Роль конститутивного андростанового рецептора в регуляции ингибитора клеточного цикла p21

• Автор: Казанцева, Юлия Александровна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 105 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Клеточный цикл
1.2. Регуляция клеточного цикла
1.3. Система контроля клеточного цикла. Контрольные точки
1.4. Универсальный ингибитор клеточного цикла белок р
1.5. Структура и регуляция активности р
1.6. Регуляции экспрессии гена Cdknla (р21)
1.7. Белок р53 как опухолевый супрессор и основной регулятор транскрипции гена Cdknla (р21)
1.8. Белок FoxOl осуществляет контроль соблюдения баланса между пролиферацией и доступностью питательных веществ через регуляцию экспрессии Cdknla (р21)
1.9. Структура и регуляция активности рецептора CAR
1.10. Участие рецептора CAR в стимуляции деления клеток и подавлении апоптоза
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.2. Методы исследования
2.2.1. Обработка животных индукторами
2.2.2. Выделение микросом печени животных
2.2.3. Определение каталитической активности сур2Ь
2.2.4. Приготовление лизатов из клеток печени
2.2.5. Выделение ядерных экстрактов из клеток печени
2.2.6. Вертикальный электрофорез белков в полиакриламидном геле в денатурирующих условиях

2.2.7. Полусухой электроперенос белков на нитроцеллюлозную мембрану
2.2.8. Иммунохимический анализ белков
2.2.9. Иммунопреципитация хроматина
2.2.10. Выделение суммарной клеточной РНК и получение кДНК
2.2.11. ПЦР с детекцией в реальном времени
2.2.12. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Активация рецептора CAR под действием ТСРОВОР
3.2. Активация рецептора CAR приводит к увеличению массы печени грызунов
3.3. Следствием активации рецептора CAR является снижение содержания ингибитора клеточного цикла белка р21 в клетках печени
3.4. Снижение функциональной активности транскрипционного фактора р53 при активации рецептора CAR
3.5. Подавление функциональной активности транскрипционного фактора Foxol под действием активированного рецептора CAR
3.6. Следствием активации CAR является увеличении экспрессии белков-регуляторов клеточного цикла
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Akt - протеинкиназа; потенциальный онкопротеин;
ATR и ATM - протеинкиназы, активирующиеся при нарушениях репликации ДНК; САК - Cdk activating kinase - киназа, активирующая Cdks фосфорилированием;
CAR - constitutive androstane receptor - конститутивный андростановый рецептор; Ccndl - ген, кодирующий белок циклин D1;
Cdc25 - белки семейства фосфатаз, снимающие ингибиторное фосфорилирование с Cdks;
Cdk(s) - cyclin dependent kinase - циклин-зависимая(ые) киназа(ы);
Cdknla - ген, кодирующий белок р21;
Chkl и Chk2 - эффекторные протеинкиназы, регулирующие прогрессию клеточного цикла;
CKI - cyclin dependent kinase inhibitor - ингибитор циклинзависимых киназ; сМус - транскрипционный фактор; потенциальный онкопротеин;
Сур - цитохром Р450;
E2F1 - транскрипционный фактор; потенциальный онкопротеин;
FoxOl - forkhead box protein Ol - белок семейства forkhead класса О, опухолевый супрессор, транскрипционный фактор, регулирующий активность гена Cdknla (р21);
Gadd45P - growth arrest and DNA damage induced p - белок, ответственный за реакцию организма на стресс;
Mdm2 - mouse double minute 2 - убиквитиновая лигаза типа ЕЗ; важный негативный регулятор активности р53; потенциальный онкопротеин;
NADPH - никотинамид динуклеотид фосфат восстановленный;
PBREM - фенобарбитал-чувствительный энхансерный модуль;
PCNA - proliferating cell nuclear antigen - субъединица ДНК-полимеразы;
Rb - retinoblastoma tumour suppressor - опухолевый супрессор;
фосфоенолпируват, тогда как G6Pase способствует дефосфорилированию глюкозо-6-фосфатазы в глюкозу. Транскрипционный фактор FoxOl увеличивает экспрессию генов этих ферментов, связываясь с инсулино-чувствительной последовательностью (IRS). Коактиватором в этом случае служит белок PGCla (Puigserver et al., 2003). Связываясь с ним в ядре, FoxOl взаимодействует с чувствительной последовательностью в промоторе гена, что приводит к запуску транскрипции. При насыщении организма, увеличивается концентрация глюкозы в крови, поджелудочная железа выделяет в кровь гормон инсулин, который приводит к активации фосфоинозитид-3 киназы (PI3k), которая в свою очередь активирует киназу Akt, наблюдается подавление активности FoxOl.
Инсулин, факторы роста (IGF1) цитоплазма
деградация
Рис. 5. Схематичекое изображение путей регуляции активности транскрипционного фактора Рох01. Р13кУАк1 сигнальный путь инактивирует транскрипционный фактор Рох01, приводя к выходу белка из ядра. В цитоплазме белок подвергается разрушению, либо взаимодействует с белками-шаперонами 14-3-3, что способствует накоплению неактивной формы Рох01 в клетке. Киназа ЖК фосфорилирует Рох01, что приводит к транслокации белка в ядро, где он подвергается процессам ацетилирования/деацетилирования и стимулирует экспрессию генов-мишеней. Приведены примеры генов-мишеней.
Подобно тому, как клетки останавливают деление в ответ на повреждение ДНК, наблюдается остановка пролиферации в ответ на недостаток питательных веществ и энергии. Под влиянием стрессов, причиной которых может послужить голод,