркисов А.Х., Петрович С.В., Никифоров Л.В. и др., 1972; Летягин К.П., Саркисов К.А., Панин А.Н., Маноян М.Г., 1997; Соловьев Н.П., 2004; Лазовский В.А., 2007) основаны на культивировании грибов только поверхностным способом. Однако, как известно, такой способ культивирования промышленных штаммов микроорганизмов по современным требованиям биотехнологии нельзя считать технологичным. При развитии на твердых средах и, особенно, при снятии с поверхности агаризованных сред споры возбудителей микозов могут загрязнять производственные помещения, а процесс культивирования целевых штаммов длительный (более 20 суток) и трудоемкий.
Анализ опубликованной информации показывает, что ранее проводились исследования по разработке технологии глубинного культивирования несовершенных грибов, к которым относится и Trichophyton verrucosum (Мирзаев М.Н., Кононова С.Ю., 1985; Баласова А.И., Бабаян Е.Ю., Булатова A.A. и др.,1985). Полученные авторами данные позволили заменить промышленную технологию культивирования гриба Beauveria bassiana

аэрация, объем вносимого посевного материала. Поэтому именно по этим показателям проводили оптимизацию питательной среды для культивирования гриба Trichophyton verrucosum на жидкой среде в глубинных условиях.
В связи с тем, что до настоящего времени практически отсутствуют данные о глубинном культивировании гриба Trichophyton verrucosum, наши исследования были начаты с конструирования питательной среды, подбора режимов и параметров культивирования.
В качестве источников углерода и энергии были апробированы глюкоза, сахароза, крахмал, картофельный отвар. Варианты питательных сред готовили путем внесения в них разных количеств и сочетаний перечисленных углеводов, а их эффективность оценивали по интенсивности развития гриба на них. В качестве минеральных компонентов среды апробированы разные соотношения NaN03, MgSC>4, CaCL2, КН1РО4. На основе этих предварительных экспериментов была подобрана питательная среда, представленная в таблице 2.
Таблица
Питательная среда для глубинного культивирования гриба Trichophyton verrucosum
Компоненты среды Количество, г/л
NaN03 9,0
MgS04 0,6
CaCL2 8,0
КН2Р04 1,6
глюкоза 20,0
картофельный отвар*
*количество, мл